Účinky načasování kontralaterální nefrektomie a ischemických stavů na fibrózu ledvin po jednostranném ischemicko-reperfuzním poranění ledvin Ⅱ
Oct 27, 2023
Výsledek
Protokol 1: Účinky intervalu mezi kontralaterální nefrektomií a uIRI na přechod AKI CKD Míra přežití klesala s prodloužením intervalu mezi kontralaterální nefrektomií a IRI
Jak bylo uvedeno v experimentu 1, trvání ischemie bylo fixováno na 24 minut s tělesnou teplotou 37 °C v uIRI. Pozorujeme vliv načasování kontralaterální nefrektomie po uIRI na přežití myší. Data ukázala, že ve skupině 7. den (kontralaterální intaktní ledvina byla resekována 7 dní po uIRI), všech osm myší přežilo. Ve skupině 10. den uhynula jedna myš den po kontralaterální nefrektomii s mírou přežití 87,5 %. Ve skupině dne 14 jedna myš zemřela první den po kontralaterální nefrektomii a dvě myši zemřely dva dny po kontralaterální nefrektomii s mírou přežití 62,5 %. Tyto výsledky ukázaly, že míra přežití myší se postupně snižovala s prodloužením kontralaterální nefrektomie, když byly ostatní dva ovlivňující faktory fixovány (obrázek 2(A)).
KLIKNĚTE ZDE A ZÍSKEJTE BYLINNÝ PŘÍPRAVEK CISTANCHE PRO LEDVINY
Funkce ledvin klesala s prodloužením intervalu mezi kontralaterální nefrektomií a uIRI
Ve srovnání s kontrolní kontrolou byly SCr a BUN významně vyšší u všech myší po kontralaterální nefrektomii (p < {{0}} 0,05), což naznačuje, že všechny trpěly poškozením ledvin. Kromě toho se hladiny SCr a BUN zvýšily s prodloužením intervalu mezi kontralaterální nefrektomií a uIRI (p < 0,05) (obrázek 2 (B, C))
Histologické poškození ledvin se zhoršilo s prodloužením intervalu mezi kontralaterální nefrektomií a uIRI
Barvení HE prokázalo, že ledvinová tkáň kontrolní skupiny byla strukturálně normální 8 týdnů po uIRI. Ve všech skupinách uIRI bylo v ledvině detekováno několik patologických změn po AKI (obrázek 3(A)), včetně různých stupňů vakuolární degenerace tubulárních epiteliálních buněk, odchlípení kartáčového lemu, fokální dezintegrační nekrózy, dilatace některých tubulárních lumen a ledvin edém tubulárních epiteliálních buněk s proměnlivou morfologií. Kromě toho byly některé glomeruly vrásčité a sklerotické, s hyperplazií mezangiálních buněk a dilatovaným Bowmanovým pouzdrem. Infiltrace zánětlivých buněk byla také pozorována v intersticiálním prostoru ledvin. Skóre tubulárního a glomerulárního patologického poškození poraněné ledviny bylo vyšší než u simulace (p < 0.05), což naznačuje, že uIRI s kontralaterální nefrektomií významně poškodilo ledvinu. Skóre patologického poškození ledvin se zvýšilo s prodloužením kontralaterální nefrektomie (p < 0,05) (obrázek 3(B,C)). Tyto nálezy naznačují, že patologické poškození ledvin postupně narůstalo s rozšířením kontralaterální nefrektomie po UIRI.
Obrázek 2. Účinky časových intervalů mezi kontralaterální nefrektomií a unilaterálním ischemicko-reperfuzním poškozením (uIRI) na míru přežití a funkci ledvin. Levá ledvina byla podrobena IRI v den 0 a resekce pravé ledviny byla provedena v různých časových bodech (den 7, den 10 a den 14) s délkou trvání ischemie stanovenou na 24 minut s tělesná teplota fixovaná na 37 C během ischemie ledvin. (A): Přežití myší v každé skupině bylo hodnoceno a prezentováno jako procento. (B a C): Funkce ledvin byla odhadnuta pomocí sérového kreatininu (SCr) a dusíku močoviny v krvi (BUN). n ¼ 5–8/skupina. p < 0,05.
Obrázek 3. Účinky časových intervalů mezi kontralaterální nefrektomií a unilaterálním ischemicko-reperfuzním poškozením (uIRI) na histologické poškození ledvin. Levá ledvina byla podrobena IRI v den 0 a resekce pravé ledviny byla provedena v různých časových bodech (den 7, den 10 a den 14) s délkou trvání ischemie stanovenou na 24 minut s tělesná teplota fixována na 37 C během ischemie ledvin. Histologické poškození ledvin bylo stanoveno barvením hematoxylinem-eosinem (HE). (A): Reprezentativní HE barvení poraněné ledviny, které vykazovalo typické histopatologické rysy post-AKI patologických změn, včetně různých stupňů vakuolární degenerace tubulárních epiteliálních buněk, odchlípení kartáčového lemu, fokální dezintegrační nekrózy, dilatace některých tubulárních lumen (# ), edém tubulárních epiteliálních buněk ledvin s variabilní morfologií a infiltrace zánětlivých buněk (%). Některé glomeruly byly vrásčité a sklerotické, s hyperplazií mesangiálních buněk (&) a dilatovaným Bowmanovým pouzdrem (zvětšení, 400 um). (B): Semikvantifikace tubulárního poranění. (C): Semikvantifikace glomerulárního poškození. n ¼ 5–8/skupina. p < 0,05.
Fibróza ledvin se zhoršila s prodloužením intervalu mezi kontralaterální nefrektomií a uIRI Hmotnost ledvin.
Transformace z AKI na CKD je typicky charakterizována fibrózou ledvin [19] a pokles hmotnosti ledvin je makroskopickým indikátorem fibrózy ledvin [2]. Změřili jsme tedy hmotnost ledvin (váha dítěte kalibrovaná podle tělesné hmotnosti), abychom předběžně prozkoumali vliv časových intervalů mezi UIRI a odloženou kontralaterální nefrektomií na přechod AKI-CKD. Ve srovnání s falešnou skupinou všechny skupiny uIRI vykazovaly významné snížení hmotnosti ledvin (p < 0 0,05), což naznačuje, že všechny myši ve skupinách uIRI měly fibrózu ledvin. Rozdíl v hmotnosti ledviny se významně změnil, když byl rozdíl v časovém intervalu mezi kontralaterální nefrektomií a uIRI 3 dny, a hmotnost ledviny se postupně snižovala s prodlužujícím se intervalem (obrázek 4(A)).
Massonova trichromová skvrna.
Bylo provedeno Massonovo trichromové barvení, aby se dále sledoval účinek časových intervalů mezi kontralaterální nefrektomií a uIRI na fibrózu ledvin. Žádná významná ledvinová intersticiální fibróza nebyla pozorována ve skupině s falešnou léčbou, zatímco různé stupně fibrotických změn v ledvině všech skupin UIRI byly pozorovány 8 týdnů po UIRI (obrázek 4(B)). Semikvantitativní analýza fibrotické oblasti ukázala, že fibrotická oblast ledviny ve skupinách s uIRI byla významně zvýšena ve srovnání s oblastí ve skupině s falešnou léčbou (p < 0.05), což naznačuje, že byl úspěšně proveden přechodový model AKI CKD. Navíc se zpožděním kontralaterální nefrektomie byla fibróza ledvin stále závažnější (p < 0,05), což naznačuje, že stupeň fibrózy ledviny se významně změnil, když byl interval mezi kontralaterální nefrektomií a uIRI 3 dny. S prodlouženým časovým intervalem mezi kontralaterální nefrektomií a uIRI se stupeň fibrózy ledviny více zhoršil (obrázek 4(C)).
Obrázek 4. Účinky časových intervalů mezi kontralaterální nefrektomií a unilaterálním ischemicko-reperfuzním poškozením (uIRI) na fibrózu ledvin. Levá ledvina byla podrobena IRI v den 0 a resekce pravé ledviny byla provedena v různých časových bodech (den 7, den 10 a den 14) s délkou trvání ischemie stanovenou na 24 minut s tělesná teplota fixovaná na 37 C během ischemie ledvin. Fibróza ledvin byla hodnocena hmotností ledvin, Massonovým trichromem a expresí fibronektinu (FN), kolagenu I (COL-I) a a-aktinu hladkého svalstva (a-SMA). (A): Hmotnost ledvin k tělesné hmotnosti. (B): Reprezentativní Massonovo trichromové barvení poraněné ledviny, které vykazovalo typické fibrotické změny (%) (zvětšení, 200 ). (C): Semikvantifikace fibrotické oblasti detekované Massonovým trichromem. (D): Kvantitativní RT-PCR analýzy pro expresi FN v ledvinách. (E): Kvantitativní RT-PCR analýzy pro expresi COL-I v ledvinách. (F): Reprezentativní obrázky Western blot pro FN, COL-I a a-SMA. (G): Sloupcový graf ukazující expresi FN proteinu normalizovanou b-aktinem. (H): Sloupcový graf ukazující expresi proteinu COL-I normalizovanou b-aktinem. I: Sloupcový graf znázorňující expresi proteinu a-SMA normalizovanou b-aktinem. n ¼ 5–8/skupina. p < 0,05.
Akumulace extracelulární matrix (ECM).
Intersticiální fibróza ledvin je charakterizována ukládáním ECM [2], jako je FN a COL-I, v intersticiální oblasti ledviny. Analýza Western blot a RT-PCR ukázala, že exprese FN a COL-I v ledvinách byla významně zvýšena ve všech skupinách uIRI ve srovnání s kontrolní skupinou (p < 0.05), což naznačuje že všechny dětské ney prodělaly fibrotické změny. Hladiny exprese FN a COL-I v ledvině byly vyšší se zpožděním kontralaterální nefrektomie (p < 0,05) (obr. 4(D–H)).
Myofibroblasty v ledvinách.
Fibróza ledvin je charakterizována akumulací myofibroblastů a následnou produkcí ECM [20]. a-SMA byl použit k detekci množství myofibroblastů 8 týdnů po IRI. Analýza Western blot ukázala, že exprese a-SMA v ledvinových tkáních významně vzrostla ve všech skupinách uIRI ve srovnání s kontrolní skupinou (p < 0 0,05), což naznačuje, že myofibroblasty byly výrazně více v ledvinách všech zraněných myši. Exprese a-SMA byla vyšší se zpožděním kontralaterální resekce ledviny (p < 0,05) (obr. 4(F,I)). Tyto výsledky ukázaly, že myofibroblasty v ledvinové tkáni UIRI se významně změnily během 3 dnů mezi UIRI a kontralaterální nefrektomií a že myofibroblasty postupně přibývaly s delšími intervaly.
Protokol 2: Účinky teplot jádra během ischemie na přechod AKI-CKD
Míra přežití klesala se zvýšením tělesné teploty během ischemie
Jak bylo zmíněno v experimentu 2, za účelem prozkoumání vlivu teplot jádra během ischémie na přechod AKI-CKD bylo trvání ischemie fixováno na 24 minut a kontralaterální intaktní ledvina byla odstraněna 14 dní po uIRI. Data ukázala, že ve skupině 36 C (teplota těla myší během ischemie byla kontrolována na 36 C) jedna myš zemřela první den po kontralaterální nefrektomii a míra přežití byla 87,5 %. Ve skupině 36,5 C zemřely dvě myši během prvních 2 dnů po kontralaterální nefrektomii se 75% mírou přežití. Ve srovnání se skupinou 36,5 C uhynula o jednu myš více druhý den po kontralaterální nefrektomii s mírou přežití 62,5 % ve skupině 37 C. Ve skupině 37,5 C, s výjimkou tří myší, které zemřely během prvních 2 dnů po kontralaterální nefrektomii, jedna myš zemřela 3 dny po kontralaterální nefrektomii s mírou přežití 50 %. Kromě toho, co se stalo ve skupině 37,5 C, jedna myš zemřela 5 dní po kontralaterální nefrektomii ve skupině 38 C a míra přežití byla 37,5 %. Tyto výsledky ukázaly, že míra přežití myší se postupně snižovala se zvýšením tělesné teploty během ischemie (obrázek 5(A)).
Funkce ledvin klesala se zvýšením tělesné teploty během ischemie
Ve srovnání s falešnou skupinou vedlo uIRI k významnému nárůstu SCr a BUN ve všech skupinách uIRI (p < {{0}}.05), což naznačuje, že se všechny myši ve skupinách uIRI vyvinuly poškození ledvin po kontralaterální nefrektomii. Srovnání mezi dvěma skupinami se sousedními teplotami ukázalo, že SCr a BUN u myší se zvýšily se zvýšením ischemické tělesné teploty o 0,5 C, ale nebyl zjištěn žádný statistický rozdíl (p > 0,05) , což naznačuje, že došlo k méně výrazným změnám ve funkci ledvin s rozdílem teploty jádra o 0,5 C během ischemie. SCr a BUN se však významně zvýšily, když se tělesná teplota během ischémie zvýšila o 1 C nebo více (p < 0,05), což naznačuje, že funkce ledvin se významně změnila s rozdílem tělesné teploty o 1 C během ischémie. Funkce ledvin klesala výrazněji se zvyšující se ischemickou tělesnou teplotou (obrázek 5(B,C)).
Poškození ledvinové tkáně se zhoršilo se zvýšenou tělesnou teplotou během ischemie
Podle barvení HE byla struktura ledvinové tkáně myší ve skupině se simulací normální. U všech skupin uživatelů byly pozorovány patologické změny vyvolané IRI, jako jsou různé stupně vakuolární degenerace tubulárních epiteliálních buněk, odchlípení kartáčkového lemu, fokální disintegrační nekróza, dilatace části tubulárního lumenu a edém tubulárních epiteliálních buněk ledvin s proměnlivou morfologií. jako vrásčité a sklerotické glomeruly, hyperplazie mezangiálních buněk a dilatované Bowmanovo pouzdro, zánětlivá buněčná infiltrace v intersticiální ledvině (obrázek 6(A)).
Skóre patologického poškození ledvinových tubulů a glomerulů ukázalo, že ve srovnání s kontrolní skupinou bylo patologické poškození ledviny ve všech skupinách uIRI významně závažnější (p < {{0}}).05 ), což naznačuje, že zjevné patologické poškození ledvin se objevilo ve všech skupinách uIRI a že model AKI-CKD byl úspěšně vyvinut. Srovnání mezi dvěma skupinami se sousedními teplotami ukázalo, že došlo ke zvýšení skóre patologického poškození ledvin se zvýšením tělesné teploty o 0,5 C během ischemie, ale nemělo žádnou statistickou významnost (p > 0,05), zatímco ledviny patologické poškození významně vzrostlo se zvýšením tělesné teploty o 1 C a více během ischemie (p < 0,05) (obrázek 6 (B, C)). Tyto výsledky ukázaly, že histopatologické poškození ledviny se významně měnilo s 1 C rozdílem tělesné teploty během ischemie a postupně se zvyšovalo se zvýšenou teplotou těla během ischémie.
Fibróza ledvin se zhoršuje se zvýšením tělesné teploty během ischemie Hmotnost ledvin.
Ve srovnání s falešnou skupinou způsobila uIRI významný pokles hmotnosti ledvin ve všech skupinách uIRI a u myší s různými ischemickými tělesnými teplotami se vyvinuly různé stupně fibrózy ledvin. Srovnání mezi dvěma skupinami se sousedními teplotami ukázalo, že pokles hmotnosti ledvin neměl žádný významný rozdíl, když se tělesná teplota zvýšila o {{0}},5 C během ischémie (p > 0.{{{{101} 7}}5), což naznačuje, že rozdíl 0,5 C v tělesné teplotě během ischemie neměl žádný významný vliv na změnu hmotnosti ledvin. Když měla tělesná teplota během ischemického období rozdíl 1 C, hmotnost ledviny se významně změnila (p < 0,05) a postupně se snižovala, jak se ischemická tělesná teplota zvyšovala (obrázek 7(A)).
Obrázek 7. Účinky teplot jádra během ischemie na fibrózu ledvin u myší s uIRI a opožděnou kontralaterální nephrektomií. Levá ledvina byla podrobena IRI dne 0 a resekce pravé ledviny byla provedena při různých tělesných teplotách (36 C, 36,5 C, 37 C, 37,5 C a 38 C) s ischemickým časem levé ledvina fixována po 24 minutách a pravá ledvina byla odstraněna 14 dní po IRI levé ledviny. Fibróza ledvin byla hodnocena hmotností ledvin, Massonovým trichromem a expresí fibronektinu (FN), kolagenu I (COL-I) a a-aktinu hladkého svalstva (a-SMA). (A): Hmotnost ledvin k tělesné hmotnosti. (B): Reprezentativní Massonovo trichromové barvení poraněné ledviny, které vykazovalo typické fibrotické změny (%) (zvětšení, 200 ). (C): Semikvantifikace fibrotické oblasti detekované Massonovým trichromem. (D): Kvantitativní RT-PCR analýzy pro expresi FN v ledvinách. (E): Kvantitativní RT-PCR analýzy pro expresi COL-I v ledvinách. (F): Reprezentativní obrázky Western blot pro FN, COL-I a a-SMA. (G): Sloupcový graf ukazující expresi FN proteinu normalizovanou b-aktinem. (H): Sloupcový graf ukazující expresi proteinu COL-I normalizovanou b-aktinem. (I): Sloupcový graf ukazující expresi proteinu a-SMA normalizovanou b-aktinem. n ¼ 3–7/skupina. p < 0,05. NS: nevýznamné.
Massonova trichromová skvrna.
8 týdnů po uIRI výsledky Massonova trichromového barvení ukázaly, že ve srovnání s kontrolní skupinou byla fibrotická oblast ledvinových tkání ve všech skupinách uIRI významně zvýšena (p < 0.05), což naznačuje, že fibrotický výsledek se objevil ve všech skupinách uIRI. Srovnání mezi dvěma skupinami se sousedními teplotami ukázalo, že plocha fibrózy ledvin se zvětšila, ale bez statistické významnosti, když se tělesná teplota zvýšila o 0,5 °C během ischémie (p > 0.{{10} }5), což naznačuje, že rozdíl 0,5 C v tělesné teplotě během ischemie neměl žádný významný vliv na fibrózu ledvin. S každým zvýšením tělesné teploty o 1 °C během ischemie se plocha intersticiální fibrózy ledvin významně zvýšila (p < 0,05), což naznačuje, že zvýšení tělesné teploty o 1 °C během ischémie mělo významný dopad na intersticiální fibrózu ledvin a fibrózu ledvin se postupně zhoršovalo se zvýšením tělesné teploty během ischemie (obrázek 7(B,C)).
ECM v tkáni ledvin. Data ukázala, že ve srovnání se simulovanou skupinou byly exprese FN a COL-I v ledvinových tkáních všech skupin uIRI významně zvýšeny (p < 0.05), což bylo v souladu s výsledky Massonova barvení. Srovnání mezi dvěma skupinami se sousedními teplotami ukázalo, že exprese FN a COL-I v tkáních ledvin se zvýšily o 0,5 C zvýšení tělesné teploty během ischemie, ale nebyl zjištěn žádný statisticky významný rozdíl (p > {{8 }}.05), což naznačuje, že rozdíl 0,5 C v tělesné teplotě během ischémie neměl významný vliv na ukládání ECM, zatímco exprese FN a COL-I se významně zvýšila se zvýšením o 1 C tělesná teplota během ischemie (p < 0,05) a měli výraznější nárůst se zvyšující se tělesnou teplotou. Závěrem lze říci, že ukládání ECM nebo fibrotický výsledek v tkáních ledvin se zvyšoval s vyšší tělesnou teplotou během ischémie (obrázek 7(D–H)).
Myofibroblasty v ledvinové tkáni.
Ve srovnání se simulovanou skupinou byly exprese a-SMA v tkáni ledvin všech skupin uIRI významně zvýšeny (p < 0.05), což naznačuje, že myofibroblasty byly významně zvýšeny ve všech skupinách uIRI . Srovnání mezi dvěma skupinami se sousedními teplotami ukázalo, že exprese a-SMA v ledvinách se zvýšila, když se tělesná teplota zvýšila o 0,5 C během ischemie, ale nebyl zjištěn žádný významný rozdíl (p > 0 .05), což naznačuje, že rozdíl 0,5 C v ischemické tělesné teplotě neměl žádný významný vliv na změny ledvinových myofibroblastů. Kromě toho se exprese a-SMA v tkáních ledvin významně zvýšila se zvýšením ischemické tělesné teploty o 1 C a zvýšení exprese a-SMA bylo významnější se zvýšením tělesné teploty (p < 0,05), což naznačuje, že myofibroblasty se významně změnily, když rozdíl tělesné teploty při ischemii byl 1 C a více. Spolu se zvýšením tělesné teploty během ischemie se postupně zvýšily myofibroblasty v ledvinových tkáních (obrázek 7(F,I)).
Protokol 3: Účinky trvání ischemie na přechod AKI-CKD
Míra přežití se snižovala s prodlužujícím se trváním ischemie Jak bylo uvedeno v experimentu 3, za účelem prozkoumání účinku trvání ischemie na přechod AKI-CKD byla ischemická tělesná teplota fixována na 37 C během uIRI a kontralaterální ledvina byla odstraněna 14 dní po uIRI. Výsledky ukázaly, že ve skupině po 21 minutách (trvání ischemie bylo 21 minut) jedna myš zemřela 1 den a 2 dny po odstranění kontralaterální ledviny, s mírou přežití 75 %, a jedna myš zemřela 2 dny po kontralaterální nefrektomii. ve skupině po 24 minutách s mírou přežití 62,5 %. V 27-minutové skupině zemřely čtyři myši, dvě myši, jedna myš a jedna myš 1 den, 3 dny, 5 dní a 7 dní po kontralaterální nefrektomii a míra přežití byla {{ 18} %. Podobně zemřelo pět myší, dvě myši a jedna myš 1 den, 2 dny a 3 dny po kontralaterální nefrektomii ve skupině 30-minut a míra přežití byla 0%. To ukazuje, že míra přežití se snižovala s prodlužujícím se trváním ischemie, protože všechny myši ve 27minutové skupině a 30-minutové skupině zemřely 7 dní a 3 dny po kontralaterální nefrektomii (obrázek 8(A)).
Funkce ledvin se snížila s delším trváním ischemie
Data ukázala, že ve srovnání s falešnou skupinou, jak 21minutová, tak 24minutová skupina vykazovala významné zvýšení SCr a BUN (p < 0.05), což ukazuje na pokles funkce ledvin. Ve srovnání se skupinou po 21 minutách vykazovala skupina po 24 minutách výraznější zvýšení SCr a BUN (p < 0,05), což naznačovalo, že funkce ledvin se významně změnila s 3minutovým rozdílem v trvání ischemie a zřetelnějším poklesem funkce ledvin bylo možné pozorovat při delším trvání ischemie (obrázek 8(B,C)).
Obrázek 8. Účinky trvání ischemie na míru přežití a funkci ledvin u myší s uIRI a opožděnou kontralaterální nefrektomií. Levá ledvina byla podrobena IRI v den 0 a resekce pravé ledviny byla provedena po různé době trvání ischemie (21 min, 24 min, 27 min a 30 min) s pevnou tělesnou teplotou při 37 C během ischemie ledvin a pravá ledvina byla odstraněna 14 dní po IRI levé ledviny. (A): Přežití myší v každé skupině bylo hodnoceno a prezentováno jako procento. (B a C): Funkce ledvin byla odhadnuta pomocí sérového kreatininu (SCr) a dusíku močoviny v krvi (BUN). n ¼ 5–6/ skupina. p < 0,05.
Histopatologické poškození ledvin se zhoršovalo s delším trváním ischemie
Podle barvení HE byla struktura ledvinové tkáně myší ve skupině se simulací normální. Ve srovnání s falešnou skupinou měly 21minutové a 24minutové skupiny patologické změny různého stupně, včetně vakuolární degenerace tubulárních epiteliálních buněk, odchlípení kartáčového lemu, fokální dezintegrační nekrózy, dilatace části tubulárního lumenu, edému tubulárních epiteliálních buněk ledvin s různou morfologií , vrásčité a sklerotické glomeruly, hyperplazie mesangiálních buněk a dilatované Bowmanovo pouzdro a infiltrace zánětlivých buněk v intersticiálním prostoru (obrázek 9(A)). Skóre patologického poškození ledvinových tubulů a glomerulů bylo signifikantně vyšší ve skupinách po 21 i 24 minutách ve srovnání s kontrolní skupinou (p < 0.05), což naznačuje, že se významné patologické poškození ledvin vyvinulo v roce obě skupiny uživatelů. Kromě toho skupina 24 minut měla vyšší skóre patologického poškození ledvin a závažnější patologické poškození ve srovnání se skupinou 21 minut (p < 0,05) (obrázek 9 (B, C)), což naznačuje, že patologické poškození ledvin mělo významné změny s 3 min rozdíl v trvání ischemie. Čím delší je trvání ischémie, tím závažnější je patologické poškození ledviny
Fibróza ledvin se zhoršila s delším trváním ischemie Hmotnost ledvin.
Ve srovnání s falešnou skupinou vykázaly jak 21minutové, tak 24minutové skupiny významné snížení hmotnosti ledvin (p < 0.05) a 24minutová skupina měla výraznější pokles hmotnosti ledvin ve srovnání se skupinou po 21 minutách (p < 0,05). Ty naznačovaly, že 3-minutový rozdíl v trvání ischemie vedl k významné změně hmotnosti ledvin a při delší době trvání ischemie lze pozorovat zřetelnější snížení hmotnosti ledvin (obrázek 10(A)).
Massonova trichromová skvrna. Massonovo trichromové barvení a semikvantifikace analýzy fibrotické oblasti ukázaly, že ve skupině s falešnou léčbou nedošlo k žádné významné intersticiální fibrotické změně, zatímco různé stupně fibrotických změn byly pozorovány v intersticiální ledvině jak ve skupinách po 21 minutách, tak ve 24 minutách (p < { {3}}.05). Ve srovnání se skupinou po 21 minutách měla skupina po 24 minutách vyšší fibrotický stupeň ledvinové tkáně (p < 0,05), což naznačuje, že fibróza ledvin se významně změnila s 3minutovým rozdílem v trvání ischemie a že závažnější fibróza ledvin by se stala s delší ischemickou chorobou. trvání (obrázek 10(B,C)).
ECM v tkáni ledvin. Analýza Western blot a RT-PCR ukázala, že ve srovnání s kontrolní skupinou se exprese FN a COL-I významně zvýšily jak ve skupinách po 21 minutách, tak po 24 minutách (p < 0.05) , což ukazuje, že IRI-indukovaná ECM se významně zvýšila ve skupinách uIRI a ledvina podstoupila významnou fibrotickou progresi. Ve srovnání se skupinou po 21 minutách byly exprese FN a COL-I výraznější v tkáni ledvin ve skupině po 24 minutách (p < 0,05), což naznačuje, že ukládání ECM v tkáních ledvin se významně změnilo s rozdílem 3 minut v trvání ischemie a ukládání ECM se zvyšovalo s prodlouženou dobou trvání ischemie (obrázek 10(D–H)).
Myofibroblasty v ledvinové tkáni. Analýza Western blot ukázala, že ve srovnání s kontrolní skupinou se exprese a-SMA v ledvinách ve skupinách po 21 a 24 minutách významně zvýšila (p < 0.05), což naznačuje, že myofibroblasty měli signifikantní zvýšení ledvin ve skupinách uIRI a došlo k významné fibrotické progresi. Exprese a-SMA se významně zvýšila s 3minutovým zvýšením trvání ischemie (p < 0,05) a bylo nalezeno více myofibroblastů s prodlouženým trváním ischemie (obrázek 10(F,I)).
Obrázek 9. Účinky trvání ischemie na histologické poškození ledvin u myší s uIRI a opožděnou kontralaterální nefrektomií. Levá ledvina byla podrobena IRI v den 0 a resekce pravé ledviny byla provedena po různé době trvání ischemie (21 min, 24 min, 27 min a 30 min) s pevnou tělesnou teplotou při 37 C během ischemie ledvin a pravá ledvina byla odstraněna 14 dní po IRI levé ledviny. Histologické poškození ledvin bylo stanoveno barvením hematoxylinem-eosinem (HE). (A): Reprezentativní HE barvení poraněné ledviny, které vykazovalo typické histopatologické rysy post-AKI patologických změn, včetně různých stupňů vakuolární degenerace tubulárních epiteliálních buněk, odchlípení kartáčového lemu, fokální dezintegrační nekrózy, dilatace některých tubulárních lumen (# ), edém tubulárních epiteliálních buněk ledvin s variabilní morfologií a infiltrace zánětlivých buněk (%). Některé glomeruly byly vrásčité a sklerotické, s hyperplazií mesangiálních buněk (&) a dilatovaným Bowmanovým pouzdrem (zvětšení, 400 um). (B): Semikvantifikace tubulointersticiálního poškození. (C): Semikvantifikace glomerulárního poškození. n ¼ 5–6/skupina. p < 0,05.
Supporting Service Of Wecistanche-Největší vývozce cistanche v Číně:
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel:+86 15292862950
Nakupujte pro další specifikace Podrobnosti:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
