Mechanismus Radix Astragali a Radix Salviae Miltiorrhizae zmírňuje hypertenzní poškození ledvin

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Guangjian Hou,¹Yuehua Jiang,²Yuekun Zheng,¹Meng Zhao,³ Yuanzhen Chen,¹Yonghao Ren,⁴Congan Wang,¹ a Wei Li⁴

Poškození ledvin vyvolané hypertenzí (HRD) je celosvětově důležitým problémem veřejného zdraví a socioekonomickým problémem. Bylinný pár Radix Astragali- (RA-) Radix Salviae Miltiorrhizae (RS) je běžně předepisovaný bylinný přípravek pro léčbu HRD. Základní mechanismy jsou však nejasné. Účelem naší studie je prozkoumat mechanismus kombinace Radix Astragali (RA) a Radix Salviae Miltiorrhizae (RS) zlepšující HRD regulací renálního sympatiku. Třicet 24-týdenních spontánně hypertenzních potkanů ​​(SHR) jako experimentální skupina byla náhodně rozdělena do skupiny RA, skupiny RS, skupiny RA plus RS, skupiny valsartanu a skupiny SHR a šest věkově odpovídajících Krysy Wistar Kyoto (WKY) jako kontrolní skupina. Po 4 týdnech podávání odpovídajícího léku byla provedena venepunkce k odběru krve a přípravě séra pro analýzu. K pozorování renální hemodynamiky byl použit barevný dopplerovský ultrazvukový diagnostický přístroj. K detekci norepinefrinu (NE), epinefrinu (E), angiotensinu II (Ang II) a mozkového natriuretického peptidu typu B (BNP) byl použit enzymatický imunosorbentní test. Současně byly ledviny okamžitě odstraněny a pozorovány pod transmisním elektronovým mikroskopem, aby byly pozorovány ultrastrukturální změny. Imunohistochemicky byla detekována koncentrace transformujícího růstového faktoru- 1 (TGF{10}}), receptoru angiotensinu typu 1 (AT1) a oxidu dusnatého (NO). Naše výsledky ukázaly, že ultrasonografie ledvin u potkanů ​​neprokázala žádný významný rozdíl ve velikosti ledvin mezi skupinami. Skupina RA plus RS měla zjevně snížený index vaskulární rezistence. Hladiny NE, E, BNP, Ang II, AT1 a TGF- 1 byly sníženy (P<0:05), and="" the="" density="" of="" no="" was="" increased.="" pathological="" damage="" of="" the="" kidney="" was="" alleviated.="" in="" conclusion,="" the="" results="" of="" the="" present="" study="" suggested="" sympathetic="" overexpression="" in="" the="" pathogenesis="" of="" hrd.="" the="" combination="" of="" ra="" and="" rs="" may="" inhibit="" the="" hyperexcitability="" of="" sympathetic="" nerves="" maintain="" the="" normal="" physiological="" structure="" and="" function="" of="" kidney="" tissue="" and="" has="" a="" protective="" effect="" on="" the="" cardiovascular="">

Cistanche deserticola zabraňuje onemocnění ledvin, kliknutím sem získáte vzorek

1. Úvod

Poškození ledvin vyvolané hypertenzí (HRD) je kritickým důvodem pro terminální onemocnění ledvin [1]. Mezi příčinami terminálního onemocnění ledvin představuje HRD téměř 34 procent z celkového počtu případů [2]. Studie ukázaly, že progrese HRD úzce souvisí s hyperexcitabilitou renálního sympatického nervu [3]. Hyperexcitabilita renálního sympatiku postihuje pacienty s HRD především ve třech aspektech, včetně změn krevního tlaku, progrese onemocnění ledvin a kardiovaskulárních komplikací [3, 4]. Hyperexcitabilita sympatického nervu může vést ke zvýšené objemové zátěži, způsobit abnormální aktivaci RAS, v konečném důsledku zvýšit krevní tlak a podpořit kardiovaskulární komplikace [5]. Vzruch sympatického nervu navíc přímo působí na ledviny, což způsobuje zvýšení krevního tlaku [6].

V tradiční čínské medicíně je v současnosti jedním z nejpoužívanějších způsobů léčby hypertenzního poškození ledvin „oživení čchi a podpora krevního oběhu“. Radix Astragali (RA, Huangqi v čínštině) a Radix Salviae

Miltiorrhizae (RS, Danshen v čínštině) je nejčastěji používaným lékem na kompatibilitu. V našem předchozím výzkumu jsme se zaměřili na zkoumání role tradiční čínské medicíny při chronickém onemocnění ledvin. Studie ukázaly, že RA se běžně používá k léčbě nefrotického syndromu [7]. RA se používá ve velkém množství a může snížit krevní tlak, zvýšit hladinu oxidu dusnatého v ledvinách, zlepšit expresi NOS, zachycovat volné radikály kyslíku a blokovat oxidační reakci. K ochraně strukturální a funkční integrity renálních cév a zlepšení vaskulární endoteliální funkce [8] vykazuje RS četné farmakologické aktivity, jako je vazorelaxace, antioxidační a antiapoptotické účinky v renálních buňkách [9].

Na základě výše uvedeného pochopení je výzkum účinnosti RA a RS proti chronickému onemocnění ledvin poměrně jasný. Farmakologické účinky RA a RS na hypertenzní poškození ledvin jsou však stále nejasné. Tato studie je proto zaměřena na zkoumání účinků bylinného páru RA a RS u spontánně hypertenzních potkanů ​​(SHR) a stanovení základního mechanismu regulací renálního sympatického nervu.

výhody cistanche deserticola: léčba onemocnění ledvin

2. Materiály a metody

2.1. Zvířata a experimentální metody.Třicet 17-týdenních samců SHR a šest krys Wistar Kyoto (WKY) stejného věku byli získáni od Beijing Weitong Lihua Experimental Animal Technology Co., Ltd., Čína (č. SCXK (Peking) 2012-0001 ). Byli krmeni v experimentálním zvířecím centru přidružené nemocnice Shandongské univerzity tradiční čínské medicíny. Všechny postupy projektu byly schváleny Etickou komisí Fakulty lékařství a zdravotnických věd pro výzkum zvířat, přidružená nemocnice Shandongské univerzity tradiční čínské medicíny.

Studie ukázaly, že k poškození ledvin SHR dochází v průměrném věku 6 měsíců, tedy po krmení jídlem a vodou po dobu 2 měsíců. Tabulka náhodných čísel je rozdělena na skupinu RA, skupinu RS, skupinu RA plus RS, skupinu valsartanu (používá se jako pozitivní kontrola), skupinu SHR a skupinu WKY. Skupině SHR a skupině WKY byl intragastricky podáván fyziologický roztok. SHR v ostatních skupinách (skupina RA, skupina RS, skupina RA plus RS a skupina valsartan) byly intragastricky podávány odpovídající léky jednou denně po dobu 28 dnů. Krevní tlak byl zaznamenáván v 7-denních intervalech.

2.2. Ultrasonografie ledvin a odběr tkání.Ultrasonografie ledvin byla provedena u malých zvířat v anestezii pentobarbitalem sodným (30 mg/kg, intraperitoneální injekce) pomocí barevného dopplerovského ultrazvukového diagnostického přístroje (M5Vet, Mindray, Čína) [10]. K záznamu a analýze renální hemodynamiky byl použit počítačový software (M5Vet).

Po 4 týdnech podávání léčiva byly krysy usmrceny intraperitoneální injekcí pentobarbitalu sodného (40 mg/kg). Pro odběr krve a přípravu séra pro analýzu byla provedena venepunkce. K detekci norepinefrinu (NE), epinefrinu (E), angiotensinu II (Ang II) a uretického peptidu BioMed Research International (BNP) byl použit enzymatický imunosorbentní test (ELISA). Současně byly okamžitě odstraněny ledviny, jedna část byla fixována 4% paraformaldehydem a koncentrace transformujícího růstového faktoru- 1 (TGF- 1), receptoru angiotensinu typu 1 (AT1) a oxidu dusnatého ( NO) byly detekovány imunohistochemicky (IHC). Ve druhé části byly ultrastrukturní změny pozorovány pod transmisním elektronovým mikroskopem (TEM, JEOL 1200EX, Electron Optics Laboratory Co. Ltd., Japonsko). Zbývající tkáně byly homogenizovány pro test western blot.

2.3. IHC barvení TGF- 1, AT1 a NO v renální tkáni potkana.Renální řezy byly obarveny králičím anti-krysím TGF- 1, AT1 a NO (Abcam, ředění 1:150, Čína; Ab92486, Ab18801 a Ab66127) při 4 stupních přes noc. Poté byly řezy inkubovány s AffiniPure kozím anti-králičím IgG konjugovaným s křenovou peroxidázou (HRP-) (ZSGB-Bio, ZB-2301, 1:100, Čína) při pokojové teplotě po dobu 60 minut [10]. Tkáňové řezy byly obarveny diaminobenzidinem (DAB, ZSGB-Bio, ZLI-9031, 1:100) a poté kontrastně barveny hematoxylinem po dobu 5 minut [10]. Řezy byly pozorovány pod mikroskopem (Carl Zeiss Jena, Německo). K analýze byl použit systém analýzy obrazu Image-Pro Plus 6.0 (Media Cybernetics, USA) a z každého řezu bylo náhodně odečteno 8 nepřekrývajících se zorných polí. Byla vypočtena integrovaná optická hustota (IOD) a byla použita pro statistickou analýzu.

2.4. Statistická analýza.Statistické analýzy byly provedeny pomocí Statistical Package for the Social Sciences, verze 22.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Všechna data byla popsána jako průměr ± standardní odchylka (± s) hodnoty. Rozdíly mezi skupinami byly analyzovány jednosměrnou analýzou rozptylu (ANOVA), následovanou Student-Newman-Keulsovým testem. Hodnoty P menší než 0,05 byly považovány za statisticky významné.

cistanche výhody: léčba onemocnění ledvin

3. Výsledky

3.1. Renální hemodynamika krys.Ultrasonografie ledvin u potkanů ​​neprokázala mezi skupinami žádný významný rozdíl ve velikosti ledvin. Ve srovnání se skupinou WKY byl však index vaskulární rezistence ve skupině SHR vyšší (P<0:05), and="" each="" treatment="" significantly="" decreased="" the="" vascular="" resistance="" index="" (p=""><0:05, figure="" 1).="" the="" valsartan="" group="" and="" the="" ra+rs="" group="" obviously="" decreased="" (table="" 1).="" we="" speculate="" that="" these="" two="" drugs="" may="" reduce="" renal="" blood="" flow="" resistance="" and="" protect="" renal="" function="" in="" clinical="">

3.2. Biomarkery sérového poškození ledvin u potkanů.Sérové ​​hladiny NE, E, BNP a Ang II byly všechny zvýšeny ve skupině SHR než ve skupině WKY (P<0:05). in="" addition,="" the="" rs="" group="" has="" decreased="" levels="" of="" e="" and="" bnp="" than="" the="" shr="" group="" (p=""><0:05), and="" the="" ra="" group="" has="" decreased="" ne,="" e,="" and="" bnp="" levels="" (p=""><0:05). simultaneously,="" the="" valsartan="" group="" had="" obviously="" reduced="" levels="" of="" ne,="" e,="" bnp,="" and="" ang="" ii="" (p=""><0:05), and="" the="" herb="" pair="" of="" ra="" and="" rs="" obviously="" decreased="" the="" levels="" of="" ne,="" e,="" bnp,="" and="" ang="" ii="" (p=""><0:05, table="">

cistanche doplněk

4. Diskuze

TCM získala rozsáhlou pozornost a výzkum díky své dlouhodobé účinnosti a menšímu počtu vedlejších účinků [11]. TČM věnuje pozornost nejen zlepšení symptomů pacientů, ale zaměřuje se také na úpravu konstituce pacienta a zlepšení kvality života [12]. HRD obvykle souvisí s nedostatečností „qi“ a „krve“. Studie ukázaly, že RA může zlepšit kardiovaskulární funkce a zvýšit koronární průtok krve [13, 14]. Současně může léčba RA zlepšit renální fibrózu indukovanou TGF- 1- [15]. Studie ukazují, že RS může zlepšit vaskulární funkci a strukturu a významně zlepšit výskyt hypertenze [16] a je známo, že RS a jeho extrakty mají antioxidační vlastnosti a neuroprotektivní účinky [17]. Kombinace RA a RS má synergický efekt na RLZ.

Renální intersticiální fibróza (RIF) je hlavní patologickou změnou od různých chronických onemocnění ledvin k terminálnímu onemocnění ledvin [18]. Studie zjistily, že pro chronické onemocnění ledvin je tubulointersticiální poškození důležitější než glomerulární onemocnění [19]. Inhibice epiteliálně-mezenchymálního přechodu renálních tubulárních epiteliálních buněk je považována za účinný přístup k léčbě renální intersticiální fibrózy [20–22]. V současné době je věnována větší pozornost mechanismům HRD, jako je hyperaktivace renin-angiotenzinového systému (RAS), léze malých cév a zvýšení retence sodíku a vody. Ledvina je hustě inervována sympatickými nervy, které hrají důležitou roli v regulaci homeostázy krevního tlaku [23]. Proto diskutujeme mechanismus renálního sympatického nervu u HRD.

Hlavní složky RAS, jako je Ang I a Ang II, lze detekovat v normálních lidských ledvinách. Studie zjistily, že aberantní aktivace RAS úzce souvisí s RIF [24]. Na jedné straně s kombinací receptorů Ang II a AT1 může abnormální exprese Ang II přímo stimulovat aktivitu TGF{2}} a přímo regulovat syntézu a degradaci extracelulární matrix (ECM), regulující zánětlivé mediátory v ledvinách. a zhoršující RIF [25, 26]. Druhým je, že Ang II může aktivovat signální dráhy stimulací systému RAS, který může vyvolat buněčnou proliferaci a zhoršit RIF. V naší studii kombinace RA a RS zjevně snížila hladiny BNP a Ang II. Spekuluje se, že RA a RS mohou účinně snižovat expresi Ang II, blokovat aktivaci RAS a inhibovat expresi TGF- 1, zpomalit progresi RIF a zabránit hypertenzi a poškození srdeční funkce (obrázek 4).

Mezitím studie zjistily, že v důsledku snížení renálního vaskulárního průtoku může stimulace renálních sympatických nervů způsobit hypertenzi [27]. Stimulační signály, jako je ischemie, hypoxie a NO, mohou aktivovat receptory renálních sympatických aferentních nervů a přenos do centrálního nervového systému [28, 29] a zvýšit aktivitu centrálního sympatického nervu aktivací neuronů v rostrální ventrolaterální dřeni, což způsobuje vazokonstrikci a zvýšený krevní tlak [30, 31]. V současnosti se jako hodnotící index aktivity sympatiku používají změny plazmatické koncentrace noradrenalinu [32]. V naší studii jsme zjistili, že NE a E ve skupině SHR byly signifikantně zvýšené; naznačuje, že u HRD existuje hyperexcitabilita sympatiku. A kombinace RA a RS zjevně snížila hladiny NE a E. Spekuluje se, že RA plus RS mohou účinně inhibovat přebuzený sympatický nerv u HRD.

Sympatický nervový systém reguluje krevní tlak a funkce srdce a ledvin uvolňováním katecholaminů. Současně může sympatický nervový systém aktivovat 1 receptor, což vede k uvolnění reninu a aktivaci RAS. Kromě toho může Ang II podporovat uvolňování katecholaminů, zvyšovat aktivitu sympatického nervu a podílet se na patofyziologickém procesu HRD [33].

Kromě toho má tato studie stále omezení. Složky RA a RS jsou složité a není možné určit, které konkrétní účinné látky hrály roli. Zkoumání farmakologického mechanismu nemůže být příliš jasné. Následný výzkum je třeba dále ověřit.

Závěrem lze říci, že výsledky této studie naznačují nadměrnou expresi sympatiku v patogenezi HRD. Kombinace RA a RS může inhibovat hyperexcitabilitu sympatických nervů, snižovat nadměrnou expresi Ang II, vyhýbat se abnormální aktivaci systému RAS a zlepšovat odpor krevního toku potkanů ​​ledvinami, v souladu s tím udržuje normální fyziologickou strukturu a funkci ledvinové tkáně a má ochrannou funkci. vliv na kardiovaskulární systém. Kromě toho jsou zapotřebí další komplexní studie, aby se prozkoumaly další možné mechanismy.

cistanche zkušenost

1. Nemocnice pro bolesti krku, ramen a lumbokrurální bolesti na Shandong First Medical University, Jinan 250062, Čína

2. Centrální laboratoř, přidružená nemocnice Shandongské univerzity tradiční čínské medicíny, Jinan 250011, Čína

3. Nemocnice tradiční čínské medicíny Rizhao, Rizhao 276826, Čína

4. Nefrologická klinika, Přidružená nemocnice Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250011, Čína

Dostupnost dat

Všechna data obsažená v této studii jsou k dispozici na vyžádání u příslušného autora.

Střet zájmů

Všichni autoři prohlašují, že nemají žádný střet zájmů.

Příspěvky autorů

Všichni autoři měli přístup k datům a podíleli se na psaní rukopisu. Všichni autoři přečetli a schválili konečný rukopis.

Poděkování

Tato studie byla podpořena Národní nadací přírodních věd Číny (č. 81673812), Akademickým propagačním projektem Shandong First Medical University (číslo grantu 2019QL003) a Plánem rozvoje lékařských a zdravotních technologií provincie Shandong (202002080788).

Reference

[1] PM Snijder, AR Frenay, AM Koning, et al., "thiosíran sodný zeslabuje angiotensinem II-indukovanou hypertenzi, proteinurii a poškození ledvin," Nitric Oxide, sv. 42, s. 87–98, 2014.

[2] PK Whelton, RM Carey, WS Aronow a kol., "2017 ACC/AHA/AAPA/ABC/ACPM/AGS/APhA/ASH/ASPC/N-MA/PCNA směrnice pro prevenci, detekci, hodnocení, a řízení vysokého krevního tlaku u dospělých: zpráva pracovní skupiny American College of Cardiology/American Heart Association o pokynech pro klinickou praxi," Hypertension, sv. 71, č.p. 6, s. e13–e115, 2018.

[3] L. Hering, M. Rahman, H. Hoch a kol., "2A-adrenoceptory modulují renální sympatickou neurotransmisi a chrání před hypertenzním onemocněním ledvin," Journal of the American Society of Nephrology, sv. 31, č. 4, s. 783–798, 2020.

[4] Y. Sata a MP Schlaich, "Potenciální role renální sympatické denervace založené na katetru u chronického a konečného onemocnění ledvin," Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics, sv. 21, č. 4, s. 344–352, 2016.

[5] EJ Johns, UC Kopp a GF DiBona, "Neurální kontrola renální funkce," Comprehensive Physiology, sv. 1, č. 2, s. 731–767, 2011.

[6] JH Jeong, IT Fonkoue, AA Quyyumi, D. DaCosta a J. Park, "Noční krevní tlak je spojen s aktivitou sympatického nervu u pacientů s chronickým onemocněním ledvin," Physiological Reports, sv. 8, č. 20, článek e14602, 2020.

[7] AP Li, L. Yang, T. Cui a kol., "Odhalení mechanismu Astragali Radix proti nefrotickému syndromu integrací lipidomiky a síťové farmakologie," Phytomedicine, sv. 77, článek 153274, 2020.

[8] M. Shahzad, A. Shabbir, K. Wojcikowski, H. Wohlmuth a GC Globe, „Antioxidační účinky Radix Astragali (Astragalus membranaceous a příbuzných druhů) při ochraně tkání před zraněním a nemocemi“, Současné cíle léčiv, sv. 17, č. 12, s. 1331–1340, 2016.

[9] JY Han, JY Fan, Y. Horie a kol., "Zlepšující účinky sloučenin odvozených z extraktu kořene Salvia miltiorrhiza na mikrocirkulační poruchy a poškození cílových orgánů ischemií a reperfuzí," Pharmacology & Therapeutics, sv. 117, č.p. 2, s. 280–295, 2008.

[10] W. Li, YH Jiang, Y. Wang a kol., „Ochranné účinky kombinace Radix Astragali a Radix Salviae Miltiorrhizae na ledviny spontánně hypertenzních potkanů ​​a renální vnitřní buňky“, Chinese Journal of Integrative Medicine, sv. 26, č. 1, s. 46–53, 2020.

[11] PP Hao, F. Jiang, YG Chen a kol., "Tradiční čínská léčba kardiovaskulárních onemocnění," Nature Reviews. Kardiologie, sv. 12, č. 6, str. 318, 2015.

[12] J. Qi, J. Yu, Y. Tan a kol., "Mechanismy ochrany čínské medicíny Xinmailong proti srdečnímu selhání u tlakem přetížených myší a kultivovaných kardiomyocytů," Scientific Reports, sv. 7, č. 1, článek 42843, 2017.

[13] R. Han, F. Tang, M. Lu a kol., "Astragalus polysaccharide ameliorates H2O2-induced human umbiliical wein endothelial cell damage," Molecular Medicine Reports, sv. 15, č. 6, s. 4027–4034, 2017.

[14] J. Yu, X. Zhang a Y. Zhang, "Astragaloside zmírňuje poškození myokardu u potkaního modelu akutního infarktu myokardu zvýšením regulace hypoxií indukovatelného faktoru-1 a signalizace Notch1/Jagged1," Molecular Medicine Reports , sv. 15, č. 6, s. 4015–4020, 2017.

[15] G. Shan, XJ Zhou, Y. Xia a HJ Qian, "Astragalus membranaceus zlepšuje renální intersticiální fibrózu inhibicí tubulárního epiteliálně-mezenchymálního přechodu in vivo a in vitro," Experimental and Therapeutic Medicine, sv. 11, č. 5, s. 1611– 1616, 2016.

[16] Y. Ma, W. Wang, J. Yang a kol., "Síťová farmakologická technika pro zkoumání synergických mechanismů Salvia miltiorrhiza a Radix Pueraria při léčbě kardiocerebrálních vaskulárních onemocnění," Evidence-based Complementary and Alternativní medicína, sv. 2020, ID článku 6937186, 18 stran, 2020.

[17] Y. Li, H. Chen, Y. Yang, et al., "Danshen formula granule and salvianolic acid a zmírnit etanolem indukovanou neurotoxicitu," Journal of Natural Medicines, sv. 74, č.p. 2, s. 399–408,

2020.

[18] H. Menn-Josephy, CS Lee, A. Nolin a kol., Renální intersticiální fibróza: nedokonalý prediktor progrese onemocnění ledvin u některých kohort pacientů, American Journal of Nephrology, sv. 44, č. 4, s. 289–299, 2016.

[19] P. Boor, T. Ostendorf a J. Floege, Renální fibróza: nové poznatky o mechanismech a terapeutických cílech, Nature Reviews. Nefrologie, sv. 6, č. 11, s. 643–656, 2010.

[20] BD Humphreys, SL Lin, A. Kobayashi, et al., "Sledování osudu odhaluje pericytový a nikoli epiteliální původ myofibroblastů při fibróze ledvin," The American Journal of Pathology, sv. 176, č.p. 1, s. 85–97, 2010.