Enterální absorpce citrátu železitého je závislá na transportním proteinu železa ferroportinu

Abstraktní

Citrát železitý je schválen jako přípravek k náhradě železa u pacientů s nedialyzovaným chronickým onemocněním ledvin a anémií z nedostatku železa. Železo dodávané citrátem železitým se vstřebává enterálně, ale specifické mechanismy, které se na něm podílejí, nebyly hodnoceny, včetně možností konvenční transcelulární absorpce zprostředkované feroportinem a/nebo paracelulární absorpce zprostředkované citrátem. Zde nejprve demonstrujeme účinnost citrátu železitého v modelech s vysokým hepcidinem, včetně Tmprss6 knockout myší (charakterizované anémií s nedostatkem železa rezistentním na železo) s chronickým onemocněním ledvin vyvolaným dietou adeninem a bez něj. Dále, abychom vyhodnotili, zda enterální absorpce citrátu železitého závisí na feroportinu, hodnotili jsme účinky citrátu železitého na tamoxifenem indukovatelném, enterocyty specifickém ferroportin knockout myším modelu (Villin-Cre-ERT2, Fpn flox/flox). V tomto modelu byla delece ferroportinu účinná, protože injekce tamoxifenu vyvolala 4000-násobný pokles exprese mRNA ferroportinu ve dvanáctníku s nedetekovatelným proteinem ferroportinu na Western blotu duodenálních enterocytů, což mělo za následek závažný fenotyp anémie s nedostatkem železa. U myší s deficitem feroportinu nezlepšily tři týdny 1procentního doplňku stravy citrát železitý, což je dávka, která zabránila nedostatku železa u kontrolních myší, stav železa ani nezbavily fenotyp anémie s nedostatkem železa. Zopakovali jsme experiment podmíněného knockoutu ferroportinu v podmínkách urémie s použitím modelu adeninové nefropatie, kde tři týdny 1% doplňování stravy citrátem železitým opět nedokázaly zlepšit stav železa nebo zachránit fenotyp anémie z nedostatku železa. Naše data tedy naznačují, že enterální absorpce citrátu železitého je závislá na konvenčním transportu železa enterocyty feroportinem a že v těchto modelech nedochází k významné paracelulární absorpci.

Klíčová slova

citrát železitý; ferroportin; hepcidin; žehlička; anémie; chronické onemocnění ledvin.

Kliknutím sem zjistíte, jaký je účinek přípravku Cistanche na ledviny

Úvod

Auryxia (citrát železitý [FC]; Akebia Therapeutics, Inc., Cambridge, MA) je nová sloučenina, která je schválena pro klinické použití jako enterální vazač fosfátů u dospělých pacientů s chronickým onemocněním ledvin (CKD) na dialýze. V randomizovaných, placebem kontrolovaných studiích prováděných u pacientů s CKD nezávislých na dialýze FC významně snížila koncentrace fosfátů v séru.1,2 V randomizovaných, aktivně kontrolovaných studiích prováděných u pacientů s CKD závislých na dialýze, FC produkovala podobné snížení koncentrací fosfátů v séru. .3,4

Auryxia je také schválena v USA pro klinické použití jako přípravek pro náhradu železa u nedialyzovaných pacientů s CKD s anémií z nedostatku železa. Ve 4 výše uvedených randomizovaných kontrolovaných studiích, provedených v kohortách s CKD nezávislou na dialýze, i na kohortách závislých na dialýze, FC významně zvýšila saturaci transferinu v séru (TSAT).1–4 FC tak může fungovat jako účinný enterální vazač fosfátů a enterální zdroj železa.

Je pozoruhodné, že FC koriguje nedostatek železa při onemocnění CKD a dokonce i v konečném stadiu onemocnění ledvin, protože jde o stavy s vysokými hladinami hepcidinu.5–8 Hepcidin je hlavní hormon regulující železo, váže se a inhibuje ferroportin, jediný známým exportérem buněčného železa.9 Při vysokých hladinách hepcidinu je aktivita ferroportinu – lokalizovaného na bazálním povrchu enterocytů – snížena, čímž se inhibuje dietní a medicinální absorpce železa z gastrointestinálního lumenu 10.

Mechanismy, kterými FC překonává enterální blok železa vyvolaný vysokými hladinami hepcidinu a nízkými hladinami ferroportinu, nejsou jasné. Jednou z hypotéz je, že citrátová část v FC chelatuje ionty vápníku, což vede k narušení intercelulárních těsných spojení enterocytů, což umožňuje paracelulární absorpci železa, která je nezávislá na dráze hepcidin-ferroportin. Zajímavým bodem, který je třeba poznamenat, je, že bylo zjištěno, že citrátové sloučeniny usnadňují paracelulární enterální absorpci hliníku,11,12 což zvyšuje možnost, že absorpce železa je zvýšena stejným mechanismem. Abychom vyhodnotili, zda enterální absorpce železa spojená s FC probíhá transcelulární cestou závislou na feroportinu nebo paracelulární cestou nezávislou na feroportinu, hodnotili jsme enterální absorpci FC na myších modelech, s nebo bez CKD, s nízkou nebo nepřítomnou aktivitou enterocytového ferroportinu.

Doplněk Cistanche

METODY

1. Pokusy s myší

Experimenty byly prováděny směrnicí divize Laboratory Animal Medicine na Kalifornské univerzitě v Los Angeles (UCLA) a protokoly studie byly schváleny Úřadem pro dohled nad výzkumem zvířat UCLA. Myši byly umístěny na UCLA ve standardních klecích s podestýlkou ​​z dřevěných štěpků, která se vyměňovala dvakrát týdně. Místnosti pro zvířata byly regulovány teplotou a vlhkostí s 12-hodinovým světelným cyklem. Nejprve jsme hodnotili účinky FC u myší s knockoutem transmembránové serinové proteázy 6 (Tmprss6), modelu charakterizovaného vysokými hladinami hepcidinu, nízkou aktivitou ferroportinu a výslednou anémií z nedostatku železa vzdorující železu13, a to jak bez diety, tak s přidáním adeninové diety. -indukované CKD, které dále zvyšuje hladiny hepcidinu.14 Abychom zcela inhibovali aktivitu enterálního ferroportinu, dále jsme hodnotili účinky FC v tamoxifenem indukovatelném enterocytespecifickém ferroportinovém (FPN) knockout modelu (Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox). Nakonec jsme hodnotili účinky FC na modelu Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox s adeninovou dietou vyvolanou CKD.

2. Tmprss6 knockout myši

Knokautované myši Tmprss6 na genetickém pozadí C57BL/6 laskavě poskytla Dr. Jodie Babitt (Massachusetts General Hospital). Nejprve jsme hodnotili účinky FC u Tmprss6 knockout myší a sourozenců divokého typu (WT) bez CKD. Myši ve věku 4–7 týdnů byly krmeny 50 ppm železa bez adeninu (Envigo, Hackensack, NJ), s nebo bez 0,1 procenta FC (Akebia Therapeutics, Inc.), po dobu 3 týdnů a poté byli usmrceni. Dále jsme hodnotili účinky FC u Tmprss6 knockout myší a WT sourozenců s CKD. Myši ve věku 8–12 týdnů byly krmeny 50 ppm železa dietou s 0,2 procenta adeninu (Envigo), aby se vyvolalo CKD,15–17 po dobu 6 týdnů. Za poslední 3 týdny diet bylo pro jednu skupinu přidáno 0,1 procenta FC (Akebia Therapeutics, Inc.) a pro jinou nepřidáno. Tato dávka FC u myší odpovídá typické dávce FC pro dospělého člověka; u dospělého člověka obsahují 2 tablety přípravku Auryxia užívané třikrát denně (6000 mg FC) kumulativní denní dávku železitého železa 1260 mg, což je množství odpovídající přibližně jedné třetině celkového množství železa v těle. U myší přibližně jedna třetina celkového tělesného železa odpovídá ~0,8 mg trojmocného železa denně nebo ~4 mg FC denně, což při denní konzumaci potravy myší ~4 g odpovídá krmivu obsahujícímu 0,1 procenta FC. V těchto experimentech každá skupina obsahovala přibližně polovinu mužů a polovinu žen. Po usmrcení jsme odebrali plnou krev, sérum, játra a duodenální enterocyty. Pro izolaci duodenálních enterocytů byla proximální část duodena (~2 cm) podélně rozříznuta a přenesena do ledově studeného roztoku kyseliny ethylendiamintetraoctové. Roztok byl vortexován, aby se usnadnilo oddělení buněk, a dispergované buňky byly shromážděny filtrací.

3. NeCKD enterocyt-specifické feroportinové knockout myši

Tamoxifenem indukovatelné, enterocytově specifické feroportinové (FPN) knockout myši byly vytvořeny chovem Villin-Cre-ERT2 myší s Fpnflox/flox myšmi, z nichž obě jsou na genetickém pozadí C57BL/6. Myši Villin-Cre-ERT2 laskavě poskytl Dr. Peter Tontonoz (UCLA). Abychom tento model charakterizovali, vyhodnotili jsme myši Fpnflox/flox, s nebo bez VillinCre-ERT2, s nebo bez indukce tamoxifenem (0.075 mg/g tělesné hmotnosti, injekčně ip jednou denně po dobu 4 po sobě jdoucích dny, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). K posouzení účinků FC v tomto modelu jsme použili myši Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox ve věku 6–8 týdnů, kterým bylo ip injikováno buď vehikulum ze slunečnicového oleje (neindukovaná skupina) nebo tamoxifen (0,075 mg/g tělesné hmotnosti; indukovaná skupina) jednou denně po dobu 4 po sobě jdoucích dnů. Myši byly udržovány na dietě s 50 ppm železa (Envigo) a poté byly usmrceny 7 týdnů po injekci. Některé z tamoxifenem indukovaných myší měly 1 procento FC přidáno do jejich stravy po dobu 3 týdnů bezprostředně před usmrcením. V těchto experimentech bylo 1 procento FC – suprafyziologická dávka – zvoleno tak, aby nedošlo k vynechání účinku sekundárního k nedostatečnému dávkování FC. Abychom demonstrovali účinnost této dávky, provedli jsme samostatný pozitivní kontrolní experiment, ve kterém jsme hodnotili, zda 3 týdny suplementace 1% FC může zachránit fenotyp anémie s nedostatkem železa u neindukovaných myší Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox krmených dieta s nízkým obsahem železa (4 ppm) (Envigo). V neCKD enterocytech specifických ferroportin knockout experimentech každá skupina obsahovala muže i ženy. Po usmrcení jsme odebrali plnou krev, sérum, játra, duodenální enterocyty a celý duodenum pro barvení železem. Duodenální enterocyty byly izolovány, jak je popsáno výše. Pro barvení duodenálního železa byly vzorky z proximálního duodena fixovány ve formalínu a poté vloženy do parafínových bloků, ze kterých byla vytvořena sklíčka. Deparafinizované řezy byly obarveny barvivem Perls Prussian blue pro nehemové železo a kontrastně obarveny jadernou rychlou červení. Stupeň barvení duodenálních enterocytů železem byl hodnocen na semikvantitativní stupnici zaslepeným recenzentem (SN).

4. CKD enterocytově specifické feroportinové knockout myši

Pro zopakování výše uvedeného experimentu v podmínkách CKD se samcům myší Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox ve věku 6 týdnů začalo podávat 0,2% adeninovou dietu (Envigo), aby se vyvolalo CKD. Vzhledem k rozdílům mezi pohlavími v modelu CKD hlodavců vyvolaných adeninovou dietou (samice jsou odolnější vůči účinkům adeninu z potravy)18 byli použiti pouze samci myší. Ve věku 8 týdnů byly myši ip injikovány, jak je popsáno výše, vehikulem ze slunečnicového oleje nebo tamoxifenem. Ve věku 12 týdnů, po 6 týdnech adeninové diety, byly myši převedeny na standardní neadeninovou dietu s 50 ppm železa s nebo bez přidaného 1 procenta FC. Myši byly usmrceny ve věku 15 týdnů, 7 týdnů po injekci a po 3 týdnech léčby s FC nebo bez FC. Plná krev pro měření hemoglobinu a červených krvinek byla odebrána, když byly myši staré 8 týdnů (v době injekce), 12 týdnů (po zahájení diety s FC nebo bez FC) a 15 týdnů (při usmrcení). Sérum pro měření močovinového dusíku a železa bylo odebráno, když byly myši staré 12 a 15 týdnů. Při usmrcení byly odebrány jaterní a duodenální enterocyty, jak je popsáno výše.

Herba Cistanche

5. Krevní testy

Kompletní krevní obraz byl měřen automatizovaným procesorem Hemavet 950 (Drew Scientific, Oxford, CT). Kolorimetrické metody byly použity pro stanovení sérového močovinového dusíku (BioAssay Systems, Hayward, CA) a sérového železa (Genzyme, Cambridge, MA). K měření hladin hepcidinu v séru byly použity vlastní imunoanalýzy s enzymem vázaným na imunosorbent (ELISA), jak bylo popsáno dříve.19 K měření sérového erytropoetinu byla použita komerčně dostupná souprava ELISA (R&D Systems, Minneapolis, MN).

6. Kvantitativní koncentrace železa v játrech

Sklizená játra byla bleskově zmražena v tekutém dusíku a skladována při -80 stupních. Malé kousky jater (~100 mg) byly zváženy a homogenizovány. Byl přidán roztok pro srážení proteinu (0,53 N HC1 a 5,3 % kyselina trichloroctová v dvakrát destilované vodě) a vzorky byly povařeny a odstředěny. Koncentrace železa v supernatantech byly měřeny kolorimetrickým testem (Genzyme), poté normalizovány na hmotnosti původních vzorků, aby se získaly koncentrace tkáňového železa.

7. Kvantitativní polymerázová řetězová reakce v reálném čase (PCR)

Duodenální enterocyty byly homogenizovány v Trizolu (Invitrogen, Waltham, MA) a RNA byla izolována podle protokolu výrobce. Provedli jsme kvantitativní reverzní transkripci (RT)–PCR pomocí soupravy iScript RT-PCR (Bio-Rad, Hercules, CA) a primerů specifických pro myší Fpn (vpřed: 5'-ATGGGAACTGTGGCCTTCAC-3'; zpětně: 5' -TCCAGGCATGAATACGGAGA-3'). Použili jsme následující podmínky PCR: počáteční denaturace při 95 stupních po dobu 2 minut, následovaných 40 cykly denaturace při 94 stupních po dobu 30 sekund, žíhání při 58 stupních po dobu 30 sekund, extenze při 72 stupních po dobu 1 minuty a konečná extenze v 72 stupně po dobu 10 minut. Genová exprese byla normalizována na exprese hypoxanthin-guanin fosforibosyltransferázy (Hprt) (vpřed: 5'-CTGGTTAAGCAGTACAGCCCCAA-3'; zpětně: 5'-CAGGAGGTCCTTTTCACCAGC-3') a každý duplicitní vzorek RNA byl analyzován . Relativní násobek genové exprese se vypočítal pomocí delta-delta Ct metody.

8. západní blotting

Pro detekci feritinového proteinu na Western blotu byla jako primární protilátka použita králičí anti-myší FTH1 (D1D4; Cell Signaling Technology, Danvers, MA), v koncentraci 1:10,000, a použitá sekundární protilátka byla kozí anti-králičí IgG (Cell Signaling Technology), v koncentraci 1:5000. Pro detekci ferroportinu na Western blotu byla jako primární protilátka použita krysí anti-myší FPN (1C7; Amgen, Thousand Oaks, CA), v koncentraci 1:3300, a jako sekundární protilátka byla použita králičí anti-krysí IgG (ab102213; Abcam, Cambridge, MA), v koncentraci 1:5000. Pro kontrolu nanášení proteinu aktinu byla použita myší protilátka proti aktinu (A3854; Sigma-Aldrich) v koncentraci 1:50 000. Chemiluminiscenční signál byl detekován pomocí systému ChemiDoc XRS plus se softwarem Image Lab (Bio-Rad).

9. Statistická analýza

Vytvoření obrázku a statistická analýza byly provedeny pomocí Graph-Pad Prism 9.2.0 (San Diego, CA). Údaje o myších jsou prezentovány jako průměr ± SD a pro srovnání skupinových průměrů byly použity t-testy. U nenormálně distribuovaných dat byla před statistickou analýzou použita logaritmická transformace. Hodnoty P < 0,05 byly považovány za statisticky významné.

Kapsle Cistanche

DISKUSE

V klinických studiích bylo prokázáno, že FC koriguje deficit železa u pacientů s CKD a terminálním onemocněním ledvin, což jsou stavy s vysokými hladinami hepcidinu.5–8 Při vysokých koncentracích cirkulujícího hepcidinu je snížena aktivita enterálního ferroportinu, vyvolává hepcidinem zprostředkovaný slizniční blok enterální absorpce železa.9 Mechanismy, kterými FC může překonat tento enterální absorpční blok, nejsou známy. Jednou z hypotéz je, že citrátová část uvolňuje mezibuněčná těsná spojení, což usnadňuje paracelulární enterální absorpci železa nezávislou na ferroportinu. Tuto hypotézu jsme testovali hodnocením účinnosti FC v modelech s vysokým obsahem hepcidinu/nízkým ferroportinem – s CKD a bez CKD – ve kterých je transcelulární dráha vstřebávání železa téměř odstraněna nebo zcela zablokována.

V našem prvním modelu Tmprss6 knockout myši bez CKD, u kterých jsou hladiny hepcidinu mírně zvýšené, FC zlepšil stav železa a zvýšil koncentrace hemoglobinu. Podobně v našich WT a Tmprss6 knockout modelech s CKD, ve kterých jsou hladiny hepcidinu výrazně zvýšené, FC zvýšil počet červených krvinek a hemoglobin. Tato data demonstrují účinnost FC ve státech s vysokými hladinami hepcidinu a jsou v souladu s tím, co bylo pozorováno v klinických studiích FC; tyto modely však nenaznačují, jaké jsou mechanismy, kterými FC překonává slizniční hepcidinový blok.

V těchto modelech, ve kterých zůstává feroportin intaktní, může být FC absorbován paracelulární cestou, která obchází osu hepcidin-ferroportin, nebo může být absorbován transcelulární cestou s využitím feroportinu. K vyhodnocení závislosti FC na enterálním ferroportinu jsme použili indukovatelný, enterocytově specifický feroportin knockout myší model. Tento model je vysoce účinný při téměř úplné depleci enterocytárního ferroportinového proteinu, což má za následek drasticky sníženou enterální absorpci železa a těžkou anémii z nedostatku železa, což je fenotyp, který lze zachránit parenterálním podáváním železa. -závislá dráha by byla snadno detekovatelná.

V našem non-CKD modelu, v nepřítomnosti enterocytárního ferroportinu, dávka FC, která byla účinná u WT myší, nezlepšila stav železa ani nezachránila fenotyp anémie s nedostatkem železa. Malé zvýšení počtu červených krvinek a hemoglobinu nebylo statisticky významné, což naznačuje, že enterální absorpce FC je převážně závislá na feroportinu, což svědčí proti rozsáhlé paracelulární absorpci. V podmínkách CKD by faktory spojené s urémií mohly potenciálně zvýšit propustnost střeva,24 případně uvolnit mezibuněčná těsná spojení a usnadnit určitý stupeň paracelulární absorpce FC. V našem modelu CKD však FC významně zlepšil stav železa v přítomnosti enterocytárního ferroportinu, ale ne v jeho nepřítomnosti. Tato data naznačují, že i v případě CKD je enterální absorpce FC převážně zprostředkována transportem feroportinu a nikoli možnými paracelulárními cestami. U myší s neindukovanou CKD léčba FC zvýšila protein ferroportinu ve dvanáctníku, navzdory nižší expresi mRNA ferroportinu ve dvanáctníku, což je v souladu se zavedeným mechanismem, kterým intracelulární akumulace železa spouští derepresi translace ferroportinu zprostředkovanou IRP,21–23 a tím usnadňuje absorpci buněčného železa a dodání do oběhu.

Provedli jsme 2 experimenty s CKD. Konečné průměrné koncentrace močovinového dusíku a hemoglobinu v séru byly podobné mezi kontrolní skupinou WT CKD s dietou z prvního experimentu a skupinou s neindukovaným, neléčeným CKD z druhého experimentu. Avšak v prvním CKD experimentu měly WT myši léčené FC signifikantní zvýšení hemoglobinu, ale ve druhém CKD experimentu neindukované myši léčené FC neměly významný nárůst hemoglobinu. Důvod, proč FC významně nezvýšil hemoglobin u neindukovaných myší, navzdory jasnému zlepšení stavu železa, není jasný; možné přispívající faktory však zahrnují multifaktoriální etiologii CKD anémie, malé velikosti vzorků neindukovaných myší a opakovanou flebotomii v tomto experimentu. Dalším omezením studie je, že jsme použili myší modely, jejichž přenositelnost na člověka není jistá. Důkazy o absenci významné paracelulární absorpce FC jsou také nepřímé, ačkoli jsou robustní.

Cistanche tubulosa

Stručně řečeno, v našich modelech s vysokou hladinou hepcidinu jsme pozorovali příznivé účinky FC na parametry železa a erytrocytů, což naznačuje účinnou enterální absorpci železa navzdory vysokým hladinám hepcidinu. Abychom vyhodnotili, zda FC může obejít slizniční hepcidinový blok prostřednictvím potenciální paracelulární absorpce usnadněné citrátem, hodnotili jsme indukovatelný, pro enterocyty specifický feroportinový knockout model, v přítomnosti nebo nepřítomnosti poškozené funkce ledvin. V těchto modelech FC nezachránil fenotyp anémie s nedostatkem železa, což dokazuje, že enterální absorpce FC je převážně závislá na feroportinu, a naznačuje, že paracelulární dráhy pravděpodobně nepředstavují hlavní cesty fyziologické absorpce FC.

REFERENCE

1. Block GA, Fishbane S, Rodriguez M, et al. 12-týdenní, dvojitě zaslepená, placebem kontrolovaná studie citrátu železitého k léčbě anémie z nedostatku železa a snížení sérového fosfátu u pacientů ve stádiu chronického onemocnění ledvin 3-5. Am J Kidney Dis. 2015;65:728–736. [PubMed: 25468387]

2. Yokoyama K, Hirakata H, Akiba T, a kol. Hydrát citrátu železitého pro léčbu hyperfosfatemie u chronického onemocnění ledvin, které není závislé na dialýze. Clin J Am Soc Nephrol. 2014;9:543–552. [PubMed: 24408120]

3. Lewis JB, Sika M, Koury MJ, et al. Citran železitý kontroluje fosfor a dodává železo u pacientů na dialýze. J Am Soc Nephrol. 2015;26:493–503. [PubMed: 25060056]

4. Yokoyama K, Akiba T, Fukagawa M, et al. Randomizovaná studie JTT-751 versus sevelamer hydrochlorid u pacientů na hemodialýze. Transplantace nefrolových čísel. 2014;29:1053–1060. [PubMed: 24376274]

5. Zaritsky J, Young B, Wang HJ a kol. Hepcidin – potenciální nový biomarker pro stav železa u chronického onemocnění ledvin. Clin J Am Soc Nephrol. 2009;4:1051–1056. [PubMed: 19406957]

6. Ashby DR, Gale DP, Busbridge M, et al. Plazmatické hladiny hepcidinu jsou zvýšené, ale reagují na léčbu erytropoetinem u onemocnění ledvin. Kidney Int. 2009;75:976–981. [PubMed: 19212416]

7. Zaritsky J, Young B, Gales B, et al. Snížení sérového hepcidinu hemodialýzou u pediatrických a dospělých pacientů. Clin J Am Soc Nephrol. 2010;5:1010–1014. [PubMed: 20299375]

8. Troutt JS, Butterfield AM, Konrad RJ. Koncentrace hepcidinu-25 jsou výrazně zvýšené u pacientů s chronickým onemocněním ledvin a nepřímo korelují s odhadovanými rychlostmi glomerulární filtrace. J Clin Lab Anal. 2013;27:504–510. [PubMed: 24218134]

9. Nemeth E, Tuttle MS, Powelson J, et al. Hepcidin reguluje eflux buněčného železa vazbou t ferroportinu a indukcí jeho internalizace. Věda. 2004;306:2090–2093. [PubMed: 15514116]

10. Ganz T, Bino A, Salusky IB. Mechanismus účinku a klinické vlastnosti Auryxia ® (citrát železitý). Drogy. 2019;79:957–968. [PubMed: 31134521]

11. Froment DP, Molitoris BA, Buddington B a kol. Místo a mechanismus zvýšené gastrointestinální absorpce hliníku citrátem. Kidney Int. 1989;36:978–984. [PubMed: 2601265]

12. Gupta A Hydrát citrátu železitého jako pojivo fosfátů a riziko toxicity hliníku. Pharmaceuticals (Basilej). 2014;7:990–998. [PubMed: 25341358]

13. Folgueras AR, de Lara FM, Pendás AM, et al. Membránově vázaná serinová proteáza matriptáza-2 (Tmprss6) je základním regulátorem homeostázy železa. Krev. 2008;112:2539–2545. [PubMed: 18523150]

14. Hanudel MR, Rappaport M, Gabayan V, et al. Zvýšený sérový hepcidin přispívá k anémii chronického onemocnění ledvin u myšího modelu. Hematologická. 2017;102:e85–e88. [PubMed: 27884972]

15. Jia T, Olauson H, Lindberg K, a kol. Nový model adeninem indukované tubulointersticiální nefropatie u myší. BMC Nephrol. 2013;14:116. [PubMed: 23718816]

16. Tamura M, Aizawa R, Hori M a kol. Progresivní renální dysfunkce a infiltrace makrofágů při intersticiální fibróze na myším modelu tubulointersticiální nefritidy indukované adeninem. Histochem Cell Biol. 2009;131: 483–490. [PubMed: 19159945]

17. Klinkhammer BM, Djudjaj S, Kunter U, et al. Buněčné a molekulární mechanismy poškození ledvin u 2,8-dihydroxyadeninové nefropatie. J Am Soc Nephrol. 2020;31:799–816. [PubMed: 32086278]

18. Diwan V, Small D, Kauter K, et al. Genderové rozdíly u adeninem indukovaného chronického onemocnění ledvin a kardiovaskulárních komplikací u potkanů. Am J Physiol Renální Physiol. 2014;307:F1169–F1178. [PubMed: 25209863]

19. Kim A, Fung E, Parikh SG, a kol. Myší model anémie zánětu: komplexní patogeneze s částečnou závislostí na hepcidinu. Krev. 2014;123:1129–1136. [PubMed: 24357728]

20. Finberg KE, Whittlesey RL, Fleming MD, et al. Down-regulace signalizace Bmp/Smad pomocí Tmprss6 je nutná pro udržení systémové homeostázy železa. Krev. 2010;115:3817–3826. [PubMed: 20200349]

21. Darshan D, Wilkins SJ, Frazer DM, et al. Snížená exprese ferroportinu-1 zprostředkovává hyporeaktivitu sajících potkanů ​​na podněty, které snižují absorpci železa. Gastroenterologie. 2011;141:300–309. [PubMed: 21570398]

22. Galy B, Ferring-Appel D, Becker C, a kol. Regulační proteiny železa řídí slizniční blok střevní absorpce železa. Cell Rep. 2013;3:844–857. [PubMed: 23523353]

23. Wilkinson N, Pantopoulos K. Systém IRP/IRE in vivo: poznatky z myších modelů. Front Pharmacol. 2014;5:176. [PubMed: 25120486]

24. Meijers B, Farré R, Dejongh S, et al. Funkce střevní bariéry u chronického onemocnění ledvin. Toxiny (Basilej). 2018;10:298.

25. Schiavi SC, Tang W, Bracken C, a kol. Delece Npt2b zmírňuje hyperfosfatemii spojenou s CKD. J Am Soc Nephrol. 2012;23:1691–1700. [PubMed: 22859851]

26. Donovan A, Lima CA, Pinkus JL a kol. Exportér železa ferroportin/Slc40a1 je nezbytný pro homeostázu železa. Cell Metab. 2005;1:191–200. [PubMed: 16054062]

Mark R. Hanudel1, Brian Czaya2, Shirley Wong2, Maxime Rappaport1, Shweta Namjoshi1, Kristine Chua2, Grace Jung2, Victoria Gabayan2, Bo Qiao2, Elizabeta Nemeth2, Tomas Ganz2

1. Pediatrics Department, David Geffen School of Medicine na UCLA, Los Angeles, Kalifornie, USA

2. Department of Medicine, David Geffen School of Medicine na UCLA, Los Angeles, Kalifornie, USA