Vícesložkové režimy vakcinace proti Chlamydia Trachomatis navozují protilátkovou a T buněčnou odpověď a urychlují odstranění infekce u modelu primátů jiného než lidského původu

Vyvinout vakcínu proti pohlavně přenosným chorobám je mezinárodní prioritouInfekce Chlamydia trachomatisbojovat proti pokračujícímu celosvětovému šíření infekce. Theoptimální imunizacestrategie ještě musí být plně objasněna. Cílem této studie bylo zhodnotitimunizační strategiev modelu nehumánních primátů (NHP). Makakové cynomolgus (Macaqua fascicularis) byli imunizováni různými vícesložkovýmiprime-boost imunizacea následně stimulována C. trachomatis SvD v dolním genitálním traktu. Imunizační antigeny zahrnovaly rekombinantní proteinový antigen CTH522 adjuvovaný s CAF01 nebo hydroxidem hlinitým, MOMP DNA antigen a MOMP vektorové antigeny (HuAd5 MOMP a MVA MOMP).

Klikněte sem a získejte bylinnou cistanche pro prevenciInfekce Chlamydia trachomatis

Všechny antigenní konstrukty byly vysoce imunogenní a vyvolávaly významné systémové odpovědi IgG specifické pro C. trachomatis. Zejména skupiny očkované proteinem CTH522 zvýšily rychlý a silný specifický IgG v séru. Mapování specifických B buněčných epitopů v MOMP ukázalo, že všechny vakcinované skupiny rozpoznaly epitopy blízko nebo uvnitř variabilních domén (VD) MOMP, s konzistentní VD4 odpovědí u všech zvířat. Kromě toho sérum ze všech vakcinovaných skupin mohlo in vitro neutralizovat SvD, SvE a SvF. Protilátkové reakce se projevily na vaginální a oční sliznici, která vykazovala detekovatelné hladiny IgG. Vakcíny také indukovaly buněčně zprostředkované reakce specifické pro C. trachomatis, jak je ukázáno in vitro stimulací a intracelulárním cytokinovým barvením mononukleárních buněk periferní krve (PBMC). Obecně platí, že skupiny očkované proteinem (CTH522) vytvořily multifunkční odpověď CD4 T buněk, zatímco skupiny očkované DNA a vektorem také vytvořily odpověď CD8 T buněk. Po vaginální expozici C. trachomatis SvD se ukázalo několik očkovaných skupinurychlené vymizení infekce, ale zejména skupina DNA, posílena CTH522 s adjuvans CAF01 k dosažení avyvážený CD4/CD8T buněčná odpověď kombinovaná s anIgG odpověď, ukázalurychlené vymizení infekce.

KLÍČOVÁ SLOVA vakcína, infekce,imunologie, bakterie, CD4/CD8 lymfocyty,Chlamydie trachomatis

Úvod

Genitální infekce Chlamydia trachomatis způsobují ročně odhadem 131 milionů nových případů na celém světě (1) a představují významný globální zdravotní problém tím, že mohou vyvolávattěžké komplikacejako pánevnízánětlivé onemocnění, mimoděložní těhotenství, aneplodnost(2, 3). Antibiotika stále nabízejí účinnou léčbu infekcí C. trachomatis. Vzhledem k tomu, že infekce je asymptomatická až v 75 procentech případůvětšina infekcí je ponechána bez léčbya přenos se nepřeruší (3). Panuje obecná shoda, že nejúčinnější zbraní proti pokračujícímu šíření chlamydiových infekcí je profylaktická vakcína (4).

Navzdory několika letům výzkumu není vakcína dosud na trhu. To je částečně způsobeno složitým dvoufázovým životním stylem C. trachomatis. Jedinečný dvoufázový životní cyklus C. trachomatis s intracelulárním i extracelulárním stádiem je výzvou pro imunitní systém. Má se za to, že ochranná imunita by měla kromě sérotypově specifických protilátek sestávat z imunitních odpovědí zprostředkovaných buňkami (CMI) (5–13). Navíc vytváření slizniční imunity v genitálním traktu představuje další výzvu pro vakcínu.

V této studii jsme testovali různé vakcinační strategie na modelu infekce chlamydiemi NHP. Strategie byly zaměřeny na indukci protilátek, CD4 T buněk a/nebo CD8 T buněčné odpovědi. Kromě toho některé z vakcín byly zaměřeny na vyvolání slizniční odpovědi. Antigeny vybrané pro tuto studii byly založeny na proteinu hlavní vnější membrány. Nejprve byl vytvořen konsensus antigen MOMP (Con E) založený na přibližně 1500 sekvencích sérovaru E ompA, aby bylo zajištěno vysoké pokrytí epitopem proti nejrozšířenějším kmenům C. trachomatis (14). Za druhé, byl použit syntetický fúzní protein, CTH522. CTH522 je rekombinantní, upravená verze MOMP, obsahující heterologní imunorepetice oblastí VD4 ze čtyř genitálních Ct sérovarů (D, E, F a G) (11). Strategií rekombinantního fúzního proteinu je indukovat zesílené reakce na ochranné epitopy a indukovat zkříženou sérovarovou ochranu (11).

Dalším klíčovým rysem současného experimentu bylo paralelní hodnocení CTH522 ve dvou výrazně odlišných adjuvantních systémech (AlOH a CAF01) v kombinaci s intranazálním boosterem. Tato kombinace byla testována na myších a miniprasatech, kde bylo prokázáno, že je vysoce imunogenní indukcí vysokých titrů neutralizačních protilátek, CD4 plus T buněk produkujících IFN-g a zrychlené clearance genitální infekce C. trachomatis (11–13 , 15). Kromě toho toto srovnání odráželo nedávnou první klinickou studii u člověka, kde bylo prokázáno, že obě formulace jsou imunogenní a kde CAF01 byl lepší v indukci neutralizačních sérových protilátek a imunitních reakcí zprostředkovaných Th1 buňkami (16). K vyvolání silných buněčných imunitních odpovědí, a konkrétně odpovědí CD8 T buněk kombinovaných s odpověďmi CD4 T buněk, byla část zvířat posílena imunogenem CT522/CAF01 po aktivaci Adeno vektorem pAL1112 (HuAd5-MOMP), MVA pox vektor nebo plazmidová DNA pcDNA3.1 dodávající MOMP Con E antigen (14, 17). Všechny tři vektory se ukázaly jako imunogenní u NHP a nedávno bylo prokázáno, že imunizační strategie kombinující tyto tři vakcíny a závěrečnou booster vakcinaci s adjuvovaným proteinovým antigenem indukovanými lepšími imunitními reakcemi a konzistentně zvyšovala clearance intravaginálního C. trachomatis u myší C. model infekce trachomatis (14).

V této studii prokazujeme, že různé kombinace vícesložkových imunizačních strategií s proteinovými vakcínami, DNA vakcínami a rekombinantními virovými vektorovými vakcínami v modelu nehumánních primátů (NHP) vedou k odlišným imunitním reakcím. Dále jsme pozorovali, že režim využívající priming DNA a protein (CTH522/CAF01) zvýšil urychlenou bakteriální clearance po genitální provokaci Chlamydia trachomatis.

Výsledek

Všechny vakcinační režimy se ukázaly jako bezpečné a vyvolaly významné systémové protilátkové odpovědi

Celkem 30 makaků cynomolgus bylo očkováno různými režimy primární vakcinace, včetně proteinových, DNA a vektorových vakcín a různými způsoby podávání, jak je znázorněno na obrázku 1 a v doplňkových obrázcích 6-10). Všechna zvířata zůstala během studie zdravá a nevyvinula se u nich měřitelné nepříznivé účinky na imunizace. Kromě toho jsme nepozorovali žádné významné výkyvy v hmotnosti nebo teplotě zvířat (doplňkové obrázky 1, 2).

V pevně stanovených časových bodech po imunizacích bylo odebráno sérum a hladiny CTH522 specifického IgG v séru byly vyhodnoceny pomocí ELISA. Všech 5 očkovaných skupin vytvořilo významnou sérovou CTH522 IgG odpověď (obrázek 2). Nicméně kinetika byla mírně odlišná u 5 očkovaných skupin. Všechna zvířata ve skupinách CTH522/AlOH plus IN, CTH522/CAF01 a CTH522/CAF01 plus IN zvýšila významný titr IgG pouze po 1 intramuskulární (IM) imunizaci a titr IgG zůstal významný do posledního bodu odběru (obrázky 2A- C). Hladiny IgG v séru se zvyšovaly o něco pomaleji ve skupinách DNA plus CTH522 a vektory plus CTH522, kde byla všechna zvířata sérokonvertována v týdnu 8 a v týdnu 4, v daném pořadí (obrázky 2D, E).

Skupiny CTH522/AlOH plus IN, CTH522/CAF01 plus IN a CTH522/CAF01 významně zvýšily sérové ​​IgG po 3. IM posilovací vakcíně v týdnu 16 (obrázky 2A C). Skupiny DNA plus CTH522 a vektory plus CTH522 významně zvýšily hladiny IgG v séru po IM boosteru protein/CTH522/CAF01 v týdnu 20 (obrázky 2D, E). Nebyly pozorovány žádné významné rozdíly v sérových protilátkových odpovědích po trojnásobné IM vakcinaci CTH522 formulovaným buď s CAF01 nebo AlOH adjuvans (obrázky 2A, B) a intranazální (IN) neadjuvované posilovací imunizaci v CTH522/AlOH plus IN a Skupiny CTH522/CAF01 plus IN neindukovaly žádné významné zvýšení titrů sérových IgG protilátek (obrázky 2A, B).

Kinetika sérové ​​IgG odpovědi odrážela kinetiku/hladiny ve vaginálních tekutinách, což ukazuje, že protilátky detekované na vaginálním povrchu pravděpodobně pocházejí z oběhu. Podobně hladiny očního IgG také následovaly hladiny IgG v séru, a jak bylo pozorováno v séru, ukázalo se, že IM booster ve skupinách DNA/vektor zvýšil titr očního IgG (doplňkový obrázek 3).

Sérové ​​protilátkové odpovědi jsou namířeny proti variabilním doménám 1, 3 a 4 v sekvenci MOMP

Dále bylo hodnoceno další objasnění rozpoznávání specifického epitopu sérovými protilátkami po různých vakcinačních režimech. Sérum bylo analyzováno ve 24. týdnu, tj. po intranazálních posilovacích vakcínách ve skupinách 1 a 2 a po IM posilovacích vakcínách ve skupinách DNA a vektorů (skupiny 4 a 5). Tyto analýzy byly provedeny s peptidovým polem pokrývajícím CTH522, skládajícím se z 15 merních peptidů s překrytím 14 aminokyselin.

OBRÁZEK ​​1 Návrh studie. Obrázek ukazuje použité skupiny, vakcíny a způsoby podání (intramuskulární, IM nebo intranazální, IN).

OBRÁZEK ​​2 (A–F) Odezvy sérových protilátek CTH522 IgG. Makakové cynomolgus byli imunizováni různými režimy prime-boost (n=5 na skupinu) a sérum bylo odebíráno každý druhý týden. Specifické protilátky CTH522 IgG v séru byly hodnoceny metodou ELISA a zde vyjádřeny jako titr na stupnici log10. Šedé šipky označují očkování. Každý řádek představuje jedno zvíře. Statistická významnost je označena hvězdičkami *p < 0,05 a **p < 0,01.

Obecně byly rozpoznávané peptidy umístěny blízko a uvnitř variabilních domén (VDs 1,3,4) MOMP. Skupina CTH522/AlOH dokonce vykazovala určité rozpoznání oblasti VD2. Všechna zvířata vytvořila silnou odpověď proti oblasti VD4, která obsahuje konzervovaný neutralizační epitop VD4 (11). Skupina DNA vykazovala nejužší rozpoznání v rámci VD (obrázek 3), zatímco skupina vektorů vykazovala mírně širší vzor rozpoznávání. Skupiny CTH522/CAF01 a CTH522/AlOH vykazovaly nejširší uznání, zejména proti SvF a SvG.

Sérové ​​protilátky byly schopny neutralizovat SvD, SvE, SvF in vitro

Pro vyhodnocení schopnosti vakcínou indukovaných protilátek inhibovat infekci C. trachomatis jejích cílových buněk byl proveden in vitro neutralizační test. Pomocí tohoto testu jsme zkoumali neutralizaci obou SvD, SvE a SvF. Pro test bylo použito sérum z týdne 24 a sérum z naivní skupiny bylo použito jako kontrola. Všech pět očkovaných skupin vykazovalo schopnost neutralizovat všechny tři sérovary (obrázek 4). Proti SvD skupina CTH522/AlOH plus IN vykazovala nejvyšší 50procentní neutralizační titr, zatímco proti SvE skupina DNA/CTH522, těsně následovaná skupinou CTH522/AlOH plus IN, vykazovala nejvyšší neutralizační titry. I když všechny skupiny byly schopny neutralizovat SvF, 50procentní neutralizační titry byly pro všechny skupiny proti tomuto sérovaru o něco nižší ve srovnání s SvD a SvE. Vektory plus skupina CTH522 vykazovaly nejnižší 50procentní neutralizační titry ze všech vakcinovaných skupin.

Různé vakcinační režimy vyvolaly odlišné profily T-buněk

Pro vyhodnocení vakcinací indukovaných reakcí T-buněk byly PBMC shromážděny během období studie a kryokonzervovány. PBMC z týdne 0/základní linie a týdne 22 byly znovu stimulovány peptidovými pooly (MOMP) a hodnoceny na intracelulární cytokiny intracelulárním cytokinovým barvením (ICS) a další cytometrií. PBMC byly obarveny na následující buněčné markery: CD3, CD4, CD8, CD154, CD137 a cytokiny: IFN-g, IL-2, TNF-a, IL-22, IL{{14} }A. Strategie hradlování je ukázána na doplňkových obrázcích 4, 5. Stimulace PBMC pomocí MOMP peptidového poolu vyvolala významnou odpověď. Procento antigenně specifických CD154 plus CD4 plus T buněk exprimujících kombinace IL2, IFN-g a TNF-a se zvýšilo 2 týdny po poslední imunizaci (W22) ve všech očkovaných skupinách (obrázek 5). Většina těchto T buněk byla multifunkční v tom smyslu, že exprimovaly několik cytokinů. Procento antigenově specifických CD137 plus CD8 T buněk produkujících cytokiny bylo zvýšeno pouze v DNA a vektorové skupině (W22), (obrázek 6, ukazující multifunkčnost CD137 plus CD8 plus T buněk). v

OBRÁZEK ​​3 Mapování epitopu séra ve 24. týdnu. Makakové Cynomolgus byli imunizováni podle různých režimů prime-boost (n=5 na skupinu) a sérum bylo odebráno v týdnu 24. Překrývající se reakce IgG pomocí peptidového pole na CTH522 15mer peptidy jsou prezentovány jako střední signál pro každou skupinu s peptidy VD1 (oranžová), VD2 (zelená), VD3 (modrá) a VD4 ze SvD, E, F a G (červená) zvýrazněnými barvami.

OBRÁZEK ​​4 In vitro neutralizace séra C. trachomatis SvD, SvE a SvF. Makakové cynomolgus byli imunizováni podle různých režimů prime-boost (n=5 na skupinu) a sérum bylo odebráno po dokončení imunizačního plánu (24. týden). C. trachomatis SvD, SvE a SvF byly inkubovány se sérem z každého zvířete a schopnost sérových protilátek inhibovat infekci byla hodnocena inkubací směsi protilátka-bakterie na HaK buňkách a barvením na inkluze. Černá čára ukazuje SvD, šedá čára SvE a tmavě šedá tečkovaná čára SvF. Tečkovaná červená čára označuje reciproční 50procentní neutralizační titr každého sérovaru.

OBRÁZEK ​​5 Odezvy CD4 T buněk. Multifunkční analýzy týden 22. Produkce cytokinů CD4 plus T buňkami testovaná pomocí ICS. Jsou znázorněny multifunkční odpovědi po stimulaci se zásobami překrývajících se peptidů z MOMP. Velikost každého koláče je úměrná procentu CD154 plus CD4 plus T buněk exprimujících alespoň jeden cytokin, včetně IFN-g, TNF-a a IL-2, a podílům buněk exprimujících IFN-g a /nebo TNF-a a/nebo IL-2 cytokiny jsou zobrazeny v každém koláči.

Očkováním vyvolané zrychlené vymizení vaginální infekce C. trachomatis SvD

Aby se vyhodnotila ochranná účinnost imunitních odpovědí vyvolaných vakcínou, byla zvířata vystavena vaginální infekci s 5x107 IFU C. trachomatis SvD. Po inokulaci byla vaginální chlamydiová zátěž stanovena pomocí PCR detekce chlamydiové DNA ve vaginálních výtěrech (obrázek 7). Infekce byla odstraněna u všech zvířat do týdne 5 ve skupině DNA plus CTH522/CAF01 a ve skupině Vector plus CTH522, do týdne 6 ve skupině CAF01/CTH522 a do týdne 8 ve skupině CTH522/Alum plus skupina IN (obrázek 7). V kontrolní skupině se v 8. týdnu 80 procent zvířat zbavilo infekce a 1 zvíře zůstalo PCR pozitivní v 9. týdnu. IN booster ve skupině CTH522/CAF01 plus IN nezvýšil ochranu (obrázek 7). Log-rank test (Mantel-Cox) srovnávající všechny skupiny ukázal hodnotu P 0,0994 a porovnáním každé skupiny jednotlivě s kontrolními skupinami pouze skupina DNA-CTH522 vykázala hodnotu P pod 0,05 (P hodnota=0.0257).

Diskuse

Tato studie byla navržena tak, aby indukovala buněčnou imunitu (CD4 a CD8) kombinovanou s humorální imunitou a aby přizpůsobila fenotyp adaptivní imunity vakcínám proti chlamydiím na bázi MOMP. Hodnotíme imunogenicitu a protektivní účinnost kombinovaných vícesložkových imunizačních strategií s proteinovými vakcínami (CTH522, Con E), DNA vakcínou a rekombinantním virovým vektorem (MVA MOMP) a vakcínami založenými na adenovektoru u primátů jiného než lidského původu ( NHP) model.

Data ukázala, že všechny imunizační režimy byly imunogenní a indukovaly jak buněčnou, tak humorální odpověď sestávající z neutralizačních protilátek (obrázky 2-4). Proteinová vakcína CTH522 formulovaná buď s CAF01 nebo AlOH vykazovala rychlou indukci systémového antigen-specifického IgG (obrázek 2). Nepozorovali jsme žádné významné rozdíly mezi odpověďmi vyvolanými vakcínami s adjuvans AlOH a CAF01, což je v souladu s odpověďmi pozorovanými u lidí s těmito adjuvans (16). Režimy DNA a vektorové vakcinace také vyvolaly významné titry antigen-specifických systémových protilátek, které se výrazně zvýšily po imunizaci proteinovým boosterem (obrázek 2). V souladu s našimi výsledky předchozí studie na myších také ukázala, že režimy proteinové vakcinace vyvolaly vyšší hladiny protilátek specifických pro antigen ve srovnání s antigeny DNA a vektorových vakcín a také účinně zvýšily titry pro tyto skupiny (15).

MOMP obsahuje čtyři VD, které jsou vystaveny na povrchu infekční formy Ct. Tyto oblasti jsou hlavním cílem imunity závislé na protilátkách, a to jak prostřednictvím neutralizačních protilátek, tak imunity zprostředkované Fc receptorem (18). Předchozí studie ukázaly, že adoptivní přenos vakcínou indukovaného neutralizačního séra výrazně snížil časné vylučování bakterií po infekci C. trachomatis (6, 11, 19–21). Zdá se tedy, že protilátky hrají roli při neutralizaci/kontrole počátečního inokula, pravděpodobně ve spolupráci s buněčnou imunitou. Podrobným mapováním epitopů B buněk jsme zjistili rozpoznání VD oblastí 1, 3, 4 ve všech skupinách vakcín. DNA a vektorové skupiny také rozpoznávaly VD1, 3 a 4 oblasti. Tyto skupiny však vykazovaly mírně užší rozpoznání v rámci těchto VD ve srovnání se skupinami CAF01 a AlOH, což pravděpodobně odráží, že antigen Con E ve skupinách vektorů neobsahuje oblast VD4 SvF a G (obrázek 3). Rozpoznání oblasti VD4 korelovalo se schopností všech vakcinačních strategií indukovat neutralizační protilátky proti SvD, SvE a SvF.

Parenterální imunizace pomocí CTH522 v CAF01 a AlOH indukovala významné hladiny slizničních protilátek (IgG) v genitálním traktu a oku a hladiny korelovaly se sérovými titry (doplňkový obrázek 3, týden 18). DNA a vektorové vakcíny samotné neindukovaly slizniční IgG, což odráží nižší sérové ​​titry ve srovnání se samotným proteinem. Nicméně, po CTH522/CAF01 IM booster, tyto skupiny signifikantně zvýšily sérové ​​Ab. hladin a vaginálního i očního IgG na stejné úrovni jako samotný protein (doplňkový obrázek 3, týden 18). Paralelní hodnocení CTH522 v různých primárních adjuvantních systémech (AlOH a CAF01) následované dvojnásobným intranazálním posílením antigenem nemělo žádný posilující účinek na hladiny slizničních protilátek (doplňkový obrázek 3, týden 22). Celkové hladiny IgG v séru se tedy odrážejí na sliznici pro všechny skupiny. Nedávná studie fáze I na lidech také hodnotila paralelní hodnocení CTH522 v AlOH a CAF01, po kterém následovalo dvojnásobné intranazální posílení. Zde slizniční IgG titry také dobře korelovaly s koncentracemi IgG v séru (16). Na rozdíl od zjištění v modelu NHP však studie na lidech prokázala účinek posilování IN ve skupině CAF01, což vedlo ke zvýšeným hladinám IgG i IgA. Bohužel hodnocení IgA nebylo v současné studii možné kvůli omezenému materiálu a falešně pozitivním signálům vyplývajícím ze zkříženě reagující sekundární protilátky použité v testu. Obě studie používaly zařízení VaxINator, které je navrženo k atomizaci nosních léků pro adsorpci sliznicí. Nosní dutina člověka je však mnohem prostornější než u NHP a dalo by se spekulovat, že by to mohlo ovlivnit rovnoměrnou distribuci a vychytávání antigenu.

Několik studií na lidech i hlodavcích prokázalo význam imunity Th1 T buněk a efektorového cytokinu IFN-g (8, 22–27). Naproti tomu o ochranné úloze CD8 T buněk je známo méně (28–33). Všechny vakcinační skupiny indukovaly CD4 T buňky, ale pouze DNA a vektorové skupiny vykazovaly CD8 T buněčnou odpověď (obrázky 6 a 7). Na základě naměřených cytokinů byly CD8 T buňky složeny z omezeného počtu podskupin ve srovnání s CD4 T buňkami, které mohly být rozděleny do 6 nebo více podskupin, z nichž většina produkovala několik cytokinů (obrázek 7). CD4 T buňky vykazovaly více podskupin exprimujících IL-2- než CD8 T buňky, které primárně zahrnovaly pouze jednu podskupinu-2-exprimující IL, tu, která exprimovala IL-2 spolu s IFN-g a TNF- a (obrázek 6). CD8 T buňkám dominovala velká populace produkující pouze IFN-g, zatímco další dominantní podskupina CD8 T buněk produkovala jak IFN-g, tak TNF-a. Tento vzorec cytokinů mezi CD4 T buňkami a CD8 T buňkami není nepodobný tomu, co bylo pozorováno u myší při testování vakcinačních strategií schopných indukovat CD4 i CD8 T buňky (34).

Podobná strategie zahrnující DNA vakcinaci následovanou posílením imunostimulačních komplexů (ISCOM) proteinu MOMP (35) vyvolala silnou ochranu proti plicní infekci Chlamydia muridarum. V této studii DNA MOMP (nebo MOMP/ISCOMS) vyvolala významně nižší ochranu (35). Jiná studie ukázala, že vakcinace myší DNA MOMP plazmidy bez podjednotkové vakcíny nedokázala ochránit před genitální provokací C. trachomatis (36), což naznačuje, že pro strategii DNA je přínosné, když je doplněna podjednotkovou vakcínou indukující CD4 T buňky a protilátky. . Je třeba poznamenat, že DNA vakcíny vykazovaly v klinických studiích na lidech relativně nízké profily imunogenicity, což bude možná muset být řešeno v budoucích studiích (37).

Ačkoli infekční dávka Ct použitá v této studii je vyšší než dávka při přirozené infekci u lidí, byla vybrána tak, aby bylo zajištěno, že byla infikována všechna zvířata, což je důležité s ohledem na malý počet zvířat v každé skupině. Dávka je v souladu s dávkou používanou v předchozích studiích, která se pohybovala od 106 do 108 (38, 39). Snížení dávky v našem modelu vedlo ke zvýšeným variacím ohledně příjmu infekce (data nejsou uvedena). Byly také použity nižší dávky podávané opakovaně (40, 41). Toto však není optimální protokol, je-li cílem otestovat ochrannou účinnost vakcín, zejména pokud ochranu zprostředkovává přirozená imunita před dokončením infekčního protokolu. Lze spekulovat, že použití vysoké dávky může vyžadovat imunitní odpověď, která obsahuje všechna ramena imunitního systému, jako jsou antigenově specifické CD4 T buňky, CD8 T buňky a také neutralizační protilátky, aby bylo možné snížit bakteriální úrovně. To by také vysvětlovalo, proč neutralizační protilátky indukované ve všech skupinách nevedly k významné ochraně ve všech skupinách [ačkoli jsme zaznamenali trend k časné ochraně ve většině skupin, kde se předpokládá, že protilátky hrají roli (obrázek 7)] . V současné době se snažíme vyvinout fyzikálně relevantnější model.

Celkově naše data ukázala, že antigen CTH522 formulovaný v adjuvans CAF01 nebo AlOH může indukovat jak multifunkční T buňky, tak neutralizační protilátky v NHP. Naše výsledky navíc naznačují, že heterologní vakcinační strategie sestávající z DNA vakcíny a CTH522/CAF01 podjednotkové vakcíny představuje slibnou vakcinační strategii pro indukci mnohostranné imunitní reakce s vysokou hladinou neutralizujících Abs v kombinaci se silnými odpověďmi CD4 a CD8 T buněk, které může významně urychlit vymizení infekce C. trachomatis.

Požádat o víc:

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp% 2fTel% 3a plus % 7b % 7b0% 7d

Obchod Wecistanche

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop