Poranění při cvičení – – indukovaná ischemie ledvin – – reperfuze a ochranný účinek Herba Cistanches v kombinaci s vitamínem C u potkanů

Poranění ledvinové ischemie-reperfuze způsobené námahou a ochranný účinek herba Cistanches v kombinaci s vitamínem C u potkanů

další informace:ali.ma@wecistanche.com

Abstraktní:Cíl: Studovat Herba Cistanches v kombinaci s ochranným účinkem vitaminu C a mechanismem pohybu u potkanů ​​ischemicko-reperfuzní poškození ledvin．Metody: Náhodně rozdělte 96 7一týdenní samce potkanů ​​Wistar do 6 skupin: kontrolní skupina (skupina C ,12), skupina obecného tréninku (skupina M,1 2), skupina přetrénování (skupina OM,24), skupina cistanche plus přetrénování (skupina COM,16), skupina vitaminu C plus přetrénování (skupina VCOM,16), a cistanche plus vitamin C plus skupina přetrénování (skupina CVCOM,1 6), absolvujte 56denní vyčerpávající plavecký trénink. Skupina COM, skupina CVCOM s profesionální sondou pro výplach žaludku (ig), jednou denně, dávka 6．0 lg．kg-, objem Ig 5 ml．kg-; skupina VCOM, skupina CVCOM IP aplikujte intraperitoneální injekci, 100 mg. kg-, jednou denně, injekční objem je 0．5 ml; jiné skupiny, např. normální fyziologický roztok. Detekce biochemických parametrů močovinového dusíku v séru a sérového kreatininu o 24 hodin později po posledním tréninku．Výsledky:1)Během 8 týdnů přetrénování došlo u potkanů ​​k pohybu „renální ischemie-reperfuze“, ultrastruktura ledviny byla vážně poškozena , histopatologické změny evidentně, renální funkce byla vážně poškozena．2)Sérový kreatinin a vzestup dusíku močoviny v krvi．OM skupina (P<0．01), com=""><0．o1), vcom=""><0．01), cvcom=""><0．05) higher="" than="" in="" group="" c;="" com=""><0．05), vcom=""><0．05), cvcom=""><0．01)lower than="" the="" om="" group;="" com=""><0．05), cvcom=""><0．01)lower than="" the="" vcom="" group．3)sod="" activity="" decreased．om=""><0．01), com=""><0．01), of="" vcom=""><0．01), cvcom=""><0．05)lower than="" in="" group="" c;="" m=""><0．05), com=""><0．05), vcom=""><0．05), cvcom=""><0．01)higher than="" the="" om="" group;="" com=""><0．05), cvcom=""><0．01)higher than="" the="" vcom="" group．4)the="" content="" of="" mda="" increased,="" om=""><0．01), com=""><0．01), vcom="">< 0．o1),="" cvcom=""><0．05)higher than="" in="" group="" c;="" com=""><0．05), vcom="" group=""><0．05), cvcom=""><0．01)lower than="" the="" om="" group;="" com=""><0．05), cv—="" com=""><0．01)lower than="" the="" vcom="" group．conclusion：1)overtraining="" can="" induce="" renal="" ischemia-reperfusion="" in="" rats．2)cistanche="" deserticola="" y．c．ma="" and="" vitamin="" c="" can="" enhance="" the="" activity="" of="" sod,="" scavenging="" oxygen="" free="" radicals,="" reduce="" lipid="" peroxidation,="" they="" have="" a="" protective="" effect="" on="" exercise-induced="" ischemia-reperfusion="" kidney．3)cistanche="" is="" better="" than="" vitamin="" c,="" but="" they="" worked="" even="" better="" when="" taken="">

klíčová slova:herba Cistanches; vitamín C; cvičením indukovaná ischemie-reperfuze

Klikněte na produkty Cistanche herba

S rozvojem teorie moderní čínské medicíny, moderní teorie farmakologie a moderní biotechnologie se ve sportovní praxi používá více samostatných látek nebo receptur. Tradiční čínská medicína ukazuje své jedinečné přednosti díky svému vícecílovému, vícekanálovému účinku a téměř bez zakázaných složek. Dosáhlo některých úspěchů ve zlepšení fyzické funkce sportovců a zmírnění únavy. Když je tělo ve stabilním stavu, může být průtok krve ledvinami udržován relativně konstantní prostřednictvím regulačního mechanismu. Při namáhavém cvičení se mění průtok krve ledvinami pod vlivem nervových a humorálních faktorů. Vlivem redistribuce prokrvení různých orgánů se zvyšuje prokrvení aktivních orgánů, zejména svalů, a prudce klesá renální prokrvení, což je patrnější při kontinuální a zvyšující se intenzitě cvičebního procesu. Tento neúplný ischemický stav ledviny tvoří „námahem indukovanou renální ischemii“. Po ukončení cvičení se obnoví zásobení ledvin krví a po námahou vyvolané ischemii ledvin se vytvoří „reperfuze“. Abnormální zvýšení produkce volných radikálů hraje důležitou roli v procesu ischemicko-reperfuzního poškození. Výsledky ukazují, že Cistanche deserticola má farmakologické účinky zvýšení aktivity peroxiddismutázy a snížení peroxidu lipidů a může eliminovat poškození buněk těla nadměrnými volnými radikály; Vitamin C jako důležitý antioxidant v těle dokáže také účinně vychytávat volné radikály. Tato práce studuje účinky Cistanche deserticola v kombinaci s vitamínem C na ischemicko-reperfuzní poškození ledvin potkanů ​​a diskutuje jejich účinky a mechanismy při ischemicko-reperfuzním poškození, aby poskytla teoretický základ pro jejich klinickou aplikaci.

1 materiál

1.1 Zvířata

100 čistých samců potkanů ​​Wistar, stáří 42 dní, průměrná hmotnost (201,8 ± 14,1) g, poskytnuto Ústavem experimentálních věd na zvířatech, Ústav medicíny Pekingské univerzity, číslo licence scxk2006-0008. Během celého testu se teplota v laboratoři udržuje na 22 ± 2 stupně, relativní vlhkost je 55 procent ~ 75 procent a doba osvětlení se mění s přírodou. Všechny pokusné krysy byly krmeny základním krmivem (poskytnutým Oddělením pro vědu o experimentálních zvířatech, Department of Medicine, Peking University) a destilovanou vodou. Doba experimentu byla 63 dní a doba formálního školení byla 56 dní.

1.2 Experimentální medikace

Cistanche deserticola, vyráběná ve Vnitřním Mongolsku, byla zakoupena v drogerii Tongrentang v Pekingu, šarže č.: 120224536

Injekce vitaminu C (číslo šarže: 20120406), poskytnutá společností Beijing Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd.

1.3 Reagencie

Sérový kreatinin (SCR) byl stanoven metodou Jaffeho kyseliny pikrové, dusík močoviny v krvi (BUN) metodou diacetyl MONOOXIME a malondialdehyd (MDA) kolorimetricky; Superoxiddismutáza (SOD) byla stanovena metodou xanthinoxidázy za použití soupravy poskytnuté Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, souprava č. 2012051

1.4 Nástroje

Elektronické analytické váhy Bs224s (Sartorius, Německo), optický mikroskop (Olympus, Japonsko), automatický biochemický analyzátor alcyon300 (Abbott, USA), ultrafialový spektrofotometr 756mc (Shanghai Precision Instrument Factory) a gl{4}}g high- rychlost mrazicí odstředivka.

2 Metody

2.1 Seskupování zvířat

Po 4 dnech adaptivního krmení byli experimentální potkani 3 dny vyšetřováni s 20 minutami každodenního cvičení a jednotliví nevhodní plavci byli vyřazeni. Zbývající potkani byli náhodně rozděleni do 6 skupin: 12 v kontrolní skupině (skupina C), 12 ve skupině obecného tréninku (skupina M), 24 ve skupině s přetrénováním (skupina OM), 16 ve skupině s přetrénováním Cistanche deserticola ( COM skupina) a 16 ve skupině vitaminu C plus přetrénování (skupina VCOM) 16 potkanů ​​ve skupině Cistanche deserticola plus vitamín C plus přetrénovaná skupina (skupina cv com) bylo trénováno po dobu 56 dnů. Během tréninkového období byla skupině com a skupině cv com podávána sonda profesionální sondou jednou denně v dávce 6,01 g/kg a objemu 5 ml/kg; Skupina VCOM a skupina cv com byly intraperitoneálně injikovány v dávce 100 mg/kg jednou denně, s injekčním objemem 0,5 ml a stejným množstvím normálního fyziologického roztoku v ostatních skupinách.

2.2 experimentální metoda

2.2.1 schéma školení a zkoušek

Skupina C byla krmena rutinně bez jakéhokoli zásahu a necvičila v obvyklých časech. Skupina M absolvovala středně intenzivní plavecký výcvik a formální plavecký výcvik po dobu 8 týdnů. Trénujte 6 dní v týdnu, jednou denně, poprvé zaplavte 2{11}} kola a poté postupně zvyšujte. Plavejte vždy 60 minut o prvním víkendu, 90 minut denně o druhém víkendu a 120 minut denně o třetím víkendu. Toto množství cvičení udržujte dalších 5 týdnů. Tréninkové uspořádání ostatních skupin v prvních 3 týdnech je stejné jako u skupiny M a od čtvrtého týdne budou uspořádány vysoce intenzivní tréninky. Potkani byli pokaždé vycvičeni do vyčerpání. Standardem vyčerpání bylo, že se krysy nevynořily z vodní hladiny po dobu 10 sekund po potopení. Zvyšte váhu o 0,5 procenta v prvních třech týdnech, o 1 procento ve čtvrtém týdnu a o 2 procenta v pátém týdnu. Trénujte jednou denně. V 6. týdnu trénovali jednou denně ráno a odpoledne a v 7.-8týdnu trénovali jednou denně ráno, odpoledne a večer, což vše zvýšilo váhu o 5 procento . Na konci 8. týdne krysy ve skupinách C a M rostly normálně bez náhodného úmrtí. Úmrtnost potkanů ​​v jiných skupinách byla vyšší kvůli zvýšené hmotnosti, neschopnosti zotavit se z únavy a náhodnému úmrtí po tréninku. Ve skupině OM, skupině com, skupině VCOM a skupině CVCOM bylo 14, 13, 11 a 13 potkanů. Pro experiment bylo vybráno 10 krys v každé skupině a ostatní byli náhodně vyloučeni.

2.2.2 stanovení indexu

24 hodin po posledním plaveckém tréninku byly krysy v každé skupině mírně anestetizovány etherem. Krev byla odebrána z arteria carotis communis, antikoagulována roztokem citrátu sodného, ​​umístěna do 37 stupňové vody na 30 minut, centrifugována při 4 stupních 3000 ot./min po dobu 10 minut, odděleno a připraveno sérum a uloženo v chladničce při minus 20 stupňů pro budoucí použití. Rychle vyjměte obě ledviny, odstraňte fascie, vložte je do předem vychlazeného normálního fyziologického roztoku, aby se smyly krvavé skvrny, a vizuálně sledujte velikost, barvu a strukturu ledvin. Oddělte levou ledvinu, odeberte 0,5 g tkáně horního pólu ledvin, rozdrťte ji s 1,5 ml normálního fyziologického roztoku při 12 000 ot./min při 1 stupni, aby se vytvořil 10% homogenát ledvinové tkáně; Vzorky renální tkáně byly fixovány 10% formaldehydem, zabaleny do parafínu, vyrobeny na 4 um silné řezy, obarveny HE a byly pozorovány histopatologické změny.

3 Výsledky

3.1 patologické změny zátěže, Cistanche deserticola a vitamin C na ledvinách potkana

Po stanovení SCR a drdolu byly renální tkáně každé skupiny rozděleny na parafinové řezy, obarveny HE a histomorfologické změny byly pozorovány pod světelným mikroskopem. Pod světelným mikroskopem byla struktura ledvinové tkáně potkanů ​​ve statické kontrolní skupině a obecné tréninkové skupině normální, bez překrvení, degenerace a edému a v lumen renálních tubulů nebyl žádný tubulární typ. Ve skupině s přetrénováním došlo k překrvení glomerulu, edému, vakuolární degeneraci a expanzi lumen tubulárních epiteliálních buněk a malému počtu exfoliovaných klků a epiteliálních buněk v lumen. Histopatologické změny v ostatních skupinách byly lehčí než ty ve skupině s přetrénováním, s mírným edémem, vakuolární degenerací, expanzí lumen tubulárních epiteliálních buněk a bez proteinového typu a typu buněčné trubice. Nebyl žádný významný rozdíl v Pallerově skóre renálních tubulů mezi statickou kontrolní skupinou a obecnou tréninkovou skupinou (P > {{0}}.05), statická kontrolní skupina byla významně nižší než u jiných skupin (P < 0,01)="" a="" léčebná="" skupina="" byla="" významně="" nižší="" než="" u="" skupiny="" s="" přetrénováním="" (p=""><>

3.2 účinky cvičení, Cistanche deserticola a vitaminu C na sérum BUN a SCR u potkanů

Dusík močoviny v krvi a sérový kreatinin se významně zvýšily v každé skupině ve srovnání s kontrolní skupinou a významně se snížily ve skupině com, skupině VCOM a skupině CVCOM ve srovnání se skupinou OM (P < {{0}}.{{4}="" }5,="" p="">< 0.05="" a="" p="">< 0,01;="" ve="" srovnání="" se="" skupinou="" vcom="" se="" skupina="" com="" a="" skupina="" cvcom="" významně="" snížily="" (p="">< 0,05,="" p=""><>

3.3 Účinky cvičení, Cistanche deserticola a vitaminu C na aktivitu SOD a obsah MDA v ledvinovém homogenátu potkana.

Ve srovnání se skupinou OM se aktivita SOD ve skupině COM, skupině VCOM a skupině CVCOM výrazně zvýšila (P < {{0}}.05,="" p="">< 0.{{9}="" }5="" a="" p="">< 0.o1,="" v="" tomto="" pořadí);="" ve="" srovnání="" se="" skupinou="" vcom="" se="" významně="" zvýšila="" skupina="" com="" a="" skupina="" cvcom="" (p="">< o.{13}}5,="" p="">< 0.o1,="" v="" tomto="" pořadí).="" obsah="" mda="" v="" každé="" skupině="" byl="" významně="" vyšší="" než="" v="" kontrolní="" skupině="" a="" významně="" se="" snížil="" ve="" skupině="" com,="" skupině="" vcom="" a="" skupině="" cvcom="" ve="" srovnání="" se="" skupinou="" om="" (p="">< 0,05,="" p="">< 0,05="" a="" p="">< 0,01="" v="" uvedeném="" pořadí);="" ve="" srovnání="" se="" skupinou="" vcom="" se="" významně="" snížila="" skupina="" com="" a="" skupina="" cvcom="" (p="">< 0,05="" a="" p=""><>

4. Diskuze

Renální ischemicko-reperfuzní (R/R) poškození je komplexní patofyziologický proces a jeho specifický mechanismus nebyl plně objasněn. Volné radikály (OFR) však hrají důležitou roli ve výskytu a rozvoji I / R. Za normálních okolností může být v těle produkováno malé množství volných radikálů, ale v důsledku inaktivace enzymu volných radikálů systému v těle jsou volné radikály rychle odstraněny bez poškození. Během cvičení I/R zvyšuje produkci volných radikálů, což může vést k peroxidaci membránových lipidů, což má za následek změny fluidity, fluidity a permeability membrány a následně způsobit dysfunkci membrány, zejména destrukci mitochondriální membrány, která ovlivní metabolismus a funkce buněk a zasahují do fyziologické funkce celého orgánu. Antioxidační enzymy jsou hlavními látkami v těle, které eliminují volné radikály a snižují jejich poškození. Sod je jediný enzym s volnými radikály jako substrát mezi tisíci enzymů v aerobních organismech. Odstraňuje superoxidový anion tím, že katalyzuje superoxidový anion za vzniku peroxidu vodíku a chrání tělo před poškozením. Současně se v určitém rozsahu SOD kompenzačně zvýší, když se zvýší metabolismus volných radikálů. Proto je úroveň aktivity SOD známkou síly antioxidační kapacity. MDA je hlavním produktem buněčné peroxidace lipidů. Obsah MDA v mitochondriích je považován za citlivý index pro měření metabolismu volných radikálů. Kreatinin a močovinový dusík jsou katabolické produkty svalů a bílkovin. Z ledvin jsou vyloučeny především krevním oběhem. Jejich koncentrace v krvi závisí na kapacitě glomerulární filtrace. Při poškození renální esence a poklesu glomerulární filtrace na kritický bod jejich koncentrace výrazně stoupne.

Výsledky ukázaly, že přetrénování po dobu 8 týdnů vedlo k významným změnám v renální histopatologii. Experimentální výsledky ukazují, že Cistanche deserticola a vitamin C mohou účinně vychytávat volné radikály, snižovat renální ischemii a hypoxii, inhibovat peroxidaci lipidů a zlepšovat aktivitu SOD. Může účinně snížit renální ischemicko-reperfuzní poškození a hrát ochrannou roli. Možné mechanismy jsou následující: 1) Cistanche deserticola může zlepšit aktivitu antioxidačních enzymů a urychlit likvidaci volných radikálů. Různé polyfenoly, glykosidy a flavonoidy zároveň hrají pozitivní roli při vychytávání volných radikálů, snižují poškození mitochondriální membrány a membrány sarkoplazmatického retikula volnými radikály a snižují oxidační poškození enzymových proteinů. 2) Vitamin C je důležitý antioxidační vitamin. Jako silný antioxidant dokáže účinně eliminovat volné kyslíkové radikály, inhibovat iniciaci kaskády apoptózy a redukovat ischemicko-reperfuzní poškození buněk a orgánů. Kromě toho výsledky tří léčebných skupin naznačují, že Cistanche deserticola může být lepší než vitamin C v léčbě námahou indukovaného renálního ischemicko-reperfuzního poškození; Kombinace těchto dvou může více přispět k ochraně ledvin před ischemicko-reperfuzním poškozením.

Závěrem lze říci, že těžká zátěž plavecký trénink způsobil ledvinyischemicko-reperfuzní poškozeníu krys.Cistanche deserticolaa vitamin C mají zřejméochranné účinky na renální ischemicko-reperfuzní poškození,který může být tímzvýšení aktivity superoxiddismutázy,vychytávání volných radikálů,snížení peroxidace lipidů, azlepšení funkce ledvin. Pokud jde o léčebný účinek, kombinace obou je lepší než samotná a Cistanche deserticola je lepší než vitamín C, ale může to souviset i s dávkou obou v aplikaci. Vztah mezi dávkou a léčebným účinkem je třeba dále studovat.