Extrakce a stanovení obsahu aktivních složek v Cistanche Deserticola

Mezi hlavní chemické složky Cistanche deserticola patří fenylethanolové glykosidy, polysacharidy, cyklohexenether, betain a galaktóza. V současnosti jsou nejrozsáhleji studovány fenylethanolové glykosidy, celkem bylo objeveno 17 fenylethanolových glykosidových látek. Toto je první přírodní produkt, o kterém se uvádí, že má neuroprotektivní účinky a hraje roli v prevenci peroxidace lipidů, chrání játra a odstraňuje volné radikály NO, aby prokázal protizánětlivou aktivitu. Polysacharidy jsou hlavní složkou Cistanche deserticola a důležitou farmakologickou účinnou látkou. Mají antioxidační a anti-aging účinky a mají jedinečné účinky na imunitu a anti-lipidovou peroxidaci. Gong Lidong a kol. zjistili, že existují významné rozdíly v monosacharidovém složení surových polysacharidů z Cistanche deserticola mezi přírodními a uměle kultivovanými vzorky z různých druhů a oblastí. Kromě toho Cistanche deserticola obsahuje určité množství betainu a galaktózy, které mají funkci podpory metabolismu tuků, protitukové jater, ochrany ledvin, snížení krevního tlaku, zvlhčení střev a podpory pohybu střev.

Hlavní chemické složky Cistanche deserticola

1. Polysacharidy

Raný výzkum polysacharidů z Cistanche deserticola se většinou zaměřoval na extrakci, separaci, stanovení obsahu a fyzikálně-chemické vlastnosti polysacharidů. V metodice se jako rozpouštědlo pro extrakci polysacharidů metodou refluxní extrakce nejvíce používá ethanol a obsah polysacharidů se stanovuje metodou fenolsírové kyseliny. Li Yan a další poprvé použili ultrazvukovou technologii k extrakci polysacharidů z Cistanche deserticola a měření jejich obsahu, čímž se výrazně zkrátila doba extrakce. Sun Ping a kol. použila mikrovlnnou technologii k extrakci polysacharidů z Cistanche deserticola a změřila jejich obsah. Výsledky ukázaly, že se zkrátila reakční doba a zlepšila se účinnost extrakce, což ukazuje, že mikrovlnná technologie má velký potenciál v extrakci polysacharidů. Xuan Guodong a kol. za výzkumné objekty vybrala tři reakční faktory, a to dobu extrakce, teplotu a poměr pevná látka-kapalina. Rychlost extrakce polysacharidů byla použita jako index hodnocení a podmínky procesu extrakce polysacharidů z Cistanche deserticola byly optimalizovány pomocí metody analýzy povrchu odezvy. Výsledky ukázaly, že při době extrakce 193.0 minut, teplotě 94,59 stupně a poměru pevná látka-kapalina 10,89 byla teoretická hodnota rychlosti extrakce polysacharidů 85,5 %. Wu Xiangmei a kol. použil chemické a spektroskopické metody ke studiu chemických strukturních charakteristik neutrálního polysacharidu CDP-4 izolovaného z dužnatých stonků Cistanche deserticola. Nejenže určili průměrnou relativní molekulovou hmotnost a monosacharidové složení CDP-4, ale také určili jeho prostorovou strukturu jako glukan s přímým řetězcem, který se skládá z l, 4-vazby glcp a l, 6-vazby glcp připojen v poměru 3:l. Na rozdíl od škrobu s rovným řetězcem jde o nový typ glukanu. Zhao Wei a kol. [25] extrahovali ve vodě rozpustné polysacharidy z divokých stonků Cistanche deserticola, které byly deproteinovány Sevegovými a enzymatickými metodami, klasifikovány ultrafiltrací a připraveny kolonou Sephadex G-75 za účelem získání jednotného složení SPA. Analýza methylace, GC/MS a C-NMR ukázala, že SPA sestával z (1-6) Glc jako hlavního řetězce a zbytek GIc měl větvení na 3-0. Postranní řetězce se skládaly z (1-4) Gal, (1-4) Man, (1-3) Gal a (1-2) Rha, přičemž (1- ) Ara jako konec postranního řetězce. Wu Bo a kol. použil 95% ethanol k odtučnění, extrakci vodou a srážení alkoholem k získání surových polysacharidů a sloupcovou chromatografii na Sephadexu k rafinaci polysacharidů; Pomocí chromatografie na tenké vrstvě k identifikaci jeho monosacharidového složení, měření jeho specifické rotace a UV spektroskopie k identifikaci čistoty polysacharidu bylo zjištěno, že UV spektrum polysacharidu má pouze jeden pík a specifickou rotaci precipitátů různé koncentrace ethanolu jsou konzistentní, což ukazuje, že polysacharid oddělený a čištěný touto metodou je homogenní složka.

2. Fenylethanolglykosidy

Fenylethanolglykosid je hlavní aktivní složkou Cistanche deserticola

Fenylethanolové glykosidy jsou hlavními účinnými látkami v Cistanche deserticola a jsou také hlavními detekčními indikátory pro kontrolu kvality Cistanche deserticola. V současnosti bylo z Cistanche deserticola izolováno 17 typů ethanolových glykosidů, mezi nimiž jsou reprezentativní pilosid a kvercetin. Časné stanovení glykosidových látek bylo většinou založeno na obsahu celkových fenylethanolových glykosidů, často pomocí kolorimetrických metod. Například Cheng Jie a další extrahovali Cistanche deserticola refluxem ethanolu, extrakt zkoncentrovali, odtučněli ethylacetátem a extrahovali účinné látky n-butanolem. Obsah byl poté stanoven makroporézní pryskyřicí, AB-8 adsorpcí, methanolovou elucí a UV spektrofotometrií. Výsledky ukázaly, že rozsah stanovení byl 3.20-32.0 mg · L-1, s průměrnou výtěžností 100,6 % a RSD 3,5 %. Li a kol. použil princip, že fenolové skupiny ve fenylethanolaminových glykosidech a diazoniových solích mohou generovat barevné látky, a provedl stanovení při 486 nm s výtěžností 101,3 % a RSD 3,70 %. Kolorimetrické metody však mají nevýhody, jako je špatná stabilita, špatná opakovatelnost a velké chyby, stejně jako složitá předúprava, což je činí nevhodnými pro kvantitativní stanovení fenylethanolaminových glykosidů.

Echinosid, hlavní chemická složka Cistanche deserticola

Vysokoúčinná kapalinová chromatografie je nejpoužívanější metodou pro stanovení fenylethanolaminových glykosidů v Cistanche deserticola díky vysoké citlivosti a širokému lineárnímu rozsahu. Čínský lékopis stanoví podmínky pro použití HPLC ke stanovení obsahu kvercetinu a anthokyanů v Cistanche deserticola: za použití mobilní fáze (acetonitril methanol 0,1% roztok kyseliny octové 10:15:75) jako rozpouštědlo, extrakce ultrazvukem po dobu 40 minut, příprava testovacího roztoku a chromatografické podmínky za použití oktadecylsilanu vázaného silikagelu jako plniva; Při použití acetonitril methanolu 0,1% roztoku kyseliny octové (10:15:75) jako mobilní fáze je detekční vlnová délka 334 nm. Teoretický počet destiček by neměl být menší než 4000 na základě výpočtu píku kvercetinu a obsah kvercetinu by neměl být menší než 0,3 %. Zhang Siju a kol. použil metodu popsanou v čínském lékopisu k současnému stanovení obsahu kvercetinu a anthokyanů v Cistanche deserticola pomocí RP-HPLC. Výsledky ukazují, že tato metoda je jednoduchá, má dobrou přesnost a reprodukovatelnost a výsledky jsou přesné a spolehlivé. Zhang Ju a kol. použili zlepšené podmínky ke stanovení obsahu kvercetinu a ergosterolu v léčivých bylinách rodu Cistanche a zjistili, že obsah fenylethanolaminových glykosidů v Cistanche z různých hostitelů a oblastí se liší.

Studie navíc ukázaly, že různé způsoby zpracování mohou mít určitý vliv na obsah fenylethanolaminových glykosidů v Cistanche deserticola. Zhang Siju a kol. použili vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii ke studiu rozdílů v obsahu ergosterolu mezi různými zpracovanými a surovými produkty. Výsledky ukázaly, že obsah syrových výrobků byl vyšší než obsah zpracovaných výrobků a nejnižší obsah vysokotlakých vinných dušených výrobků. Čím vyšší je teplota a doba zpracování, tím nižší je obsah zpracovaných produktů. Připomenutí: Léčivé byliny Cistanche deserticola by se neměly zpracovávat při vysokých teplotách, vysokém tlaku nebo po dlouhou dobu. Studie zároveň zjistily, že obsah betainu ve zpracované Cistanche deserticola výrazně stoupá, což naznačuje, že zpracovaná Cistanche deserticola má určitý účinek. Další důkaz nezbytnosti a vědeckosti zpracování (tepelné úpravy) Cistanche deserticola tradiční čínskou medicínou po tisíce let. Zpracování má navíc určitý vliv i na stopové prvky v něm obsažené. Wang Linan a kol. [33] zkoumali vliv různých počátečních teplot zpracování na obsah hlavních účinných látek v Cistanche deserticola s použitím celkového množství a obsahu polysacharidů celkových fenylethanolových glykosidů, kvercetinu a antokyanů jako indikátorů. Výsledky ukázaly, že obsah účinných látek ve vzorcích ošetřených různými počátečními teplotami zpracování se měnil. Například obsah fenylethanolových glykosidů byl vyšší při přirozeném sušení nebo v sušicí peci při 40 stupních; Se zvyšováním počáteční teploty zpracování vykazuje obsah fenylethanolglykosidu většinou klesající trend, což poskytuje vědecký základ pro počáteční metodu zpracování Cistanche deserticola.

Akteosid, hlavní chemická složka Cistanche deserticola

Kombinace kapalinové chromatografie a tandemové hmotnostní spektrometrie (LC/ESI-MS/MS) má výhody vysoké citlivosti a silné specifičnosti. Dokáže současně kvalitativně a kvantitativně analyzovat více komplexních složek v tradiční čínské medicíně bez nutnosti složitých procesů přípravy vzorků, čímž je lepší než obecné metody HPLC a GC/MS. Wang Yiming a kol. použili tuto metodu k identifikaci sedmi fenylethanolových glykosidových zbytků v Cistanche deserticola, včetně mořského ježka, ergosterolu, cis ergosterolu, isoergosterolu, 2'-acetylergosterolu, Cistanche deserticola glykosidu A a Cistanche deserticola glykosidu B. Zároveň zjistili, že existují rozdíly v typech a obsahu fenylethanolových glykosidových zbytků mezi různými druhy Cistanche deserticola. Cao Zhenjie a kol. [35] použili LC-MS k detekci čtyř fenylethanolaminů na jaře a na podzim v Cistanche deserticola. Kromě ergosterolu vykazoval obsah ostatních tří sloučenin významné rozdíly, což naznačuje, že obsah sloučenin fenylethanolaminu se mění v závislosti na období sklizně Cistanche deserticola.

3.8-Epi Strychnoside

{{0}}Eleganoside je hlavní iridoidní glykosidová složka v rodu Cistanche. Yang Jianhua a kol. zavedla metodu vysokoúčinné kapalinové chromatografie pro stanovení obsahu 8-Eleganoside v Cistanche pomocí kolony Hypersil ODS-2 (4,6 mm x 250 mm, 5 μm) s acetonitrilem 0,4% kyselina fosforečná (9:91) jako mobilní fáze, průtok 1,0 ml · min-1, teplota kolony 25 stupňů a detekční vlnová délka 235 nm. Tato metoda je jednoduchá, rychlá, citlivá a přesná.

4. Těkavý olej

Hui Ruihua a kol. popsali extrakci těkavých sloučenin z Cistanche deserticola pomocí současné destilace a extrakce. 24 chemických složek, včetně eugenolu, benzaldehydu a karyofylenu, bylo separováno a potvrzeno metodou GC/MS. Obsah těkavého oleje v Cistanche deserticola byl naměřen na 3,5 %, přičemž hlavní složka eugenol představovala 83,60 % z celkového množství těkavého oleje.

5. Galactol

Bao Zhong a kol. k separaci použila vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii a k ​​detekci obsahu galaktózového alkoholu, aktivní složky pro defekaci v Cistanche deserticola, odpařovací detektor rozptylu světla (ELSD). Použili polymerizovaný gelový sloupec Prevail Carbohydrate ES (250 mm x 4,6 mm, 5 μm), mobilní fáze byla acetonitril-voda (77:23) a průtok byl 0,7 ml · min{{10 }}; Teplota kolony je 25 stupňů, teplota driftové trubice detektoru je 40 stupňů a tlak plynu je 240 kPa pro stanovení obsahu galaktózového alkoholu. Maximální obsah může dosáhnout 10 %. Tato metoda je jednoduchá a přesná a lze ji použít jako běžnou metodu pro detekci galaktózy v Cistanche deserticola.

6. Betain

Betain je kvartérní amoniový alkaloid rozpustný ve vodě a běžně používané metody stanovení obsahu zahrnují kolorimetrickou metodu, skenovací metodu tenkovrstvé chromatografie a gravimetrickou metodu. S popularizací technologie vysokoúčinné kapalinové chromatografie se však postupně stala preferovanou metodou pro stanovení jejího obsahu vysokoúčinná kapalinová chromatografie. Gong Lidong a kol. úspěšně zavedla metodu pro stanovení obsahu betainu v Cistanche deserticola pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s odpařovacím rozptylem světla. Metoda používala chromatografickou kolonu Waters Spherorb S5 NH2 (250 mm x 4,6 mm, 5 μm) s teplotou kolony 25 stupňů a mobilní fází 0,1 % (objemový zlomek) vodný roztok kyseliny trifluoroctové v methanolu (objemový poměr 15:85) při průtoku 0,6 ml/min. Parametry odpařovacího detektoru rozptylu světla jsou teplota driftové trubice 90 stupňů, teplota rozstřiku 45 stupňů a tlak nosného plynu (dusík) 110 kPa (16 psi). Tato metoda má dobrý lineární vztah a lze ji použít jako metodu pro stanovení obsahu betainu. Výzkum zároveň zjistil, že Cistanche deserticola neobsahuje betain, takže betain lze použít jako marker pro rozlišení mezi pravou Cistanche deserticola a Cistanche deserticola deserticola.

Hlavní chemické složky Cistanche deserticola

7. Anorganické prvky

Mezi účinné složky tradiční čínské medicíny patří nejen organické sloučeniny, jako jsou glykosidy, alkaloidy a flavonoidy, ale také mnoho anorganických složek, zejména mnoho stopových a makroprvků. S komplexním pochopením účinných složek tradiční čínské medicíny jsou anorganické prvky, zejména v posledních letech, stále více ceněny. Účinnost některých čínských léčivých materiálů, kterou nelze vysvětlit teorií tradiční čínské medicíny, lze nyní vysvětlit prostřednictvím fyziologických účinků stopových prvků. Studium kalibračních a standardizovaných metod detekce stopových a makroprvků v Cistanche deserticola má proto velký význam pro vytvoření a zlepšení systému kontroly kvality a hodnocení bezpečnosti tradiční čínské medicíny Cistanche deserticola. Atomová absorpční spektrofotometrie se postupně stala hlavní metodou detekce anorganických prvků díky nízkému detekčnímu limitu, vysoké přesnosti, širokému aplikačnímu rozsahu, malé velikosti vzorku a jednoduché obsluze. Qi Yu a kol. použil plamenovou atomovou absorpční spektrofotometrii ke stanovení obsahu stopových prvků manganu a mědi v Cistanche deserticola v Sin-ťiangu. Chi Wenjun a kol. použil atomový absorpční spektrofotometr ke stanovení obsahu vápníku, hořčíku, mědi, zinku, kobaltu a niklu v Cistanche deserticola. Su Weiwei a další zjistili, že kromě makroprvků, jako je K, Ca a Mg, obsahuje Cistanche deserticola také různé esenciální stopové prvky pro lidské tělo. Mezi nimi jsou Fe, Mn, Zn a další prvky poměrně vysoké, ale obsah Cu je nízký a jsou přítomny i škodlivé prvky jako Pb, As a Hg. Prvek Cd nebyl detekován a bylo zjištěno, že stopové prvky v Cistanche deserticola úzce souvisí s původem, léčivými částmi a dobou sklizně léčivých bylin.

Výhody cistanche tubulosa-zlepšení imunity

Kliknutím sem zobrazíte produkty Cistanche Enhance Immunity

【Požádejte o více】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

8. Aminokyseliny

Rena a kol. naměřili, že obsah aminokyselin v Cistanche deserticola dosáhl 0,74 % a bylo zjištěno celkem 17 aminokyselin, z nichž 7 bylo esenciálních aminokyselin pro lidské tělo. Li Yuxia a kol. [43] zjistili, že Xinjiang Cistanche také obsahuje 17 aminokyselin, včetně valinu, lysinu, methioninu a argininu, s obsahem bílkovin 16,38 %. Mezi nimi má 7 esenciálních aminokyselin pro lidské tělo rozumný poměr, který se blíží referenčním standardům navrhovaným WHO/FAO, což naznačuje, že Cistanche má vysokou nutriční a zdravotní hodnotu a je přírodní zelenou potravinou, která přispívá k rovnováha aminokyselinové výživy v lidském těle.

Cistanche deserticola má extrémně vysokou léčivou hodnotu a je vzácnou výživnou tradiční čínskou medicínou. Kvůli nedostatku zdrojů Cistanche deserticola a dlouhodobým nepřiměřeným výkopům je na pokraji vyčerpání a byl zařazen mezi národní chráněné rostliny druhého stupně. Rostliny stejné čeledi a rodu se přitom běžně používají na trhu tradiční čínské medicíny, aby nahradily Cistanche deserticola. Pro vědecké využití a rozvoj tohoto vzácného zdroje je proto nezbytná kontrola kvality rostlin Cistanche deserticola.