Zkoumání terapeutických účinků formulace na bázi cistanche na chronickou nebakteriální prostatitidu (CNP) a její mechanismus prostřednictvím střevní mikroflóry a metabolismu na potkaním modelu

Abstraktní

Na základě anexperimentální potkaní model autoimunitní prostatitidy (EAP)., tato studie zkoumáterapeutické účinky a základní mechanismy kapsle na bázi Cistanche (CBC)ve zmírněníchronická nebakteriální prostatitida (CNP). Cílem je poskytnout preklinický základ pro vývojvylepšené botanické drogys rozšířenými indikacemi pro řízeníchronická prostatitida a syndromy pánevní bolesti.

Metodologie:

Histopatologické změnyve tkáni prostaty potkana byly hodnoceny pomocíbarvení hematoxylin-eosinem (HE)..

Infiltrace bílých krvinekahustota lecitinového tělav prostatických homogenátech byly hodnoceny mikroskopicky.

Hladiny v sérusuperoxiddismutáza (SOD)amalondialdehyd (MDA)byly měřeny pomocí biochemické analýzy.

Zánětlivé cytokiny(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8 a IL-10) byly kvantifikovány pomocíenzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).

16S rDNA sekvenováníbyl použit k hodnocení změn vstřevní mikroflóra.

Necílená metabolomikabyla provedena analýza k objasněnímetabolické dráhy ovlivněné CBC.

Western blot (WB)byl použit k ověření modulaceSignální dráha SPHK1/S1P1/PI3K/Akt.

Výsledky:

Správa CBC významně:

Snížené histologické poškozenído tkání prostaty;

Zvýšená hustota lecitinového tělaasnížená infiltrace leukocytů;

Snížené prozánětlivé cytokiny(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8);

Zvýšený protizánětlivý cytokin IL-10;

Vylepšené složení střevní mikroflóry, zejména se zvyšujeLactobacillusaBifidobacterium animalis, při snižováníunclassified_f_PrevotellaceaeaVeillonella;

Změněno 10 klíčových metabolitůvčetněsfingosinaretinoyl-glukuronid, ovlivňujícímetabolismus sfingolipidůametabolismus retinolu;

Downregulovaná exprese SPHK1 a S1P1a inhibovánFosforylace PI3K a Aktve tkáni prostaty.

Závěr:

Kapsle na bázi Cistanche (CBC) účinnězmírnit zánětlivé poraněnív prostatické tkáni EAP potkanů. Mechanismy mohou zahrnovat:

Modulace dysbiózy střevní mikrobioty;

Korekce metabolických dysfunkcí;

Potlačení signální dráhy SPHK1/S1P1/PI3K/Akt.

Tato zjištění podporují potenciálBylinné přípravky odvozené od Cistanchejako apřírodní, vícecílová terapieprochronická nebakteriální prostatitidaa nabízí slibný směr do budoucnainovace rostlinných léků.

klíčová slova:

Kapsle na bázi cistanche; chronická nebakteriální prostatitida; střevní mikroflóra; metabolomika; Dráha SPHK1/S1P1/PI3K/Akt; bylinná léčba prostatitidy; přírodní protizánětlivá léčba; EAP model krysy

 

 

Vzorkový čaj na bázi cistanche

Koupit hned

 

 

Abstraktní:

Chronická nebakteriální prostatitida/syndrom chronické pánevní bolesti (CNP/CPPS), také známý jako prostatitida kategorie III, odpovídá přibližně90 % všech případů prostatitidy. Je charakterizována nepohodlím v dolních močových cestách, pánevní a perineální bolestí, sexuální dysfunkcí a často psychologickými nebo neurologickými příznaky. V tradiční čínské medicíně (TCM) je CNP zařazen do kategorie „Jing Zhuo“ (semenný zákal), často spojován s vnitřním vlhkým teplem, nedostatkem sleziny nebo dlouhodobým užíváním studených nebo hořkých léků narušujících funkci sleziny, což vede k akumulaci vlhkosti a tepla v prostatě.

Současná západní farmakologická léčba CNP, včetně antibiotik, blokátorů a NSAID, se primárně zaměřuje na zvládání symptomů a často postrádá dlouhodobou účinnost. Výzkumníci se stále častěji obracejí kbylinná medicína jako bezpečnější a holističtější alternativa.

Cistanche: Nadějný kandidát na bylinky

Cistanche, tradiční čínská bylina známá svýmledviny tonizující, protizánětlivé, imunomodulační a antioxidačnívlastnosti, prokázal potenciál při léčbě různých genitourinárních poruch. Uvádějí to moderní farmakologické studieCistanche deserticolamůže regulovat zánětlivé cytokiny, zesílit imunitní odpověď a zlepšit mikrocirkulacinadějný kandidát na léčbu CNP.

I přes rostoucí zájem precizníMechanismy, kterými Cistanche zmírňuje CNP, zůstávají špatně pochopeny. Nedávné studie tomu nasvědčujídysbióza střevní mikroflóryhraje klíčovou roli v patogenezi CNP. Proto tato studie zkoumá terapeutické účinky aBylinná kapsle na bázi Cistanche (CBC)na CNP pomocí potkaního modelu experimentální autoimunitní prostatitidy (EAP), se zvláštním zaměřením nasložení střevní mikroflóry a metabolomické změny.

 

1. Materiály a metody

1.1 Zvířata

30 samců krys Sprague-Dawley (SD) stupně SPF(300–320 g) a45 samců SD potkanů ​​stupně SPF(180–200 g) byly získány od Hubei Beiante Biological Technology Co., Ltd.

Za standardních podmínek SPF: teplota 25±1 stupeň, vlhkost 55±5 %, 12hodinový cyklus světlo/tma.

Schválení etiky zvířat:HUCMS00302159, udělený Etickou komisí Chu-pejské univerzity čínské medicíny.

1.2 Léky a činidla

Kapsle na bázi Cistanche (CBC)(Šarže: 20221226) od bylinné farmaceutické společnosti s certifikací GMP.

Tamsulosin hydrochlorid tobolky(pozitivní kontrola) zakoupená od Hangzhou Conba Pharmaceutical Co., Ltd.

Kompletní Freundovo adjuvans (CFA)ze Sigmy (Německo).

ELISA soupravypro IL-1, IL-6, IL-8, IL-10, TNF- a iNOS od Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.

Sady na oxidační stres(MDA, T-SOD) od Wuhan Elabscience Biotechnology Co., Ltd.

Soupravy pro extrakci DNA střevní mikroflóryametabolomická činidlaod Meiji Biotechnology (Shanghai).

1.3 Vybavení

Vysokorychlostní centrifuga (Eppendorf, Německo), UHPLC a Q-Exactive HF-X hmotnostní spektrometr (Thermo Fisher Scientific) a další nástroje molekulární biologie pro ELISA, PCR, sekvenování a metabolomickou analýzu.

2. Experimentální protokol

2.1 Model indukce experimentální autoimunitní prostatitidy (EAP).

2.1.1 Příprava emulze proteinu prostaty-CFA

Tkáň prostaty byla extrahována z dárcovských krys, homogenizována ve sterilním fyziologickém roztoku s 0,5% TritonX-100 a centrifugována při 20 000 otáčkách za minutu po dobu 30 minut při 4 stupních.

Koncentrace proteinu upravena na 20 mg/ml pomocí BCA testu.

Proteinový extrakt byl emulgován s CFA v poměru 1:1 za vznikuemulze antigenu CNP.

2.1.2 Postup imunizace

45 SD potkanů ​​(180±20g) bylo náhodně rozděleno, přičemž 10 bylo přiřazeno do normální skupiny.

Zbývající krysy byly přijatysubkutánní vícebodové injekceemulze antigenu CNP v tříslech, vnitřní straně stehna a zádech.

Posilovací imunizace byla podána dneDen 15podle stejného protokolu.

Normální kontroly dostávaly injekce fyziologického roztoku.

2.2 Seskupování a léčba

V den 28 po imunizaci bylo úspěšné modelování potvrzeno histologií (barvení HE).

Potkani byli náhodně rozděleni do:

Normální kontrolní skupina

Modelová skupina

Skupina pozitivních drog: Tamsulosin (0,021 mg/kg)

CBC Low-Dose Group: 0,63 g/kg (klinická ekvivalentní dávka)

CBC High-Dose Group: 1,26 g/kg

Léčba byla podávána perorálně jednou denně po dobu 30 dnů. Kontrolní a modelové skupiny dostávaly fyziologický roztok.

 

 

2.3 Odběr a analýza vzorků

24 hodin po poslední dávce byly krysy usmrceny.

Krev byla odebírána přes břišní aortu; sérum bylo odděleno a skladováno při -80 stupních.

Tkáně prostaty byly odebrány, zváženy a vyšetřeny makroskopicky.

TheIndex prostaty (PI)bylo vypočítáno:
PI=Mokrá hmotnost prostaty / tělesná hmotnost

Tkáně byly fixovány ve formalínu pro histologii nebo zmrazeny pro analýzu cytokinů, Western blotting, extrakci DNA mikrobioty a metabolomiku.

Závěr a význam

Tato studie si klade za cíl poskytnoutpředklinické důkazypro použitíBylinná terapie založená na Cistanchepři léčběchronická nebakteriální prostatitida. Integracíanalýza střevní mikroflóryametabolomické profilování, snažíme se odhalitvícecílové mechanismyprostřednictvím kterého Cistanche uplatňuje své protizánětlivé a imunomodulační účinky.

Tato zjištění podpořívývoj Cistanche jako nové bylinné medicínypro CNP a potenciálně vést knové indikacepro jeho klinickou aplikaci.