AbstraktníProtizánětlivé účinky extraktů z okvětních lístků růže byly popsány v naší předchozí studii. Vzhledem k tomu, že zánět kůže je úzce spojen se stárnutím pokožky, naše studie zkoumala účinky okvětních lístků Rosa gallica na činnosti související se stárnutím pokožky, jako je bělení pokožky a vlastnosti proti vráskám. Každý vzorek byl připraven extrakcí s použitím různých poměrů ethanolu pro vyhodnocení optimálních extrakčních podmínek pro průmyslové aplikace. Vodný 50% (v/v) EtOH extrakt z okvětního lístku R. gallica významně potlačil aktivitu tyrosinázy, produkci melaninu a solární UV-indukovanou matrix metaloproteinázu-1, což je charakteristický znak tvorby vrásek. Kromě toho vodný 50% (v/v) EtOH extrakt vykazoval nejvyšší antioxidační účinek a měl nejvyšší obsah flavonoidů, což je v souladu s uváděnými účinky proti stárnutí. Celkově naše zjištění naznačují, že extrakty z okvětních lístků R. gallica vykazují účinky proti stárnutí. Navíc 50procentní extrakce EtOH byla optimální pro nejvyšší anti-aging a antioxidační účinky a také pro získání nejvyššího obsahu flavonoidů.

Podle relevantních studií je cistanche běžnou bylinou, která je známá jako „zázračná bylina, která prodlužuje život“. Jeho hlavní složkou je cistanosid, který má různé účinky, jako je antioxidační, protizánětlivý a podpora imunitních funkcí. Mechanismus mezi cistanche a bělením kůže spočívá v antioxidačním účinku cistanchových glykosidů. Melanin v lidské kůži vzniká oxidací tyrosinu katalyzovanou tyrosinázou a oxidační reakce vyžaduje účast kyslíku, takže se volné radikály v těle stávají důležitým faktorem ovlivňujícím produkci melaninu. Cistanche obsahuje cistanosid, což je antioxidant a může snižovat tvorbu volných radikálů v těle, čímž inhibuje produkci melaninu.

Klikněte naDoplněk Cistanche Tubulosa

Další informace:

david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501

Klíčová slovaRosa gallica Stárnutí pokožky Flavonoid Antioxidační účinek

Úvod

Kůže hraje zásadní roli jako ochranná bariéra proti škodlivým faktorům spojeným s dědičností a genetikou, environmentálními problémy, hormonálními změnami a metabolickými procesy (Mukherjee et al., 2006). Mezi nimi faktory životního prostředí, jako je vystavení slunečnímu ultrafialovému (UV) záření, působí jako klíčové mediátory, které přispívají k předčasnému stárnutí (Laga a Murphy, 2009). Mezi hlavní příznaky stárnutí pleti, ke kterému dochází v důsledku fotostárnutí, patřily hluboké vrásky, abnormální pigmentace a elasticita (Farage et al., 2013; Wlaschek et al., 2001).

Pigmentace je příznakem stárnutí, které je způsobeno abnormální produkcí melaninu, což má za následek různé kožní poruchy včetně pih, melasmat, stařeckých skvrn a dalších hyperpigmentačních syndromů (D'Mello et al., 2016; Seo et al., 2003). V dráze melanogeneze je tyrosináza důležitá jako enzym omezující rychlost, který přeměňuje L-tyrosin na L-DOPA a oxiduje L-DOPA za vzniku DOPA-chinonu (Akhtar et al., 2015). Proto je inhibice tyrosinázy silně spojena se syntézou melaninu. Kromě toho je další charakteristikou fotostárnutí tvorba vrásek způsobená ztrátou kolagenových fibril a elastázy. Matrix metaloproteináza-1 (MMP-1), vylučovaná fibroblasty lidské kůže, je zodpovědná hlavně za degradaci kolagenu během procesu foto-stárnutí (Pandel et al., 2013). Downregulace exprese MMP-1, která inhibuje degradaci kolagenu, může zlepšit funkce pro zlepšení vrásek.

Z výše uvedených důvodů je použití inhibitorů tyrozinázy nebo inhibitorů MMP považováno za slibnou strategii pro zmírnění fotostárnutí kůže. Předchozí studie ukázaly, že retinol, česnekový extrakt (kofeinová kyselina a S-allycystein) a fytoceramid, kyselina kojová, arbutin a vitamín C mohou působit jako inhibitory stárnutí pleti (Couteau a Coiffard, 2016; Kim et al., 2013). . Použití těchto látek však zahrnuje určitá omezení, jako jsou různé vedlejší účinky včetně cytotoxicity, zápachu a zbarvení (Yamakoshi et al., 2003). Současné studie se proto zaměřují na vývoj bezpečnějších, přirozeně odvozených složek, které poskytují účinnou fotoprotekci pokožky.

Rosa druhy, pěstované po celém světě, jsou považovány za dobrý zdroj doplňků stravy. Extrakt z okvětních lístků růže (RPE), který obsahuje prvky, jako je kyselina fenolová, flavonoly a antokyany, vykazuje kromě jiných biologických funkcí mnoho příznivých účinků, jako jsou protizánětlivé účinky na kůži (Bitis et al., 2 017; Lee a kol., 2018; Masek a kol., 2017; Navarro-Gonzalez a kol., 2015). Protože je známo, že tyto vlastnosti RPE souvisejí se stárnutím kůže, byl navržen jako potenciální kandidát na ochranu kůže. O vlivu RPE na stárnutí kůže je však známo jen málo. Voda a ethanol jsou navíc považovány za nejlepší extrakční rozpouštědla kvůli rozdílům v polaritě a bezpečnosti použití (Abarca-Vargas et al., 2016). Extrakcemi byly tedy připraveny vzorky s různými poměry vody a ethanolu (0, 10, 30, 50, 70, 90 a 100 procent ethanolu RPE).

Účelem této studie bylo prozkoumat účinek RPE na bělení kůže a zlepšení vrásek. Extrakty RPE s různými poměry extrakčního rozpouštědla (0, 10, 30, 50, 70, 90 a 100% ethanol/voda) byly testovány za účelem stanovení optimálního poměru rozpouštědla pro extrakci.

Materiály a metody

Činidlo

Okvětní lístky Rosa gallica byly dovezeny z Turecka prostřednictvím GN Bio (Gyeonggi, Korea). Dulbeccovo modifikované Eagleovo médium (DMEM), fetální bovinní sérum (FBS), penicilin – streptomycin – neomycin a 0,5 procenta trypsin – EDTA byly zakoupeny od společnosti GIBCO Invitrogen (Auckland, NZ, USA). Specifické protilátky proti tyrosináze a b-aktinu byly zakoupeny od Santa Cruz Biotech (Santa Cruz, CA, USA). Primární protilátka MMP-1 byla získána z R&D systems. Všechny ostatní chemikálie, včetně hormonu stimulujícího alfa-melanocyty (a-MSH), houbové tyrosinázy a L-DOPA (L-3,4-dihydroxyfenylalanin) byly zakoupeny od Sigma-Aldrich Co., LLC (St Louis, MO, USA).

příprava vzorků

Okvětní lístky růží byly smíchány s 10}0 ml 0, 10, 30, 50, 70, 90 a 100 procent (v/v) EtOH (absolutní ethanol). Rozpustné složky byly poté extrahovány v 80stupňové vodě za použití zpětného chladiče. Extrakt byl filtrován přes filtrační papír číslo 2 (Whatman, Maidstone, Anglie), vakuově koncentrován a následně rozpuštěn v destilované vodě a lyofilizován, aby byl použit jako vzorky pro test funkční analýzy.

Buněčná kultura

Melanomové buňky B16F10 byly zakoupeny od Korean Cell Line Bank (Seoul, Korea). Lidské dermální fibroblasty (HDF) byly získány od Dr. Jin Ho Chunga (College of Medicine, Soul National University, Soul, Korea). Obě buňky byly kultivovány v DMEM doplněném 10 procenty fetálního bovinního séra (obj./obj.) a 1 procentem (obj./obj.) penicilinu za podmínek 37 stupňů a 5 procent C02.

Životaschopnost buněk

Životaschopnost buněk byla měřena pomocí MTS [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-karboxymethoxyfenyl)-2-({{7 }}sulfofenyl)-2H-tetrazolium] test. Buňky byly nasazeny na 96-jamkové destičky a pěstovány až do konfluence. Poté byly buňky přes noc vyhladověny DMEM bez séra a ošetřeny vzorky v uvedených koncentracích po dobu 24 hodin. Po vystavení vzorkům bylo 20 ul roztoku MTS ponecháno reagovat s buňkami po dobu 1 hodiny. Absorbance byla měřena pomocí čtečky mikrodestiček (Sunrise-Basic Tecan, Tecan Austria GmbH Grodig, Rakousko) při 570 nm.

Aktivita houbové tyrosinázy in vitro

In vitro test tyrosinázy byl proveden podle metod popsaných dříve (Kim et al., 2015). Stručně řečeno, 40 ul každého vzorku bylo přidáno do testovacího pufru (20 ul 0,1 M fosforečnanu draselného), následovala inkubace po dobu 30 minut s 20 ul houbové tyrosinázy (0,02 mg/ml). Poté bylo do každé směsi přidáno 40 ul substrátu (L-DOPA). Reakce byla ponechána probíhat při teplotě místnosti po dobu 15 minut, než byla tvorba dopacromu analyzována měřením absorbance při 475 nm pomocí čtečky mikrodestiček (Infinite 2000 PRO, Tecan, Švýcarsko).

Hodnocení produkce melaninu

Test produkce melaninu byl proveden podle dříve popsaného protokolu (Friedmann a Gilchrest, 1987; Gordon et al., 1989). Buňky B16F10 (8 9 103 buňky) byly nasazeny na 6-jamkové destičky s 2 ml kultivačního média. Po 24 hodinách byly vzorky předem ošetřeny buňkami po dobu 1 hodiny, poté byl buňkám vystaven a-MSH (100 nM). Buňky byly shromážděny po 72 hodinách a produkce melaninu byla měřena pomocí čtečky mikrodestiček (Infinite 2000 PRO, Tecan, Švýcarsko) při 495 nm.

Západní skvrna

Vzorky proteinů byly získány z buněk pomocí 19 buněčného lyzačního pufru (Cell Signaling Technology, Danvers, MA). Koncentrace proteinu byla odhadnuta pomocí PierceTM BCA Protein Assay Kit (Thermo Fisher Scientific, San Jose', CA, USA). Vzorky proteinů byly naneseny na 10% SDS-polyakrylamidový gel (Bio-Rad Laboratories, Hercules, Kalifornie, USA) pro elektroforézu a poté přeneseny na membránu Immobilon P (Millipore, Billerica, MA, USA). PVDF membrána byla blokována 5% odtučněným mlékem po dobu 1 hodiny a membrána byla ošetřena specifickou primární protilátkou přes noc při 4 stupních. Proteinové pásy byly detekovány pomocí chemiluminiscenční detekční soupravy (GE Healthcare, NJ, USA) po hybridizaci s HRP-konjugovanou sekundární protilátkou (Cell Signaling).

Test vychytávání radikálů DPPH

Aktivita vychytávání radikálů DPPH byla měřena následovně; {{0}},2 ml každého extraktu bylo přidáno do 3 ml -ethanolu, ke kterému bylo přidáno 0,8 ml 400 lM DPPH rozpuštěného v ethanolu. Tato směs byla vortexována po dobu 10 s a udržována při teplotě místnosti po dobu 10 minut a absorbance byla měřena při 517 nm (Wang et al., 1999). Aktivita vychytávání radikálů DPPH byla vyjádřena jako procento absorbance skupiny, ke které nebyl přidán žádný DPPH. Všechny experimenty byly replikovány minimálně 3krát.

Celkový obsah flavonoidů

Celkový obsah flavonoidů v extraktech byl měřen pomocí metody chloridu hlinitého (Jia et al., 1999), která byla modifikována pomocí katechinu. Ke 100 1 extraktu bylo přidáno 500 1 destilované vody a 30 1L NaN02, načež bylo o 6 minut později přidáno 60 1L AlCl3. Po 5 minutách bylo přidáno 200 1 1 M NaOH a doplněno na 1 ml destilovanou vodou. Roztok byl dobře promíchán a odstřeďován při 15 928 g při 4 stupních po dobu 5 minut. Po odstředění bylo získáno 200 ul supernatantu a absorbance byla měřena pomocí čtečky mikrodestiček (Infinite 2000 PRO; Tecan, Švýcarsko) při 510 nm.

Statistická analýza

Experimenty byly provedeny v triplikátech a data jsou vyjádřena jako průměr ± standardní odchylka (SD). Pro jednotlivá statistická srovnání byly použity Studentovy t testy. Statistická významnost byla nastavena na (#) {{0}} p\ 0.05 a (##)=p\ 0,001 pro srovnání s neošetřenou kontrolou; (*)=p\ 0,05 a (**)=p \0,001 pro srovnání se skupinou léčenou a-MSH.

Výsledky a diskuse

Extrakce okvětních lístků Rosa gallica podle různého poměru rozpouštědel

Dříve se RPE vyráběl vodnou extrakcí 70 procent (obj./obj.) EtOH (Lee et al., 2018). Pokud je však RPE určen pro účely průmyslové aplikace, musí být podmínky odsávání optimální. Aby bylo možné prozkoumat optimální podmínky extrakce RPE pro aktivitu proti stárnutí pokožky, byla pro RPE použita různá rozpouštědla (obr. 1A). Je zajímavé, že barva každého extraktu se lišila na základě vizuálního pozorování (obr. 1B). Barva extraktů EtOH, 90 procent nebo vyšší, byla čirá, zatímco extrakt 50 procent (obj./obj.) EtOH se zdál být nejvíce načervenalý. Výsledek kolorimetru odhalil hodnotu a* pro zarudnutí pro 50% EtOH, který vykazoval nejvyšší úroveň mezi extrakty (obr. 1C).

Účinek výtažků z okvětních lístků růže na aktivitu bělení pokožky

Protože tyrosináza je klíčovým enzymem zapojeným do hyperpigmentace prostřednictvím produkce melaninu (Chang, 2009), analyzovali jsme inhibiční účinek extraktů na aktivitu tyrosinázy in vitro. Většina extraktů, kromě 100% EtOH, odhalila na dávce závislou regresi in vitro tyrosinázové aktivity (obr. 2A). Navíc 30% a 50% EtOH extrakty vykazovaly silnější inhibiční účinky než kyselina askorbová. Kyselina askorbová byla v předchozí literatuře popsána jako činidlo pro bělení kůže (Chang, 2009). Aby se vyhodnotila aktivita extraktů na bělení kůže v buněčném modelu, byla po ošetření každým extraktem hodnocena produkce melaninu v melanomových buňkách B16F10. 100 nM část a-MSH zvýšila produkci melaninu a každý extrakt z okvětních lístků růže inhiboval produkci melaninu (obr. 2B). Kromě toho 30% a 50% EtOH extrakty vykazovaly nejsilnější inhibiční účinek na aktivitu tyrosinázy a produkci melaninu in vitro. Za podobných podmínek byl zkoumán účinek každého z extraktů na expresi tyrosinázy. Také a-MSH zvýšil expresi tyrosinázy a 100 ug/ml každého z extraktů zeslabilo expresi tyrosinázy (obr. 2C). Ošetření extrakty v koncentraci 100 lg/ml nezpůsobilo buněčnou cytotoxicitu u buněk melanomu B16F10 (obr. 2D). Inhibice melaninu pomocí RPE je tedy připisována duální funkci tyrosinázové aktivity a expresi nepřítomnosti cytotoxicity.

Účinek RPE na sluneční UV (sUV) indukovanou expresi MMP-1 v lidských dermálních fifibroblastech

Inhibitory MMP-1 lze považovat za látky proti vráskám (Park et al., 2018; Yang et al., 2018). Je to proto, že MMP-1 je klíčový enzym zodpovědný za tvorbu vrásek během procesu stárnutí pokožky (Pittayapruek et al., 2016). Pro stanovení protivráskových účinků RPE byla exprese MMP-1 hodnocena v lidských dermálních fibroblastech pomocí analýzy Western blot. Exprese MMP-1 byla dramaticky zvýšena ozářením sUV (30 kJ/cm2) a všechny extrakty inhibovaly expresi MMP-1 indukovanou sUV (obr. 3A). Zatímco 100% EtOH extrakty vykazovaly mírný účinek, 50% EtOH extrakty vykazovaly nejsilnější potlačující aktivitu na expresi MMP-1 indukovanou UV zářením. Dále jsme zkoumali úrovně produkce MMP-1 v kultivačních médiích, protože MMP-1 je protein vylučovaný pro degradaci kolagenu. Podobně jako na obr. 3A byla hladina MMP-1 v kultivačních médiích potlačena každým extraktem (obr. 3B). Konkrétně 50% EtOH extrakt vykazoval nejvyšší supresivní aktivitu na expresi MMP-1 indukovanou UV zářením a 100% EtOH extrakt vykazoval mírný účinek ve srovnání s jinými extrakty.

Antioxidační aktivita a celkový obsah flavonoidů v extraktech z okvětních lístků růže

Je známo, že antioxidanty, které inhibují produkci ROS, snižují hyperpigmentaci nebo zabraňují produkci melaninu indukované UV zářením (Yamakoshi et al., 2003). Aktivita vychytávání radikálů DPPH byla stanovena pro srovnání antioxidační aktivity extraktů. Je zajímavé, že každý extrakt vykazoval drastickou, na dávce závislou aktivitu vychytávání radikálů. Vzorky 500 lg/ml vykazovaly antioxidační aktivitu podobnou vitaminu C. Mezi extrakty vykazoval extrakt 50 procent EtOH nejsilnější antioxidační účinek při nejnižší koncentraci (50 lg/ml) (obr. 4A).

V okvětních lístcích růží je mnoho různých sloučenin, jako jsou terpeny, flavonoidy a antokyany (Knapp et al., 1998; Kumar et al., 2008; Oka et al., 1998; Schieber et al., 2005). Tyto chemikálie představují mnoho biologických aktivit (Kumar et al., 2009). Zejména flavonoidy byly popsány jako hlavní skupina fenolických sloučenin odpovědných za biologické vlastnosti antioxidačních a protizánětlivých účinků (Du et al., 2016; Jung et al., 2015). Dále byl změřen celkový obsah flavonoidů v každém extraktu. V každém extraktu bylo přítomno velké množství flavonoidů (obr. 4B). Výsledky ukázaly, že extrakt 50 procent EtOH obsahoval nejvyšší obsah flavonoidů mezi vzorky. Tento trend byl podobný trendu pozorovanému ve výsledku antioxidačního testu.

Předpokládá se, že tmavě červená barva 50% EtOH rozpouštědla okvětních plátků růží souvisí s antokyanem, flavonoidem (obr. 1). Tento výsledek potvrzuje zjištění předchozí studie (Oancea et al., 2012). Podle předchozí studie byly antokyany v borůvce (Vaccinium orymbosum L.) nejlépe extrahovány v 50% EtOH rozpouštědle než v jakémkoli jiném rozpouštědle, včetně 60%, 70% a 80% EtOH (Oancea et al., 2012). Přirozeně se antokyany vyskytují jako glykosidy. Předpokládali jsme tedy, že polarita anthokyanů mohla být způsobena rozpouštědlem 50 procent EtOH. Silná antioxidační aktivita anthokyanů je dobře prokázána v různých modelových systémech (Kalt et al., 2003; RiceEvans et al., 1995). Protože 50% EtOH extrakt z okvětních lístků růže měl nejvyšší obsah anthokyanů, antioxidační aktivita 50% EtOH extraktu byla nejsilnější mezi 50 lg/ml extrakty.

Stručně řečeno, naše studie prokázala potenciál RPE jako složky proti stárnutí pokožky. Pro účely průmyslové aplikace je nezbytná optimalizace podmínek extrakce, aby se snížily výrobní náklady. Současná studie zkoumala rozpouštědla nejvhodnější pro extrakci okvětních lístků růže s ohledem na aktivitu proti stárnutí pleti. Flavonoidy v okvětních lístcích růží byly nejlépe extrahovány rozpouštědlem 50% EtOH. Tento extrakt vykazoval nejsilnější antioxidační aktivitu a také aktivitu proti stárnutí pleti, jako je bělení pleti a potlačení vrásek. Pro testování vhodnosti pro průmyslové použití mohou být vyžadovány klinické studie a analýzy stability.

PoděkováníTento výzkum byl podpořen hlavním výzkumným programem (E0183112-02) Korea Research Food Institute (KFRI) financovaným Ministerstvem vědy, ICT a budoucího plánování a Korea Institute of Planning and Evaluation for Technology in Food, Agriculture , Lesnictví a rybářství (IPET) prostřednictvím programu rozvoje potravinářských technologií s vysokou přidanou hodnotou, financovaného Ministerstvem zemědělství, výživy a záležitostí venkova (MAFRA) (118060-03-2- HD020).

Dodržování etických norem

Reference

1.Abarca-Vargas R, Malacara CFP, Petricevich VL. Charakterizace chemických sloučenin s antioxidačními a cytotoxickými aktivitami v extraktech Bougainvillea x buttiana Holttum a Standl, (var. Rose). Antioxidanty 5:45 (2016)

2. Akhtar MN, Sakeh NM, Zareen S, Gul S, Lo KM, Ul-Haq Z, Shah SAA, Ahmad S. Návrh a syntéza chalkonových derivátů jako silných inhibitorů tyrosinázy a vztah mezi jejich strukturní aktivitou. J. Mol. Struktura. 1085: 97–103 (2015)

3.Bitis L, Sen A, Ozsoy N, Birteksoz-Tan S, Kultur S, Melikoglu G. Flavonoidy a biologické aktivity různých extraktů z listů Rosa sempervirens. Biotechnol. Biotechnol. Vybavit. 31: 299–303 (2017)

4.Změna, TS. Aktualizovaný přehled inhibitorů tyrosinázy. Int. J. Mol. Sci. 10: 2440–2475 (2009)

5.Couteau C, Coiffard L. Přehled látek pro bělení kůže: léky a kosmetické přípravky. Kosmetika 3: 27 (2016)

6.D'Mello SA, Finlay GJ, Baguley BC, Askarian-Amiri ME. Signální dráhy v melanogenezi. Int. J. Mol. Sci. 17:7 (2016)

7.Du L, Sun G, Zhang X, Liu Y. Srovnání a korelace fenolických profilů a antioxidačních aktivit sedmnácti odrůd ananasu. Food Sci. Biotechnol. 25: 445–451 (2016)

8.Farage MA, Miller KW, Elsner P, Maibach HI. Charakteristika stárnoucí pleti. Adv. Péče o rány 2: 5–10 (2013)

Friedmann PS, Gilchrest BA. Ultrafialové záření přímo indukuje produkci pigmentu kultivovanými lidskými melanocyty. J. Cell Physiol. 133: 88–94 (1987)

9.Gordon PR, Mansur CP, Gilchrest BA. Regulace růstu lidských melanocytů, dendricity a melanizace faktory odvozenými od keratinocytů. J. Invest. Dermatol. 92: 565–572 (1989)

10.Jia Z, Tang MC, Wu JM. Stanovení obsahu flavonoidů v moruši a jejich vychytávací účinky na superoxidové radikály. Food Chem. 64: 555–559 (1999)

11.Jung H, Lee HJ, Cho H, Lee K, Kwak HK, Hwang KT. Antocyaniny v plodech Rubus a antioxidační a protizánětlivé aktivity v buňkách RAW 264.7. Food Sci. Biotechnol. 24: 187–1886 (2015)

12. Kalt W, Lawand C, Ryan DAJ, McDonald JE, Donner H, Forney CF. Absorpční kapacita kyslíkových radikálů, obsah anthokyanů a fenolů v borůvkách (Vaccinium corymbosum L.) během zrání a skladování. J. Am. Soc. Hortic. Sci. 128: 917–923 (2003)

13.Kim SR, Jung YR, An HJ, Kim DH, Jang EJ, Choi YJ, Moon KM, Park MH, Park CH, Chung KW, Bae HR, Choi YW, Kim ND, Chung HY. Protivráskové a protizánětlivé účinky aktivních česnekových složek a inhibice MMP prostřednictvím NF-jB signalizace. PLoS ONE 8: e73877 (2013)

14.Kim JH, Baek EJ, Lee EJ, Yeom MH, Park JS, Lee KW, Kang NJ. Ginsenosid F1 zmírňuje hyperpigmentaci v melanomových buňkách B16F10 indukcí dendritové retrakce a aktivací Rho signalizace. Exp. Dermatol. 24: 150–152 (2015)

15.Knapp H, Straubinger M, Fornari S, Oka N, Watanabe N, Winterhalter P. (S)-3,7-dimethyl-5-okten-1,{{5 }}diol a příbuzné okysličené monoterpenoidy z okvětních lístků Rosa damascena Mill. J. Agri. Food Chem. 46: 1966–1970 (1998)

16. Kumar N, Bhandari P, Singh B, Gupta AP, Kaul VK. HPLC s reverzní fází pro rychlé stanovení polyfenolů v květech růží. J. Sep. Sci. 31: 262–267 (2008)

17.Kumar N, Bhandari P, Singh B, Bari SS. Antioxidační aktivita a ultravýkonná LC-elektrosprejová ionizační kvadrupólová hmotnostní spektrometrie doby letu pro fenolické otisky prstů druhů růží: Rosa damascena, Rosa bourboniana a Rosa brunonii. Food Chem. Toxicol. 47: 361–367 (2009)

18. Laga AC, Murphy GF. Translační základ lidského kožního fotostárnutí: na modelech, metodách a významu. Dopoledne. J. Pathol. 174: 357–360 (2009)

19.Lee MH, Nam TG, Lee I, Shin EJ, Han AR, Lee P, Lee SY, Lim TG. Protizánětlivá aktivita extraktu z okvětních lístků růže (Rosa gallica) prostřednictvím snížení signální dráhy MAPK. Food Sci. Nutr. 6: 2560–2567 (2018)

20.Mašek A, Latos M, Chrzescijanska E, Zaborski M. Antioxidační vlastnosti extraktu z růže (Rosa villosa L.) měřené pomocí elektrochemických a UV/Vis spektrofotometrických metod. Int. J. Electrochem. Sci. 12: 10994–11005 (2017)

21.Mukherjee S, Date A, Patravale V, Korting HC, Roeder A, Weindl G. Retinoidy v léčbě stárnutí kůže: přehled klinické účinnosti a bezpečnosti. Clin. Interv. Stárnutí 1: 327–348 (2006)

22.Navarro-Gonzalez I, Gonzalez-Barrio R, Garcia-Valverde V, Bautista-Ortin AB, Periago MJ. Nutriční složení a antioxidační kapacita v jedlých květech: charakterizace fenolických sloučenin pomocí HPLC-DAD-ESI/MSn. Int. J. Mol. Sci. 16: 805–822 (2015

23.Oancea S, Stoia M, Coman D. Vliv podmínek extrakce na obsah bioaktivních anthokyanů ve Vaccinium corymbosum z hlediska potravinářských aplikací. Procedia Ing. 42: 489–495 (2012)

24.Oka N, Ikegami A, Ohki M, Sakata K, Yagi A, Watanabe N. Citronellyl disacharid glykosid jako prekurzor aroma z květů růže. Phytochemistry 47: 1527-1529 (1998)

25. Pandel R, Poljsak B, Godic A, Dahmane R. Fotostárnutí kůže a role antioxidantů v jeho prevenci. ISRN Dermatol. 2013: 7 (2013)

26.Park EK, Lee HJ, Lee H, Kim JH, Hwang J, Koo JI, Kim SH. Mechanismus proti vráskám melatoninu v keratinocytech HaCaT ošetřených UVB a u bezsrstých myší prostřednictvím inhibice zánětlivých proteinů zprostředkovaných ROS a sonickým hedgehog. Int. J. Mol. Sci. 19:6 (2018)

27. Pittayapruek P, Meephansan J, Prapapan O, Komine M, Ohtsuki M. Role matricových metaloproteináz ve fotostárnutí a fotokarcinogenezi. Int. J. Mol. Sci. 17 (2016)

28. Rice-Evans CA, Miller NJ, Bolwell PG, Bramley PM, Pridham JB. Relativní antioxidační aktivity polyfenolických flavonoidů rostlinného původu. Volný Radic. Res. 22: 375–383 (1995)

29.Schieber A, Mihalev K, Berardini N, Mollov P, Carle R. Flavonolové glykosidy z destilovaných okvětních lístků Rosa damascena Mill. Z. Naturforsch. C. 60: 379-384 (2005) S

30.eo SY, Sharma VK, Sharma N. Houbová tyrosináza: nedávné vyhlídky. J. Agric. Food Chem. 51: 2837–2853 (2003)

31. Wang MF, Jin Y, Ho CT. Hodnocení derivátů resveratrolu jako potenciálních antioxidantů a identifikace reakčního produktu resveratrolu a 2,2-difenyl-1-pikryhydrazylového radikálu. J. Agric. Food Chem. 47: 3974–3977 (1999)

32. Wlaschek M, Tantcheva-Poor I, Naderi L, Ma W, Schneider LA, Razi-Wolf Z, Schuller J, Scharffetter-Kochanek K. Sluneční UV ozařování a dermální fotoaging. J. Photochem. Photobiol. B. 63: 41–51 (2001) Yamakoshi J, Otsuka F, Sano A, Tokutake S, Saito M, Kikuchi M, Kubota Y. 33. Zesvětlující účinek na ultrafialovým zářením indukovanou pigmentaci kůže morčete při orálním podání proanthokyanidinrichu extrakt z hroznových semen. Pigment Cell Res. 16: 629–638 (2003)

32.Yang JE, Ngo HTT, Hwang E, Seo SA, Park SW, Yi TH. Dietní enzymy ošetřený Hibiscus syriacus L. chrání pokožku před chronickým fotostárnutím vyvolaným UVB zářením prostřednictvím zvýšení hydratace pokožky a syntézy kolagenu. Oblouk. Biochem. Biophys. 662: 190–200 (2018)

Další informace: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501