Účinky extraktu Cistanche Deserticola na erektilní odpověď penisu u kastrovaných potkanů

Li Gu, Wen Ting Xiong, Yan Lei Zhuang, Jian Shuang Zhang a Xin Liu*

Výzkumné centrum potravinářského a zdravotnického inženýrství státního ministerstva školství, Sun Yat-sen University, Guangzhou, Čína

Abstraktní

Cistanche deserticola (CD) je po tisíce let považována za posilující činidlo na reprodukční funkci. V této studii byly zkoumány účinky CD extraktu na erektilní odpověď penisu. Po kastraci byly krysy léčeny intragastricky CD extraktem ({{0}} 0,45, 0,90 a 1,8 g/kg) denně po dobu čtyř týdnů. Byla měřena erektilní odpověď penisu a na konci experimentu byly testovány sérové ​​hormony. Bylo vyhodnoceno, že erektilní latence se prodloužila a doba erekce významně zkrátila u kastrovaných potkanů ​​ve srovnání s falešně operovanými kontrolami. CD extrakt však zkrátil erektilní latenci a prodloužil dobu erekce, aby se minimalizovaly negativní účinky kastrace. V dávce 0,9 g/kg CD extrakt reguloval koncentraci luteinizačního hormonu v séru přibližující se normální úrovni u kastrovaných potkanů. Tato zjištění naznačují, že CD usnadňuje erektilní odpověď penisu a do určité míry moduluje hladinu sérových hormonů.

Click cistanche tonikum produkty

ÚVOD

Cistanche Hoffmg. Et Link, jeden z rodů čeledi Orobanchaceae, je rozšířen hlavně ve vyprahlých zemích a pouštích na severní polokouli, jako je Vnitřní Mongolsko, Sin-ťiang a autonomní oblasti Ningxia v Číně, Íránu, Indii, Mongolsku atd. Cistanche druhy patří k vytrvalým parazitickým bylinám, které se běžně uchycují ke kořenům rostlin fixujících písek, jako je Haloxylox ammo dendron, H. persicum, Kalidium foliated a Tamarix atd. (Jiang a Tu 2009).

Herba Cistanche, stonek druhu Cistanche, byl považován za vynikající tonikum a vysloužil si čest "Ženšen pouští". Mezi druhy Cistanche byl jako primární zdrojový materiál Cistanche označen Cistanche deserticola YC MA (Stefanova et al. 2011). V důsledku nadměrné sklizně v posledních letech jsou však přírodní zdroje divoké C. deserticola (CD) nedostatečné, která byla sbírána jako jedna z rostlin třídy II vyžadující ochranu v Číně, takže jiné druhy tohoto rodu, jako např. C. salsa a C. sinensis se v některých oblastech používají také jako náhražky. Od prvního zaznamenaného v Shen Nong's Chinese Material Medica (starověkém farmakologickém kompendiu) se CD považovalo za tonizaci ledvin a povzbuzení "Yang" v klinické praxi podle teorie tradiční čínské medicíny, která je údajně účinná pro reprodukci, vývoj, a funkce plodnosti. Mezitím se CD také vařilo se skopovým masem, bramborem nebo rýží, aby se vyrobilo tonikum k léčbě poškození způsobeného přepětím po stovky let, což naznačuje, že je bezpečné ho užívat perorálně (Xiong et al. 2013). Tato neoficiální použití však existují hlavně v čínských prvotiskách, s omezenými vědeckými informacemi diskutovanými z hlediska moderních farmakologických konceptů.

Erektilní dysfunkce (ED) je stav charakterizovaný buď neadekvátní erekcí penisu nebo erekcí, která u dospělých mužů netrvá dostatečně dlouho (Cohan a Korenman 2000). V reakci na moderní, sofistikované chemické látky se znovu objevil zájem o hledání účinných a bezpečných léků z rostlin pro léčbu ED (Adimoelja 2000). Předchozí studie (Liu et al. 2009) naznačila, že elektální erekce CD u normálních potkanů ​​zrychlila erekci penisu, avšak nebyly k dispozici žádné údaje o účinku CD na erektilní dysfunkci.

U zvířat byla chirurgická kastrace s bilaterální orchiektomií považována za standard kastrace pro vyšetřování ED (Tombal 2005). Proto byla tato studie provedena za účelem vyhodnocení potenciálních účinků CD proti ED zkoumáním erektilní latence a trvání u kastrovaných potkanů.

MATERIÁLY A METODY

Chemikálie a materiály

Echinacoside (purity >98%) and acteoside (purity >98 procent) byly zakoupeny od Národního institutu pro kontrolu potravin a léčiv (Peking, Čína). Methanol čistoty pro HPLC byl zakoupen od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Čištěná voda byla vyrobena pomocí systému Millipore Milli-Q Integral 3 System a Q-POD Milli-Q System (Bedford, MA, USA). Stonky C. deserticola byly zakoupeny od Shenzhen GURU Biology Co., Ltd (Guangdong, Čína) a rozemlety na jemný prášek pomocí drtiče, který prošel sítem 60 mesh.

HPLC analýza a příprava rostlinného materiálu

Obsah echinakosidu a akteosidu v prášku CD byl stanoven podle naší předchozí metody (Zhao et al. 2011). Poté bylo každých 100 g sušeného prášku vařeno v 1,5

l vody po dobu 1,5 hodiny. Po ochlazení na teplotu místnosti byla směsná kapalina odstřeďována při 2000 otáčkách za minutu po dobu 10 minut (Eppendorf 5810R, Německo) a sraženina byla dvakrát reextrahována za stejných podmínek. Spojené supernatanty byly zahuštěny na vakuové rotační odparce (Heidolph laborota 4001-účinný, Německo) při 60 stupních a poté lyofilizovány a poskytly asi 42 procent sušeného extraktového prášku. Při provádění následného pokusu na zvířatech byl vysušený extrakt rozpuštěn v čištěné vodě při pokojové teplotě.

Pokusná zvířata

Dospělí samci potkanů ​​Sprague-Dawley (200-220g) byli získáni z Medicine Experimental Animal Center of Guangdong Province (Guangzhou, PR Čína), chováni v ubikacích s řízenou teplotou s 12-hodinovými cykly světlo/tma při pokojová teplota (22-24 stupňů) a konstantní vlhkost (40-70 procent) v laboratoři SPF (bez specifických patogenů) a krmené ad libitum. Experimentální postupy byly v souladu s National Institute of Health Guide for Care and Use of Laboratory Animals.

experimentální procedura

Jeden týden před podáním bylo padesát samců potkanů ​​SD anestetizováno pentobarbitalem sodným intraperitoneálně (40 mg/kg) (Jung et al. 1999) a náhodně rozděleno do pěti skupin: kromě potkanů ​​ve skupině s falešnou operací (Sham ), zbytek byl bilaterálně kastrován skrotálním přístupem (Anderes 2003, Schlatt et al. 2002). Mezitím bylo skupinám léčeným CD podáváno intragastricky 0,45 g/kg (nízká dávka CD extraktu, LCD plus Cas), 0,9 g/kg (střední dávka CD extraktu, MCD plus Cas) a 1,8 g/kg (vysoká dávka CD extrakt, HCD plus Cas) CD extrakt, v tomto pořadí, zatímco simulovaným a kastrovaným skupinám bylo podáváno pouze odpovídající množství vody. Měření tělesné hmotnosti bylo prováděno na začátku procedury a poté každý týden. Všechny krysy byly ihned po smrti podrobeny laparotomii pro odstranění a zadní zvážení následujících orgánů: předkožkové žlázy, semenný váček, prostata a sval levator ani.

Měření erektilní odezvy penisu

Erektilní funkce potkanů ​​v každé skupině byla hodnocena podle předchozích metod (Ji et al. 2009, Luo et al. 2006). Stručně řečeno, bipolární elektroda z nerezové oceli (BL420F Data Acquisition & Analysis System, Tme Technology Co., Ltd, Chengdu, PR Čína) byla opatrně umístěna na penis, dokud nebyl vztyčen pulzem elektrické stimulace (5 V) 0,2 s. Doba od stimulace k erekci byla zaznamenána jako latence erekce penisu. Když byla pozorována erektilní odezva penisu, mohla být elektroda vytažena z penisu a doba, po kterou penis udržoval erekci, byla zaznamenána jako doba erekce.

Odběr krve a analýza sérových hormonů

Krysy byly anestetizovány pentobarbitalem sodným intraperitoneálně (40mg/kg) (Jung et al. 1999). Vzorky krve byly odebírány a sráženy při 4 stupních po dobu 4 hodin, z nichž bylo sérum odebráno centrifugací při 4000 ot./min po dobu 5 minut při 4 stupních (Eppendorf 5810 R, Německo) a okamžitě skladováno při -20 stupních mrazáku do další analýzy . Celkové hladiny LH a FSH byly měřeny za použití komerčních souprav pro radioimunoanalýzu (RIA) (Beijing North Institute of Biological Technology, Peking, Čína) podle pokynů výrobce (Matsumoto et al. 1986). Na základě kompetitivní radioaktivní imunitní techniky byl v testu použit I125-značený LH (nebo FSH). Stručně, 100 ul I125-značeného LH (nebo FSH) činidla bylo přidáno do 100 ul vzorku séra a inkubováno se 100 ul purifikované králičí protilátky při 4 stupních (nebo 37 stupních) přes noc. Poté bylo do komplexu antigen-protilátka přidáno oslí anti-králičí imunitní separační činidlo a centrifugováno (3500 ot./min, 15 minut), aby se oddělil volný a na protilátku navázaný125I-LH (nebo FSH). Poté byla radioaktivita sraženiny měřena na počítači radioimunního testu (DMF-96, Zhongcheng electric technology development Co., Ltd., Hefei, Čína). Limity citlivosti testu LH a FSH byly oba 1,0 mIU/ml.

STATISTICKÁ ANALÝZA

Analýza dat byla provedena pomocí softwaru SPSS verze 16.0. Hodnoty byly vyjádřeny jako průměr ± standardní odchylka (SD). Parametrická data byla analyzována pomocí analýzy jednocestné analýzy rozptylu (ANOVA) následované post hoc LSD testy. Neparametrická data byla analyzována Kruskal-Wallisovým testem. Rozdíly byly považovány za statisticky významné, pokud byla pravděpodobnost odchylky menší než 0,05.

VÝSLEDEK

Kvantitativní stanovení obsahu echinakosidu a akteosidu v CD prášku

Obsah echinakosidu a akteosidu v CD prášku byl 1,27±0.01 procento a 0,52±0,003 procenta, což odpovídalo požadavku čínského lékopisu. HPLC chromatogram CD prášku je znázorněn na Obr. 1.

Obr. 1

HPLC chromatografický profil prášku Cistanche deserticola. Vrchol 1, echinakosid; Vrchol 2, akteosid. osa X, retenční čas; Osa Y, jednotka absorbance. Podmínky HPLC: systém Waters HPLC (binární HPLC pumpa 1525, detektor indexu lomu 2414, detektor fotodiodového pole 2996); stacionární fáze: Symmetry C18 (4,6 mm × 25 {{10}} mm, 5 µm, Waters, Milford, MA, USA); mobilní fáze: 0,5% (V/V) vodný roztok kyseliny octové (A) a methanol (B) složka (0 min, A: B=25:75; 10- 30 min, A: B{{16 }}: 60; 30 min, A: B=0: 100); průtok: 1 ml/min; detektivní vlnová délka: 330 nm; teplota: 30.

Obr.2

Latence a trvání erekce penisu u kastrovaných potkanů. Data jsou vyjádřena jako průměr ± SD (n=10). ##p<0.01 relative to sham-operated group, **p<0.01 relative to castrated group. Abbreviation (below): Sham, sham-operated group; Cas, castration control group; LCD +Cas (0.45g/kg), MCD +Cas (0.9g/kg) and HCD +Cas (1.8g/kg), three groups of CD extract treated in castrated rats

Obr.3

Účinky CD extraktu na sérové ​​koncentrace LH u kastrovaných potkanů. Data jsou vyjádřena jako průměr ± SD (n=10). # p<0.05 relative to sham-operated group, * p<0.05 relative to castrated group.

Tělesné hmotnosti a relativní hmotnost pomocných orgánů

Jak je uvedeno v tabulce 1, všechny krysy měly podobnou počáteční tělesnou hmotnost se zvýšením ode dne 1 do dne 28. Průměrné hodnoty v kastrované skupině se však zvýšily z 216,8±9,2 g na 251,4±12,7, 283,3±15,1, 306,8±15,4 a 322,2 ± 18,4 g, čímž přibývá na váze ve srovnání s falešně provozovanými protějšky (str.<0.05). There were no statistical differences between the sham group and CD treated group.

Obr.4

Účinky CD extraktu na sérové ​​koncentrace FSH u kastrovaných potkanů. Data jsou vyjádřena jako průměr ±SD (n=10).

Hladiny hormonů v séru

Analyzována testem RIA byla průměrná sérová koncentrace LH u kastrovaných potkanů ​​2,50±0,34 mIU/ml, což ukazuje zvýšení ve srovnání s falešně operovanou kontrolou (p<0.05). However, the value descended about 49.2% in the MCD +Cas group relative to that in castrated control (p<0.05) (fig. 3). Shown in fig. 4, no statistical differences were observed among all groups on FSH concentration.

DISKUSE

Naše výsledky ukázaly, že kastrace významně prodloužila erektilní latenci penisu a zkrátila dobu erekce s pozoruhodnou atrofií přídatných orgánů. CD extrakt však usnadnil erektilní odpověď penisu a do určité míry moduloval hladinu LH v séru u kastrovaných potkanů.

Spontánní erekce je stimulována a udržována hlavně androgeny prostřednictvím buněčných, molekulárních a fyziologických mechanismů, včetně relaxace kavernózního hladkého svalstva (Traish et al. 2007, Talha et al. 2007) . Nedostatečná hladina testosteronu vede ke snížení jeho relaxace (McClure 1988), což má za následek impotenci u mužů (Bivalacqua et al. 2000). Zejména u potkanů ​​je udržována širokým rozsahem systémových koncentrací testosteronu jako 10-12 procenta, pod nimiž je erektilní odpověď oslabena v závislosti na dávce (Armagan et al. 2006). V této studii byla koncentrace testosteronu v oběhu příliš nízká na to, aby splnila limit citlivosti (0,02 ng/ml) u všech kastrovaných potkanů ​​(data nebyla uvedena ve výsledcích). CD extrakt však významně zkrátil erektilní latenci penisu při třech dávkách a prodloužil dobu erekce při 0,90 g/kg a 1,8 g/kg. Byl to pravděpodobně důsledek androgenního efektu CD zmíněného v některých předchozích studiích (He et al. 1996a, He et al. 1996b).

Některé přídatné orgány, jako je prostata a semenný váček, jsou androgen-dependentní, takže změny hmotnosti mohou odrážet změny endokrinního stavu (Trisomboon et al. 2007, Jang et al. 2011). Existovala prahová hladina testosteronu, pod kterou byl metabolismus těchto orgánů inhibován (Trachtenberg 1985). V naší studii bylo potvrzeno, že kastrace způsobila snížení hmotnosti přídatných reprodukčních orgánů v důsledku nedostatku testosteronu.

Testosteron je primárně vylučován Leydigovými buňkami varlat a regulován hypofyzickými hormony, jako je luteinizační hormon (LH) a folikuly stimulující hormon (FSH), které hrají důležitou roli při udržování funkce penisu kastrovaných zvířat (Robert et al. 2{ {6}}04). Vzhledem k tomu, že osa hypotalamus-hypofýza-gonáda (HPG) je regulačním mechanismem zpětné vazby s uzavřenou smyčkou, nízké hladiny gonadálních hormonů mohou regulovat sekreci LH a FSH (Morales et al. 2004). Naše studie zjistila, že hladina LH v séru byla významně zvýšena u kastrovaných potkanů ​​a poté klesla na normální hladiny CD extraktem v dávce 0,90 g/kg, což souhlasilo s předchozím závěrem, že zvýšená hladina LH byla spojena s vyšším rizikem erektilní dysfunkce. (Kupelian et al. 2006). Ve varlatech stimuluje LH syntézu a uvolňování testosteronu, jehož zpětná vazba je relativně konzistentní, zatímco FSH přímo působí na Sertoliho buňky pro výživu pomocí zpětnovazebního kontrolního komplexu (Hellqvist et al. 2008). Tato zjištění poskytla větší podporu pro domněnku, že CD exprimuje účinek podobný androgenům, který může být hlavně odpovědný za snížení sérového LH více než FSH.

V současném pozorování byl vliv kastrace na vývoj tělesné hmotnosti u samců potkanů ​​podobný zjištěním v předchozí studii (Christoffersen et al. 2006), na rozdíl od výsledků u samic potkanů ​​(Pantaleão et al. 2010). CD extrakt nedokázal výrazně zlepšit tělesnou hmotnost, což bylo pravděpodobně způsobeno nedostatečnou délkou léčby nebo komplexními dopady na celkový zdravotní stav.

Závěrem lze říci, že kastrace prodloužila erektilní latenci penisu a významně zkrátila dobu trvání, se zvýšením sérového LH a atrofií přídatných pohlavních orgánů.

CD extrakt však usnadnil erektilní odpověď penisu zkrácením erektilní latence a prodloužením doby erekce u kastrovaných potkanů. Tyto účinky byly pravděpodobně způsobeny účinkem podobným androgenům, což bylo podpořeno pozorováním, že CD extrakt normalizoval sérové ​​koncentrace LH, zejména při dávce 0,90 g/kg. K prokázání účinku CD extraktu proti ED na hypotalamické a limbické úrovni jsou však zapotřebí další důkazy a této cenné tradiční medicíně v moderním světě by bylo možné věnovat více pozornosti.

PODĚKOVÁNÍ

Tato práce byla podpořena granty z projektu Science and Technology Support by Project v Ujgurské autonomní oblasti Sin-ťiang (PR Čína) (200840102-15).

REFERENCE

Adimoelja A (2000). Fytochemikálie a průlom tradičních bylin v léčbě sexuálních dysfunkcí. Int. J. Androl., 23: 82-84.

Anderes KL (2003). Biologická charakterizace nového, perorálně aktivního antagonisty hormonu uvolňujícího gonadotropin (GnRH) s malou molekulou na kastrovaných a intaktních potkanech. J. Pharmacol. Exp. Ther., 305: 688-695.

Armagan A, Kim NN, Goldstein I a Traish AM (2006). Vztah mezi dávkou a odezvou mezi testosteronem a erektilní funkcí: Důkaz existence kritického prahu. J. Androl., 27: 517-526.

Bivalacqua TJ, šampion HC, Hellstrom WJ a Kadowitz PJ (2000). Farmakoterapie erektilní dysfunkce. Trendy. Pharmacol. Sci., 7: 524-540.

Christoffersen B, Raun K, Svendsen O, Fledelius C a Golozoubova V (2006). Hodnocení kastrovaného samce krysy Sprague-Dawley jako modelu metabolického syndromu a diabetu 2. typu. Int. J. Obes., 30: 1288- 1297.

Cohan P a Korenman SG (2000). Pokrok v erektilní dysfunkci a hormonální funkci. J. Anti-aging Med., 3: 169-175.

Feldman HA, Goldstein I, Hatzichristou DG, Krane RJ a McKinlay JB (1994). Impotence a její lékařské a psychosociální souvislosti: Výsledky studie stárnutí mužů v Massachusetts. J. Urol., 151: 54-61.

He W, Shu XF, Zong GZ, Shi ML, Xiong YL a Chen MH (1996b). Studie na posílení ledvin a Yang podporující působení Cistanche deserticola YC Ma před a po přípravě. Brada. J. Chin. Mater. Med., 9: 534-537.

He W, Zong GZ, Wu GL a Chen MH (1996a). Průzkum aktivních složek Cistanche na účinek podobný androgenům. Brada. J. Chin. Mater. Med., 9: 564-565.

Hellqvist A, Schmitz M a Borg B (2008). Účinky kastrace a androgenní léčby na expresi FSH- a LH- u lipnice se třemi trny, Gasterosteus aculeatus Rozdíly ve zpětné vazbě zprostředkovávající fotoperiodickou reakci zrání? Gen. Comp. Endocr., 158: 178-182.

Jang M, Min JW, In JG a Yang DC (2011). Účinky extraktu z červeného ženšenu na motilitu epididymálních spermií myší vystavených ethanolu. Int. J. Toxicol., 30: 435-442.

Ji DB, Ye J, Li CL, Wang YH a Zhao J (2009). Antiaging efekt extraktu Cordyceps sinensis. Phytother. Res., 23: 116-122.

Jiang Y a Tu PF (2009). Analýza chemických složek u druhů Cistanche. J. Chromatogr. A., 1216: 1970-1979.

Jung GW, Kwak JY, Kim IH, Koo MY, Park JI, Yoon S, Jung DG, Jung SI, Kwon HY a Yoon JH (1999). Úloha růstového faktoru na regeneraci nervů obsahujících oxid dusnatý (NOS) po kavernózní neurotomii u potkanů. Int. J. Impot. Res., 11: 227-235.

Kupelian V, Shabsigh R, Travison TG, Page ST, Araujo AB a McKinlay JB (2006). Existuje vztah mezi pohlavními hormony a erektilní dysfunkcí? Výsledky studie stárnutí mužů v Massachusetts. J. Urology, 176: 2584-2588.

Liu ZR, Zhang D, Wu HJ, Li YL, Chen SP a Yang YM (2009). Účinek lektvaru Cistanche na syntázu oxidu dusnatého a výživu ledvin Yang. J. Med. & Pharm. Brada. Min., 5: 33-34.

Luo Q, Li Z, Huang X, Yan J, Zhang S a Cai YZ (2006). Polysacharidy Lycium barbarum: Ochranné účinky proti tepelnému poškození varlat krys a poškození DNA v buňkách myších varlat H2O2-indukovaným a příznivý účinek na sexuální chování a reprodukční funkce polokastrovaných krys. Life Sci., 79: 613-621.

Matsumoto AM, Karpas AE a Bremner WJ (1986). Chronické podávání lidského choriového gonadotropinu u normálních mužů: důkaz, že folikuly stimulující hormon je nezbytný pro udržení kvantitativně normální spermatogeneze u člověka. J. Clin. Endocrinol. Metab.,62: 1184-1192.

McClure RD (1988). Endokrinní hodnocení a terapie erektilní dysfunkce. Urol. Clin. N. Am., 15: 53-64.

Morales A, Buvat J, Gooren LJ, Guay AT, Kaufman JM, Tan HM a Torres LO (2004). Endokrinní aspekty sexuální dysfunkce u mužů. J. Sex Med., 1: 69-81.

Pantaleão TU, Mousovich F, Rosenthal D, Padrón ÁS, Carvalho DP a Costa VMCd (2010). Vliv hladin sérového estradiolu a leptinu na funkci štítné žlázy, příjem potravy a přírůstek tělesné hmotnosti u samic potkanů ​​Wistar. Steroidy,75: 638-642. Robert WH a Robert EB (2004). Hormonální regulace spermatogeneze. Int. J. Androl., 27: 335-342.

Schlatt S, Kim SS a Gosden R (2002). Spermatogeneze a steroidogeneze v tkáni varlat myší, křečků a opic po kryokonzervaci a heterotopickém roubování kastrovaným hostitelům. Reprodukce, 124: 339-346.

Stefanova NA, Fursova AZ, Sarsenbaev KN a Kolosova NG (2011). Účinky Cistanche deserticola na chování a známky katarakty a retinopatie u potkanů ​​OXYS s akcelerací stárnutí. J. Ethnopharmacol., 138: 624-632.

Talha M, Bilal G, Gökhan T, Arı Z a Coşkun B (2007). Vztah hladin pohlavních hormonů a erektilní dysfunkce: Které testy by se měly provádět běžně? Yonsei. Med. J., 48:1015

Tombal B (2005). Vhodná kastrace s agonisty hormonu uvolňujícího luteinizační hormon (LHRH): Jaká je optimální hladina testosteronu? Eur. Urol. Suppl., 4: 14-19.

Trachtenberg J (1985). Optimální koncentrace testosteronu pro léčbu rakoviny prostaty. J. Urology, 133: 888-890

Traish AM, Goldstein I a Kim NN (2007). Testosteron a erektilní funkce: od základního výzkumu k novému klinickému paradigmatu pro léčbu mužů s androgenní insuficiencí a erektilní dysfunkcí. Eur. Urol., 52: 54-70.

Trisomboon H, Watanabe G, Wetchasit P a Taya K (2007). Účinek denní léčby thajskou bylinkou Kaempferia parviflora v Hershbergerově testu s použitím kastrovaných nedospělých potkanů. J. Reprod. Develop, 53: 351- 356.

Xiong WT, Gu L, Wang C, Sun HX a Liu X (2013). Antihyperglykemické a hypolipidemické účinky Cistanche tubulosa u diabetických db/db myší typu 2. J. Ethnopharmacol., 150: 935-945.

Zhao SY, He XY, Jia BG, Peng QY a Liu X (2011). Produkce akteosidu z Cistanche tubulosa beta-glukosidázou. Pak. J. Pharm. Sci., 24: 135-141.

For more information:1950477648nn@gmail.com