czJazyk
Domů / Znalost / Obsah

Znalost

Zlepšená antimelanogeneze a antioxidační účinky polysacharidu ze semen Cuscuta Chinensis Lam po enzymatické hydrolýze

Mar 30, 2023

Abstraktní

Polysacharid Cuscuta chinensis (CPS) byl extrahován horkou vodou a enzymaticky hydrolyzovaný polysacharid C. chinensis (ECPS) byl vyroben procesem enzymatické hydrolýzy mananázou. Účelem tohoto výzkumu bylo prozkoumat antimelanogenní aktivitu ECPS a CPS v buňkách melanomu B16F10. Antioxidační aktivita in vitro byla hodnocena jejich schopností redukovat trojmocné železo a aktivitami pohlcující volné radikály DPPH. Distribuce molekulové hmotnosti polysacharidů byla stanovena pomocí SEC-MALLS-RI. CPS byl úspěšně enzymaticky degradován pomocí manózy a vážený průměr molekulových hmotností CPS a ECPS byl 434,6 kDa a 211,7 kDa. Výsledky testů biologické aktivity naznačují, že enzymaticky hydrolyzovaný polysacharid má lepší antimelanogenní aktivitu a antioxidační účinek než původní polysacharid. ECPS vykazoval antimelanogenní aktivitu snížením exprese tyrosinázy, MITF a TRP-1 bez cytotoxických účinků v buňkách melanomu B16F10. Závěrem lze říci, že ECPS má potenciál stát se produktem pro bělení pokožky. Podle relevantních studiícistancheje obyčejná bylina, která je známá jako "zázračná bylina, která prodlužuje život". Jeho hlavní složkou je cistanosid, který má různé účinky, jako je antioxidační, protizánětlivý a podpora imunitních funkcí. Mechanismus mezicistancheabělení kůžespočívá v antioxidačním účinku cistanche glykosidů.melaninv lidské kůži se vyrábí oxidací tyrosinu katalyzovanoutyrosinázaa oxidační reakce vyžaduje účast kyslíku, takže se volné radikály v těle stávají důležitým faktorem ovlivňujícím produkci melaninu. Cistanche obsahuje cistanosid, což je antioxidant a může tak snížit tvorbu volných radikálů v těleinhibující produkci melaninu.

Klíčová slova:polysacharid Cuscuta chinensis; Antimelanogenní aktivita; polysacharid enzymatické hydrolýzy; Antioxidační aktivita

Úvod 

Melanin je konečným produktem transformace L-tyrosinu, který je hlavním určujícím faktorem barvy vlasů a kůže a hraje zásadní roli v ochraně před poškozením ultrafialovým zářením (1). Akumulace melaninu se však může podílet na abnormální pigmentaci a vést k hyperpigmentaci kůže, melasmatu, solární melanóze a ephelidem (2). Biosyntéza melaninu zahrnuje sekvenci enzymatických a oxidačních reakcí a důležitou roli v procesu hraje tyrosináza (3). Protein související s tyrosinázou (TRP-1) usnadňuje tvorbu DHICA oxidázy v biosyntetické dráze melaninu (4). Intracelulární mikroftalmie-asociovaný transkripční faktor (MITF) je důležitou transkripcí

regulátor genů biosyntézy melaninu. MITF se také podílí na regulaci pigmentace, proliferace a diferenciace melanocytů (5). signalizace receptoru a-MSH-melanokortinu 1 se vyskytuje v melanogenních specifických enzymech, včetně TRP-1; tyrosináza je také regulována MITF (5). Mnoho činidel pro bělení kůže má antimelanogenní účinky regulací exprese tyrosinázy nebo inhibičními účinky na aktivitu tyrosinázy. Obsah melaninu navíc ovlivňuje hladina intracelulárních antioxidantů a produkce volných radikálů (6). Proto jsou inhibitory tyrosinázy a antioxidační sloučeniny často vybírány jako činidla pro bělení kůže. Cuscuta chinensis Lam., čínsky nazývaná TuSiZi, je tradiční čínská medicína obecně používaná jako funkční potravina a známá tím, že zlepšuje schopnost reprodukčního systému (7). V posledních letech některé zprávy naznačovaly jeho použití k léčbě pih a vitiliga (8). Jiné zprávy ukázaly, že má pozitivní účinek na ochranu kůže (9) a indukuje inhibici aktivity tyrosinázy (10).

rou cong rong whitening

Klikněte na Rou Cong Rong Výhody pro bělení

Požádat o víc:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Polysacharidy jsou hlavními složkami vodního extraktu C. chinensis Lam. semena, o kterých se předpokládá, že mají antiapoptózu (11) a imunologické aktivity (12). Předchozí analytické výsledky ukázaly, že C. chinensis Lam. polysacharid se skládá z fruktózy, manózy, xylózy a arabinózy; manóza je hlavní složkou cukru (13). Mnoho výzkumníků prokázalo, že viskozita (14), distribuce molekulové hmotnosti (Mw) (15) a podíl monosacharidů (16) polysacharidů mají velký vliv na jejich biologickou aktivitu. Nedávný výzkum navíc ukázal, že degradované polysacharidy s nízkou Mw vykazují vyšší antioxidační a tyrosinázu inhibující aktivity než původní polysacharid (17). Produkce polysacharidu s nízkou Mw z C. chinensis Lam. semeno je nezbytné pro zlepšení jeho biologické aktivity. Mezi různými degradačními procesy jsou hlavními výhodami enzymatické degradace substrátová specifita, vysoká selektivita a mírné podmínky, které produkují hydrolyzáty s dobře definovanými strukturami (18).

Na základě těchto farmakologických studií jsme spekulovali, že polysacharid C. chinensis (CPS) a enzymaticky hydrolyzovaný polysacharid C. chinensis (ECPS) by mohly být účinnými rostlinnými léčivy pro zlepšení hyperpigmentace. Mannáza byla použita k získání nízké Mw ECPS ze semen. Kromě toho byly odhadnuty antimelanogenezní a antioxidační aktivity polysacharidů s různou Mw a byl zkoumán vztah mezi bioaktivitami a Mw polysacharidů.

materiály a metody

Reagencie

Chemikálie pro enzymové a antioxidační aktivity byly zakoupeny od Sigma Co. (USA). Všechna ostatní činidla a chemikálie byly zakoupeny od společnosti Aladdin (Čína).

Příprava CPS a ECPS

Léčivé materiály semen Cuscuta chinensis Lam poskytla společnost Guang Dong Feng Chun Pharmaceutical CO., LTD (Čína). Asi 500 g suchých materiálů bylo rozdrceno na prášek a namočeno do 1200 ml 80% ethanolu po dobu 24 hodin při teplotě místnosti, aby se odstranily lipidy, oligosacharidy a barevné materiály. Předem upravené vzorky byly infiltrovány látkou a poté byl vysušený zbytek extrahován třikrát 3000 ml vody při 90 stupních. Vodné extrakty byly odděleny od zbytku centrifugací (4000 g po dobu 5 minut při 22 stupních) a poté zakoncentrovány při 70 stupních ve vakuu; kondenzát se vysrážel 60% ethanolem při 3 stupních po dobu 24 hodin. Nakonec byla sraženina deproteinována metodou Sevag, dialyzována membránou 3500 Da, lyofilizována a poté označena polysacharidem C. chinensis (CPS).

Enzymaticky hydrolyzovaný polysacharid C. chinensis (ECPS) byl získán hydrolýzou manózou (0,1 procenta v pufru octanu sodného) v poměru manóza k substrátu 5:1 (obj./hm.) při 60 stupních, pH 4,5 po dobu 6 hodin. Poté byla katalytická reakce ukončena ve vroucí vodě po dobu 10 minut. Reakční roztok byl centrifugován při 10,{10}} g po dobu 15 minut (4 stupně) a supernatant byl shromážděn pro dialýzu při 3 stupních po dobu 3 dnů s membránou 3500 Da, aby se odstranily látky s malými molekulami, a byl lyofilizován.

Obsah sacharidů byl testován metodou fenolsírové kyseliny s glukózou jako standardní látkou kalibrační křivky.

cistanche tubulosa

Měření SEC-MALLS-RI

Velikostní vylučovací chromatografie (Waters, USA) kombinovaná s víceúhlovým detektorem rozptylu laserového světla (Wyatt, USA) a detektorem indexu lomu (Waters, USA) (SEC-MALLS-RI) byla použita k detekci vážených průměrů molekulových hmotností. polysacharidy. SEC-MALLS-RI byl proveden na koloně Phenomenex Polysep-GFC-Linear (8 mm x 3 {{10}}} 0 mm); vzorky (2 mg/ml) byly rozpuštěny v mobilní fázi, která sestávala z 0,1 M chloridu sodného. Objem nástřiku byl 100 ml a rychlost byla nastavena na 0,7 ml/min.

Test inhibice houbové tyrosinázy

Inhibice houbové tyrosinázy (19) byla provedena, jak bylo dříve popsáno, s modifikacemi. Stručně, 25 ml kyseliny kojové (pozitivní kontrola) nebo roztoků vzorků (25 ml 10 mM L-tyrosinu, 25 ml 0,5 mM L-DOPA a 875 ml 50 mM roztok fosfátového pufru (pH 6,5)). Poté bylo přidáno 38 ml 2100 U/ml houbové tyrosinázy a promícháno na vortexu. Po 0,{16}}hodinové inkubaci při 37 stupních byla měřena absorbance pomocí čtečky mikrodestiček při 475 nm (Thermo Fisher, USA). Procento inhibice aktivity tyrosinázy bylo vypočteno podle následujícího vzorce: procento inhibice tyrosinázy=[(A-kontrola – A-vzorek) / A-kontrola] ×100, kde A-kontrola představuje absorbanci při 475 nm bez vzorek a A-vzorek představuje absorbanci při 475 nm se vzorkem.

Buněčná kultura a test životaschopnosti

Buňky myšího melanomu B16F10 byly zakoupeny od Biochemistry and Cell Biology (Čína). Buňky byly udržovány v Dulbeccově modifikovaném Eagle médiu (DMEM) doplněném 10 procenty fetálního bovinního séra (FBS), 100 mg/ml streptomycinu a 100 IU/ml penicilinu při 37 stupních ve zvlhčeném prostředí obsahujícím 5 procent CO2. Buňky byly nasazeny na kultivační plotny a doplněny různými koncentracemi vzorků a a-melanocyty stimulujícím hormonem (a-MSH) po dobu 72 hodin, aby se změřila aktivita intracelulární tyrosinázy a kvantifikoval se obsah melaninu.

Test 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromidu (MTT) byl proveden za účelem testování životaschopnosti buněk (20). Stručně, 96-jamkové destičky byly naočkovány myšími melanomovými buňkami B16F10. Objem 50 ml 2 mg/ml MTT byl přenesen do každé jamky po ošetření 100 ml různých koncentrací vzorku po dobu 24 hodin. Po 4-hodinové inkubaci byla reakce ukončena a byl přidán dimethylsulfoxid, aby se nerozpustný výsledný produkt rozpustil. Absorbance byla měřena při 590 nm pomocí čtečky mikrodestiček.

Měření obsahu melaninu

Detekce obsahu melaninu byla provedena mírně upravenou metodou (21). Po promytí ledovým PBS byly melanomové buňky (2 x 104 buněk na jamku) nasazeny do 96-jamkové destičky a inkubovány při 37 stupních po dobu 48 hodin. Poté bylo do každé jamky přidáno 100 ml NaOH (1N), aby se buňky melanomu rozpustily při 80 stupních po dobu 30 minut. Lyzát byl centrifugován při 15,000 g po dobu 15 minut (4 stupně). Poté byla měřena absorbance pomocí čtečky mikrodestiček při 405 nm. Všechny experimenty byly provedeny trojmo.

Test intracelulární tyrosinázové aktivity

Test intracelulární tyrosinázové aktivity byl proveden podle předchozí literatury s menšími úpravami (22). Ve stručnosti, melanomové buňky byly lyžovány lyzačním pufrem (1 mM PMSF, 1 procento Triton X-100, 20 mM fosforečnan sodný) zmrazením a rozmražením. Po centrifugaci lyzátu při 15,000 g po dobu 10 min (4 stupně) byl obsah proteinu v supernatantu stanoven testem s kyselinou bicinchonovou (BCA). Supernatantový protein (10 mg) byl přenesen do 100 ml reakční směsi (0,1 procenta L-DOPA a 0,1 M fosfátový pufr). Po 60 minutách inkubace při 37 stupních byla měřena aktivita tyrosinázy pomocí čtečky mikrodestiček při 450 nm. Všechny experimenty byly provedeny trojmo.

Železo snižuje výkon

Test železitého železa na snížení výkonu byl proveden podle dříve publikované metody s menšími úpravami (23). Různé koncentrace vzorků (2 ml) nebo Vc (pozitivní kontrola) byly smíchány s 2 ml ferrikyanidu draselného (1 procento, W/V) a 2 ml fosfátového pufru (0,2 M, pH 6,8). Po inkubaci při 50 stupních po dobu 30 min byly 2 ml kyseliny trichloroctové (10 procent, W/V) přeneseny do reakční směsi a centrifugovány při 4000 g po dobu 15 min (22 stupňů). Supernatant (2 ml) byl smíchán se směsí obsahující 2 ml destilované vody a 0,4 ml FeCl3 (0,1 procenta, W/V). Po 10 minutách inkubace při 37 stupních byla měřena absorbance pomocí čtečky mikrodestiček při 700 nm.

Test aktivity vychytávání radikálů DPPH

Test aktivity vychytávání DPPH byl proveden tak, jak bylo uvedeno dříve, s některými modifikacemi (24). Stručně, 2 ml vzorku byly přidány do 2 ml 0,1 mM roztoku DPPH a promíchány. Po 30 minutách inkubace ve tmě byla měřena absorbance pomocí čtečky mikrodestiček při 517 nm.

Analýza proteinové exprese metodou Western blot

cistanche supplement whitening

Po ošetření různými koncentracemi ECPS po dobu 72 hodin byly buňky promyty PBS a lyžovány v RIPA pufru (150 mM NaCl v 50 mM pH 8.0 Tris-HCl , 0,5 procenta deoxycholátu sodného, ​​1,0 procenta nedietního P-40 a 0,1 procenta dodecylsulfátu sodného). Po centrifugaci při 10,000g po dobu 25 minut (4 stupně) byl odebrán supernatant lyzátů. Proteiny byly podrobeny 12% SDS-PAGE a poté přeneseny na polyvinylidendifluoridovou membránu. Blokování bylo provedeno v Tris-pufrovaném fyziologickém roztoku s Tween-20 a 2% sušeného odstředěného mléka (TBST) a poté inkubováno po dobu 12 hodin při 4 stupních. Primární použité protilátky byly: anti-aktin (1:5000), anti-TRP-1 (1:500), anti-tyrosináza (1:500) a anti-MITF (1:1000). Primární protilátky byly odstraněny a membrány byly dvakrát vyčištěny pomocí TBST. Poté byly membrány se sekundární protilátkou konjugovanou s křenovou peroxidázou (Santa Cruz, USA) inkubovány po dobu 60 minut při teplotě místnosti. Proteinové pásy byly znovu promyty TBST a vizualizovány pomocí soupravy ECL (Amersham Pharmacia Biotech, USA) za použití zobrazovacího systému UVP (UVP, USA).

Statistická analýza

Všechny výsledky jsou uvedeny jako průměr ± SD a experimenty byly třikrát opakovány. Srovnání mezi skupinami bylo odhadnuto pomocí ANOVA následované Dunnettovým testem. Jednotlivá srovnání mezi dvěma skupinami byla provedena Studentovým t-testem. Všechny statistické analýzy byly provedeny pomocí softwaru SPSS (verze 16.0). Po0.05 byl obvykle považován za statisticky významný.

Výsledek

Mw a celkové polysacharidy ECPS a CPS

Celkový obsah polysacharidů ECPS a CPS měřený testem fenol-kyselina sírová byl 89,17 a 90,26 procent, v daném pořadí. Mezitím byly Mw ECPS a CPS měřeny pomocí SEC-MALLS-RI. Mw ECPS byla 211,7 kDa, což bylo nižší než CPS (434,6 kDa). Obrázek 1A ukazuje relativní intenzitu (RI) pro ECPS a CPS; po enzymatické hydrolýze manózou byla doba retence píku ECPS delší než doba retence CPS. Jak je znázorněno na obrázku 1B, rozdílné hmotnostní frakce polysacharidů byly zobrazeny jako funkce molární hmotnosti vzorků. Distribuce molární hmotnosti polysacharidů se významně změnila enzymatickou hydrolýzou. Rozdílová hmotnostní frakce ECPS v oblasti s nízkou Mw se zvýšila, což naznačuje, že CPS byl enzymaticky degradován na polysacharid s nízkou Mw.

rou cong rong benefits

Antioxidační aktivity polysacharidů

Schopnosti ECPS a CPS pohlcovat volné radikály DPPH jsou uvedeny na obrázku 2A. Aktivita vychytávání volných radikálů vzorků polysacharidů a Vc vykazovala aktivitu závislou na dávce. V současné studii byla schopnost CPS pohlcovat volné radikály nižší než schopnost ECPS. Oba však vykazovaly nižší účinek pohlcování volných radikálů než pozitivní vzorek. Hodnoty IC50 ECPS a CPS byly 0,39 a 0,51 mg/ml, v daném pořadí. Jak je znázorněno na obrázku 2B, celková antioxidační aktivita může být hodnocena testováním schopnosti redukovat trojmocné železo. Koncentrace se pohybovaly od 0,1 do 1 mg/ml; jak polysacharidové vzorky, tak Vc vykazovaly antioxidační aktivitu v závislosti na dávce. Navíc hodnota absorbance ECPS byla vždy vyšší než CPS při stejné koncentraci.

Vliv ECPS a CPS na aktivitu tyrosinázy hub a životaschopnost buněk

Jak je znázorněno na obrázku 2C, inhibiční aktivita polysacharidů na tyrosinázu (0.1B1 mg/ml) představuje vztah závislý na dávce. Navíc inhibiční účinek ECPS byl vždy vyšší než CPS při stejné koncentraci. Test MTT byl proveden za účelem posouzení cytotoxických účinků ECPS a CPS v buňkách melanomu B16F10. Jak je znázorněno na obrázku 2D, nebyly zjištěny žádné významné změny v životaschopnosti buněk B16F10 s různými koncentracemi (0B320 mg/ml) ECPS a CPS. Na základě těchto výsledků jsme použili tato koncentrační rozmezí

další výzkum.

cistanche for sale

Vliv ECPS a CPS na intracelulární aktivitu tyrosinázy a obsah melaninu

Porovnat účinky ECPS a CPS na aktivitu intracelulární tyrosinázy a melanogenezi v modelu melanomových buněk B16F10, inhibiční účinnost ECPS a CPS na obsah melaninu a aktivitu tyrosinázy u B16F1 stimulovaného a-MSH{{{{101} Bylo vyšetřeno 16}} buněk. Jak je znázorněno na obrázku 3, obsah melaninu a tyrosinázová aktivita buněk B16F10 byly významně zvýšeny ve srovnání s nestimulovanými buňkami B16F10 (Po 0.01). Při koncentracích 40 mg/ml (ECPS) a 160 mg/ml (CPS) může být zvýšení obsahu melaninu zmírněno způsobem závislým na dávce (Po0,01 a Po0,05). Podobně léčba ECPS (40 mg/ml) a CPS (160 mg/ml) potlačila tyrosinázovou aktivitu buněk B16F10 (Po 0,01 a Po 0,05). Kromě toho ECPS vykazoval vyšší inhibiční aktivitu tyrosinázy na melanogenezi než CPS. ECPS (160 a 320 mg/ml) vykazoval antimelanogenetický účinek srovnatelný s pozitivní kontrolou (kyselina kojová), která je široce používána jako bioaktivní sloučenina pro bělení kůže.

how to take rou cong rong

Účinek ECPS na hladiny tyrosinázy, MITF a TRP-1 proteinu v buňkách B16F10

Jak je znázorněno na obrázku 4, ECPS významně snížil hladiny exprese tyrosinázy, MITF a TRP{1}} proteinu v B16F10 buňkách způsobem závislým na dávce (Po0.05 a Po0. 01). Tyto výsledky ukazují, že ECPS inhiboval expresi tyrosinázy snížením exprese proteinu TRP-1 a MITF.

Diskuse

Přírodním polysacharidům z C. chinensis byla věnována pozornost díky jejich dobrým účinkům na inhibici tyrosinázy, vychytávání volných radikálů a ochranu kůže (25–27). Malý výzkum se však zaměřil na antimelanogenezní aktivitu enzymatické modifikace polysacharidů. Předchozí výzkum ukázal, že degradované polysacharidy procesem enzymatické hydrolýzy vykazovaly vynikající účinek pohlcování volných radikálů (28). Kromě toho biologické aktivity polysacharidů úzce souvisí s jejich distribucí Mw. Teoreticky jsou polysacharidy s nízkou Mw aktivnější než polysacharidy s vysokou Mw kvůli jejich vysoké penetrační schopnosti na buněčných membránách (29,30). Antimelanogenetický účinek ECPS na buňky B16F10 však dosud nebyl studován. Polysacharid s nízkou Mw byl připraven enzymatickou hydrolýzou s manózou.

Oxidační stres může produkovat nadměrné množství volných radikálů a vést k oxidačnímu poškození. Předchozí studie prokázaly, že kožní onemocnění úzce souvisí s hromaděním volných radikálů (31). Nadměrné množství volných radikálů navíc hraje zásadní roli při potlačování melanogeneze buněk melanomu a růstu melanocytů (32). Tyrosináza je multifunkční oxidační enzym, který obsahuje bronz a je životně důležitý při podpoře biosyntézy melaninu (33). Pigmentace kůže a různá kožní onemocnění však úzce souvisí s hromaděním melaninu a způsobují vážný estetický problém (34).

Aktivní složky s antioxidačními a antityrosinázovými schopnostmi mohou chránit pokožku a inhibovat melanogenezi (35). Naše výsledky ukázaly, že nižší Mw enzymaticky modifikovaných polysacharidů vykazovaly lepší antioxidační a antityrosinázové aktivity než původní polysacharidy in vitro. Zlepšení je přičítáno většímu povrchu a lepší rozpustnosti ve vodě, což bylo v souladu s předchozí studií (17), která ukázala, že degradovaný polysacharid ze Sargassum fusiforme má lepší antityrosinázovou aktivitu a antioxidační aktivitu než původní polysacharid.

cistanche reddit whitening

Normální melanocyty leží na spojení epidermis a dermis kůže a vytvářejí melanin, který se přenáší do keratinocytů (36). V této studii byly použity myší buňky melanomu B16F10, protože mají melanogenní mechanismy, je známo, že mají intracelulární tyrosinázu a mohou generovat melanin, který souvisí se stimulací a-MSH a melanogenezí (37). Aktivita tyrosinázy, obsah melaninu a životaschopnost buněk byly testy in vitro použité ke screeningu antimelanogeneze v této studii. CPS a ECPS vykazovaly na dávce závislý inhibiční účinek na aktivitu tyrosinázy a syntézu melaninu v buňkách B16F10. ECPS vykazoval silnější anti-melaninovou syntézu a anti-tyrosinázový účinek.
Tyrosinase-related protein-1 (TRP-1) a tyrosinase hrají zásadní roli v biosyntéze a melanogenezi melaninu (38). MITF je buněčný transkripční faktor genu tyrosinázy, který se účastní melanogeneze. Aktivace TRP-1 a tyrosinázy obvykle zvyšuje expresi proteinu MITF a způsobuje zvýšení syntézy melaninu (39). Činidla pro bělení kůže tedy mohou mít tu vlastnost, že inhibují signální dráhu zapojenou do aktivace TYP-1 nebo tyrosinázy. Proto jsme zkoumali účinky ECPS na expresi TRP-1, buněčné tyrosinázy a proteinu MITF, abychom studovali mechanismy, které jsou základem inhibice aktivity tyrosinázy a melanogeneze. Výsledky testu western blot ukázaly, že ECPS potlačil expresi TRP-1, tyrosinázy a MITF v buňkách B16F10 a naznačovaly, že ECPS snižoval melanogenezi snížením exprese tyrosinázy, MITF a TRP{12}} v buňkách melanomu B16F10. Výsledek byl z předchozí studie ukazující, že vodný extrakt ze semen Cuscuta japonica významně inhiboval syntézu melaninu a aktivitu tyrosinázy a-MSH tím, že potlačoval fosforylaci p38 MAPK, inhiboval hladiny cAMP a následně snížil expresi TRP a MITF (40). .
Stručně řečeno, enzymaticky modifikovaný polysacharid měl lepší antioxidační a antimelanogenní účinky než původní polysacharid. Kromě toho byl tento antimelanogenní účinek ECPS zprostředkován supresí exprese TRP-1, tyrosinázy a MITF v myších buňkách B16F10. ECPS lze použít pro použití v oblasti kosmetických a lékařských výrobků.

Poděkování

Tato práce byla podpořena Národní nadací přírodních věd Číny (grant č. 81373640).

Reference

1. Riley PA. Melanogeneze a melanom. Výzkum pigmentových buněk 2003; 16: 548–552, doi: 10.1034/j.1600-0749. 2003.00069.x.
2. Ortonne JP, Bissett DL. Nejnovější poznatky o hyperpigmentaci pokožky. J Investig Dermatol Symp Proc 2008; 13: 10–14, doi: 10.1038/jidsymp.2008.7.
3. Arung ET, Kuspradini H, Kusuma IW, Shimizu K, Kondo R. Validace listů Eupatorium triplinerve Vahl, bylina péče o pleť z východního Kalimantanu, pomocí testu biosyntézy melaninu. J Acupunct Meridian Stud 2012; 5: 87–92, doi: 10.1016/ j.jams.2012.01.003.
4. Kobayashi T, Urabe K, Winder A, Jiménez-Cervantes C, Imokawa G, Brewington T, et al. Tyrosinase-related protein 1 (TRP1) funguje jako DHICA oxidáza v biosyntéze melaninu. EMBO J 1994; 13: 5818–5825.
5. Costin GE, Hearing VJ. Pigmentace lidské kůže: melanocyty upravují barvu kůže v reakci na stres. FASEB J 2007; 21: 976–994, doi: 10.1096/fj.06-6649rev.
6. Galván I, Alonso-Alvarez C. Intracelulární antioxidant určuje expresi signálu na bázi melaninu u ptáka. PLoS One 2008; 3: e3335, doi: 10.1371/journal.pone. 0003335.
7. Yang J, Wang Y, Bao Y, Guo J. Celkové flavony ze spermatu auskultují snížení hladiny testosteronu a expresi genu androgenního receptoru u myší s deficitem ledvin-yang. J Ethnopharmacol 2008; 119: 166–171, doi: 10.1016/j.jep.2008.06.027.
8. Donnapee S, Li J, Yang X, Ge AH, Donkor PO, Gao XM a kol. Cuscuta chinensis Lam.: Systematický přehled etnofarmakologie, fytochemie a farmakologie významné tradiční bylinné medicíny. J Ethnopharmacol 2014; 157: 292–308, doi: 10.1016/j.jep.2014.09.032.
9. Nisa M, Akbar S, Tariq M, Hussain Z. Účinek vodního extraktu Cuscuta chinensis na 7,12-dimethylbenz[a]anthracenem indukované kožní papilomy a karcinomy u myší. J Ethnophar macol 1986; 18: 21–31, doi: 10.1016/0378-8741(86)90040-1.
10. Wang TJ, An J, Chen XH, Deng QD, Yang L. Hodnocení účinku semen Cuscuta chinensis na melanogenezi: Porovnání frakcí vody a ethanolu in vitro a in vivo. J Ethnopharmacol 2014; 154: 240–248, doi: 10.1016/j.jep. 2014.04.016.
11. Sun SL, Guo L, Ren YC, Wang B, Li RH, Qi YS a kol. Antiapoptózní účinek polysacharidu izolovaného ze semen Cuscuta chinensis Lam na kardiomyocyty u stárnoucích potkanů. Mol Biol Rep 2014; 41: 6117–6124, doi: 10.1007/s11033- 014-3490-1.
12. Wang Z, Fang JN, Ge DL, Li XY. Chemická charakterizace a imunologické aktivity kyselého polysacharidu izolovaného ze semen Cuscuta chinensis Lam. Acta Pharmacol Sin 2000; 21: 1136–1140.
13. Yang S, Xu X, Xu H, Xu S, Lin Q, Jia Z a kol. Purifikace, charakterizace a biologický účinek zvrácení ledvinového a jangového deficitu polysacharidů ze svalového spermatu. Carbohydr Polym 2017; 175: 249–256, doi: 10.1016/j.carbpol. 2017.07.077.
14. Katayama S, Nishio T, Nishimura H, Saeki H. Imunomodulační vlastnosti vysoce viskózního polysacharidového extraktu z řasy Gagome (Kjellmaniella crassifolia). Plant Food Human Nutr 2012; 67: 76–81, doi: 10.1007/s11130-011- 0271-z.
15. Pengzhan Y, Ning L, Xiguang L, Gefei Z, Quanbin Z, Pengcheng L. Antihyperlipidemické účinky sulfatovaných polysacharidů různé molekulové hmotnosti z Ulva pertusa (Chlorophyta). Pharmacol Res 2003; 48: 543–549, doi: 10.1016/ S1043-6618(03)00215-9.
16. Jiang Y, Qi X, Gao K, Liu W, Li N, Cheng N a kol. Vztah mezi molekulovou hmotností, monosacharidovým složením a imunobiologickou aktivitou Astragalus polysacharidů. Glycoconj J 2016; 33: 755–761, doi: 10.1007/ s10719-016-9669-z.
17. Chen BJ, Shi MJ, Cui S, Hao SX, Hider RC, Zhou T. Zlepšená antioxidační a anti-tyrosinázová aktivita polysacharidu ze Sargassum fusiforme degradací. Int J Biol Macromol 2016; 92: 715–722, doi: 10.1016/j.ijbiomac. 2016.07.082.
18. McCleary BV. Enzymatická modifikace rostlinných polysacharidů. Int J Biol Macromol 1986; 8: 349–354, doi: 10.1016/ 0141-8130(86)90054-1.
19. Baurin N, Arnoult E, Scior T, Do QT, Bernard P. Předběžný screening některých tropických rostlin na antityrosinázovou aktivitu. J Ethnopharmacol 2002; 82: 155–158, doi: 10.1016/S0378- 8741(02)00174-5.
20. Mosmann T. Rychlý kolorimetrický test na buněčný růst a přežití: Aplikace na testy proliferace a cytotoxicity. J Immunol Methods 1983; 65: 55–63, doi: 10.1016/0022- 1759(83)90303-4.
21. Hosoi J, Abe E, Suda T, Kuroki T. Regulace syntézy melaninu v buňkách myšího melanomu B16 pomocí 1 alfa, 25-dihydroxy vitaminu D3 a kyseliny retinové. Cancer Res 1985; 45: 1474–1478.
22. Wang HM, Chen CY, Wen ZH. Identifikace inhibitorů melanogeneze z Cinnamomum subavenium pomocí in vitro a in vivo screeningových systémů zaměřením na lidskou tyrosinázu. Exp Dermatol 2011; 20: 242–248, doi: 10.1111/j.1600-0625. 2010.01161.x.

23. Berker KI, Güc ¸lü K, Tor I˙, Apak R. Srovnávací hodnocení testů antioxidační kapacity na bázi Fe(III) snižující energii v přítomnosti fenantrolinu, bat-ho-fenantrolinu, tripyridyltriazinu (FRAP) a ferrikyanidu činidel. Talanta 2007; 72: 1157-1165, doi: 10.1016/j.talanta.2007.01.019.

24. Parejo I, Codina C, Petrakis C, Kefalas P. Hodnocení vychytávací aktivity hodnocené pomocí Co(II)/EDTA-indukované luminolové chemiluminiscence a DPPH ● (2,2-difenyl-1pikrylhydroxyl ) test volných radikálů. J Pharmacol Toxicol Methods 2000; 44: 507–512, doi: 10.1016/S1056-8719(01)00110-1.

25. Rout S, Banerjee R. Vychytávání volných radikálů, antiglykace a inhibice tyrosinázy polysacharidové frakce izolované z kůry Punica granatum. Bioresour
Technol 2007; 98: 3159–3163, doi: 10.1016/j.biortech.2006. 10.011.
26. Yu P a Sun H. Purifikace fukoidanu z polysacharidu řasy a jeho inhibiční kinetika pro tyrosinázu. Sacharidové polymery 2014; 99: 278-283, doi: 10.1016/ j.carbpol.2013.08.033.
27. Wei X, Liu Y, Xiao J, Wang Y. Ochranné účinky čajových polysacharidů a polyfenolů na kůži. J Agric Food Chem 2009; 57: 7757–7762, doi: 10.1021/jf901340f.
28. Xu J, Xu LL, Zhou QW, Hao SX, Zhou T, Xie HJ. Zvýšená in vitro antioxidační aktivita polysacharidů z Enteromorpha prolifera enzymatickou degradací. J Food Biochem 2016; 40: 275–283, doi: 10.1111/jfbc.12218.
29. Zhou J, Hu N, Wu Yl, Pan Yj, Sun ČR. Předběžné studie chemické charakterizace a antioxidačních vlastností kyselých polysacharidů ze Sargassum fusiforme. J Zhejiang Univ Sci B 2008; 9: 721–727, doi: 10.1631/jus. B0820025.
30. Wu Q, Zheng C, Ning ZX, Yang B. Modifikace nízkomolekulárních polysacharidů z Tremella fuciformis a jejich antioxidační aktivita in vitro. Int J Mol Sci 2007; 8: 670–679, doi 10.3390/i8070670.
31. Yasui H, Sakurai H. Věkem závislá generace reaktivních forem kyslíku v kůži živých bezsrstých potkanů ​​vystavených UVA světlu. Exp Dermatol 2003; 12: 655–661, doi: 10.1034/ j.{8}}.2003.00033.x.
32. Yamakoshi J, Otsuka F, Sano A, Tokutake S, Saito M, Kikuchi M a kol. Zesvětlující účinek na pigmentaci kůže morčete vyvolanou ultrafialovým zářením orálním podáním extraktu bohatého na proanthokyanidin z hroznových jader. Pigment Cell Res 2003; 16: 629–638, doi: 10.1046/j.1600-0749. 2003.00093.x.
33. Strothkamp KG, Jolley RL, Mason HS. Kvartérní struktura houbové tyrosinázy. Biochem Biophys Res Commun 1976; 70: 519–524, doi 10.1016/0006-291X(76)91077-9.
34. Parvez S, Kang M, Chung HS, Bae H. Přirozeně se vyskytující inhibitory tyrosinázy: mechanismus a aplikace ve zdraví kůže, kosmetice a zemědělství. Phytother Res 2007; 21: 805–816, doi: 10.1002/ptr.2184.

35. Perluigi M, De Marco F, Foppoli C, Coccia R, Blarzino C, Luisa Marcante M, et al. Tyrosináza chrání lidské melanocyty před sloučeninami vytvářejícími ROS. Biochem Biophys Res Commun 2003; 305: 250–256, doi: 10.1016/S0006- 291X(03)00751-4.

36. Hirobe T. Jak je regulována proliferace a diferenciace melanocytů? Pigment Cell Melanoma Res 2011; 24: 462–478, doi: 10.1111/j.1755-148X.2011.00845.x.
37. Buscà R, Ballotti R. Cyklický AMP klíčový posel v regulaci pigmentace kůže. Pigment Cell Res 2000; 13: 60–69, doi: 10.1034/j.1600-0749.2000.130203.x.
38. Slominski A, Tobin DJ, Shibahara S, Wortsman J. Pigmentace melaninu v kůži savců a její hormonální regulace. Physiol Rev 2004; 84: 1155–1228, doi: 10.1152/physrev. 00044.2003.
39. Shibahara S, Yasumoto KI, Amae S, Udono T, Watanabe KI, Saito H a kol. Regulace genové exprese specifické pro pigmentové buňky pomocí MITF. Pigment Cell Res 2000; 13: 98-102, doi: 10.1034/j.1600-0749.13.s8.18.x.
40. Jang JY, Kim HN, Kim YR, Choi YH, Kim BW, Shin HK a kol. Vodná frakce ze semen Cuscuta japonica potlačuje syntézu melaninu prostřednictvím inhibice signální dráhy proteinkinázy aktivované mitogenem p38 v buňkách B16F10. J Ethnopharmacol 2012; 141: 338–344, doi: 10.1016/j.jep. 2012.02.043.
Mohlo by se Vám také líbit