Vliv nutriční zátěže vápníkem a fosfátem na kinetiku kalciproteinových částic u dospělých s normální a poškozenou funkcí ledvin
Jul 25, 2023
Abstraktní
Plazma se blíží metastabilitě, pokud jde o obsah vápníku a fosfátu, pouze s menšími poruchami v iontové aktivitě, které jsou potřebné k udržení růstu krystalů, jakmile se vytvoří jádro. Fyziologicky jsou vápník a fosfáty přerušovaně absorbovány ze stravy každý den, přesto se plazmatické koncentrace těchto iontů postprandiálně odchylují minimálně. To implikuje existenci systému minerálních pufrů přenášených krví, který sekvestruje fosforečnany vápenaté a minimalizuje riziko usazování v měkkých tkáních. Kalciproteinové částice (CPP), endogenní minerálně-proteinové koloidy obsahující plazmatický protein fetuin-A, mohou plnit tuto funkci, ale definitivní důkazy spojující nálož minerálů v potravě s jejich tvorbou chybí. Zde ukazujeme, že CPP se tvoří jako normální fyziologická reakce na krmení u zdravých dospělých jedinců a že k tomu dochází navzdory minimální změně konvenčních minerálních markerů v séru. Dále u jedinců s chronickým onemocněním ledvin (CKD), u kterých je narušena manipulace s minerály, ukazujeme, že hladiny prekurzorů CPP nalačno i po jídle jsou výrazně zvýšené a silně nepřímo korelují s funkcí ledvin. Tato studie zdůrazňuje důležitý, ale často opomíjený příspěvek koloidní biochemie k minerální homeostáze a poskytuje nový pohled na dysregulaci metabolismu minerálů u CKD.
Kliknutím sem zakoupíte produkty Cistanche
Úvod
Vápník a fosforečnan tvoří ve vodném roztoku vysoce nerozpustné soli a zatímco metabolismus ve všech živých organismech je závislý na těchto základních živinách, jejich koexistence v biologických tekutinách vytváří přirozené riziko mineralizace a potřebu přísné regulace1. Většina extracelulárních tekutin, jako je plazma, je považována za metastabilní nebo se blíží metastabilitě, pokud jde o jejich kalciové a fosfátové iontové aktivity2, snadno udržují růst krystalů, pokud jsou tvořeny jádry. Tuto tendenci vápníku a fosfátu srážet se obratlovci využili pro jejich jedinečné biomechanické vlastnosti během evoluce kosterních a zubních tkání. To však zároveň vyžadovalo mechanismy rychlé mobilizace a účinného hromadného transportu minerálních prekurzorů, aby byly splněny požadavky na růst a opravu těchto tvrdých tkání, stejně jako strategie omezení mineralizace na tato místa a prevence nežádoucí kalcifikace v měkkých tkáních3 . Dokonce i mírné zvýšení plazmatických koncentrací vápníku a fosfátů je spojeno se zvýšeným rizikem patologické kalcifikace tepen a tkání4. Vzhledem k tomu, že nadbytek vápníku a fosfátu jsou téměř výhradně vylučovány ledvinami, je toto riziko spolu s souvisejícími kardiovaskulárními následky podstatně vyšší u pacientů s chronickým onemocněním ledvin (CKD), kde se poruchy metabolismu minerálů projeví s relativně malým poklesem glomerulární filtrace. sazba (GFR)5,6. Vzhledem k množství vápníku a fosfátu ve stravě, kterým jsou savci občasně vystaveni, by se dalo předpokládat, že riziko ektopické mineralizace je nejvyšší po jídle kvůli očekávanému nárůstu minerálních iontů absorbovaných ze střeva. Na rozdíl od tohoto očekávání se však koncentrace vápníku a fosfátu v plazmě v postprandiálním období mění minimálně a zatímco zvýšené vylučování močí pomáhá udržovat homeostázu7, tato odpověď není okamžitá a zpožďuje se o několik hodin po požití milimolárních množství vápníku a fosfátu8. Jako řešení této fyziologické výzvy se dlouho předpokládalo, že krví přenosný systém pro tlumení a transport minerálů9 a nedávná pozornost se obrátila na koloidní komplexy minerál-protein, které by mohly plnit tuto funkci a bezpečně řídit přerušovaný tok minerálů přes extracelulární kapaliny do míst použití nebo likvidace10.
V plazmě je nejúčinnějším a nejhojnějším regulátorem mineralizace proteinů glykoprotein fetuin-A11 pocházející z jater, který interaguje s nascentními koloidními komplexy minerál-protein za vzniku kalciproteinových částic (CPP)12,13. Analogicky k tomu, jak apolipoproteiny solubilizují svůj lipidový náklad pro transport, fetuinA stabilizuje špatně rozpustné fosforečnany vápenaté, brání růstu krystalů a precipitaci a zároveň usnadňuje jejich vychytávání v tkáních za účelem využití nebo clearance14–16. Neschopnost vytvořit nebo dostatečně stabilizovat CPP, jak je vidět u myší s knokautovaným fetuinem-A, má za následek jeden z nejzávažnějších známých fenotypů ektopické kalcifikace17, kdy komplexy obsahující minerály precipitují přímo v lumen mikrovaskulatury, což vede k okluzi, ischemii, nekróza a fbróza18. CPP je generován sérií uspořádaných kroků, zpočátku s vazbou spontánně vytvořených shluků vápníkových a fosfátových iontů na fetuin-A, za vzniku kalciproteinových monomerů (CPM)19, které pak slouží jako stavební bloky pro větší polymerní struktury; nejprve se sloučí za vzniku sférického primárního CPP (CPP-I) obsahujícího amorfní fosforečnan vápenatý a poté se přemění na větší a hustší elipsoidní sekundární CPP (CPP-II) obsahující krystalický hydroxyapatit12.
Kromě údajné fyziologické úlohy tvorby CPP při sekvestraci a dispergování přebytečných minerálů jsou zvýšené hladiny pozorovány také ve stavech narušeného metabolismu minerálů, včetně CKD20. V tomto prostředí byly vyšší sérové hladiny CPM a CPP spojeny se zvýšeným rizikem kardiovaskulárních příhod21–25 a mortalitou22. Předklinické studie naznačují, že CPP může přímo indukovat kalcifikaci buněk hladkého svalstva cév26,27, aktivaci buněčných zánětlivých a cytotoxických drah28,29, stejně jako vaskulární luminální a endoteliální léze30. Celkově vzato bylo navrženo, že dlouhodobé vystavení chronicky zvýšeným hladinám CPP v séru může pomoci vysvětlit souvislosti mezi nadbytkem minerálních látek ve stravě a špatnými výsledky pacientů u CKD14,31. Je zajímavé, že nedávné údaje také naznačují, že cirkulující CPM je filtrován v glomerulu29, což naznačuje, že poškození ledvin může ovlivnit metabolismus CPP prostřednictvím mnoha mechanismů.
Nedávné metodologické pokroky umožňují přímou kvantifikaci CPM32, CPP-I a CPP-II33, přičemž tyto testy se nyní používají v několika observačních a intervenčních klinických studiích24,25,34–39. Další novou doplňkovou metodou pro hodnocení tohoto systému je test T50, funkční hodnocení schopnosti séra odolávat ex vivo tvorbě CPP-II, když je vystaveno přesycení množstvím vápníku a fosfátu40. Nižší T50 je konzistentně spojován se zvýšeným rizikem vaskulární patologie a mortality u jedinců s normální funkcí ledvin41, stejně jako v různých kohortách CKD, včetně nedialyzovaných22,42,43 a také CKD závislých na dialýze44. Kromě kinetiky tvorby CPP-II lze také měřit velikost (hydrodynamický poloměr) molekul CPP-II generovaných v testu T5040,45 a může poskytnout další prognostické informace o vaskulárním riziku46,47.
Pojem dietárního původu CPP je silně podporován pozorováním, že krmení s vysokým obsahem fosfátů je spojeno se zvýšenými hladinami CPM48 a CPP33 v okolním prostředí ve studiích na zvířatech a snížením sérových CPM34 a CPP37 u hemodialyzovaných pacientů léčených intestinálními vazači fosfátů. Definitivní pozorování vlivu příjmu nutričních minerálů na akutní kinetiku CPP u lidí však chybí. Kromě toho musí být dopad CKD na postprandiální metabolismus CPP ještě zdokumentován. Abychom vyřešili tyto klíčové mezery v důkazech, provedli jsme kontrolovanou studii vlivu standardizovaného příjmu potravy na velikost sérových CPM, CPP-I, CPP-II, T50 a CPP-II u dospělých nalačno s normální nebo poškozenou funkcí ledvin.
Extrakt z cistanche
Metodologie
1. Studijní populace.
Studovali jsme 14 jedinců s CKD a 16 zdravých kontrol odpovídajících věku a pohlaví. Každý účastník musel mít alespoň 18 let, aby byl způsobilý. Účastníci byli vyloučeni, pokud: (i) měli v anamnéze onemocnění minerálů nebo kostí, jiné než související s CKD; (ii) byli léčeni intestinálním vazačem fosfátů nebo kalcitriolem; nebo (iii) měli gastrointestinální poruchu, anamnézu intolerance laktózy nebo nebyli ochotni konzumovat studované jídlo. Pro skupinu CKD jsme přijali sedm jedinců s odhadovanou rychlostí glomerulární filtrace (eGFR) mezi 30 a 60 ml/min/1,73 m2 a sedm jedinců s eGFR<30 mL/min/1.73 m2, excluding participants who required dialysis or with a previous kidney transplant. Healthy controls had no history of chronic medical conditions and had normal kidney function (eGFR>60 ml/min/1,73 m2). Studie byla provedena na základě Helsinské deklarace.
Všichni jednotlivci poskytli písemný informovaný souhlas a studie byla schválena místní etickou komisí (Melbourne Health Human Research Ethics Committee MH2018.363).
2. Postup.
Každý účastník byl studován po celonočním půstu a odběr vzorků začal mezi 7:30 a 9:30 ráno. Na začátku období studie byla zavedena intravenózní kanyla. Před každým odběrem vzorku krve bylo vyřazeno počáteční 5 ml odběr z kanyly. Byly odebrány dva počáteční vzorky krve nalačno s odstupem 30 minut, aby se vzaly v úvahu odchylky základní linie. Průměrné hodnoty těchto dvou časových bodů byly použity jako "čas 0". Bezprostředně po odběru druhého vzorku nalačno účastníci zkonzumovali standardizované jídlo (Sanitarium Up&Go tekutá snídaně; 250 ml, vanilková příchuť) obsahující energii 815 kJ, 300 mg vápníku a 188 mg fosfátu (tabulka 1). Účastníci byli instruováni, aby vypili celý nápoj do 5 minut. Sériové vzorky krve byly odebrány v pěti postprandiálních časových bodech (30, 60, 120, 180 a 240 minut) od začátku jídla. Během období studie bylo účastníkům dovoleno pít vodu, ale nesměli konzumovat žádné jiné jídlo nebo pití.
3. Výstupní opatření.
Krev byla odebrána pro opakované měření nových markerů minerálního metabolismu (CPM, CPP-I, CPP-II, T50 a CPP-II velikost) v každém časovém bodě. Fetuin-A byl měřen v každém časovém bodě, vzhledem k jeho roli jako hlavního proteinu vázajícího minerály přítomného v CPM a CPP. Také jsme měřili sérový fosfát, celkový vápník, hořčík, albumin a bikarbonát v každém časovém bodě a sérový intaktní parathormon (PTH) a intaktní fibroblastový růstový faktor-23 (iFGF23) ve třech časových bodech ({{12 }}, 120 a 240 min). Citrát v séru byl měřen v 0, 30 a 60 minutách. Sérová močovina, kreatinin a 1,25-dihydroxyvitamín D byly měřeny jednou na lačno (0 min). Vzorky krve pro nové markery minerálního metabolismu, PTH, iFGF23, 1,25-dihydroxyvitamín D a sérový citrát, byly před centrifugací ponechány srážet po dobu 30 minut a poté byly alikvoty séra skladovány při -80 stupních až do dávkové analýzy. Všechna ostatní biochemická měření byla provedena v době odběru vzorků standardními laboratorními metodami.
4. Gel-fltrace a Fow cytometrické testy pro CPM a CPP.
Použili jsme dva komplementární testy ke kvantifikaci různých frakcí cirkulujícího CPP poolu49. Oba testy používají fluorescenčně značený bisfosfonátový derivát OsteoSense 680EX (Perkin Elmer), který se specificky váže na fosforečnan vápenatý v pevné fázi a přednostně na krystalické fáze (např. hydroxyapatit). K měření malých (<50 nm diameter), low-density mineral-laden fetuin-A colloids. Briefly, frozen serum samples were thawed for 24 h at 25 °C to induce aggregation of CPM and phase transition to crystalline calcium phosphate. Samples were then centrifuged for 30,000g for 2 h at 4 °C to remove larger CPP-I and CPP-II, leaving less dense crystal-laden fetuin-A monomer and multimers for staining with OsteoSense (0.5 µM) in HEPES-buffered DMEM (pH 8.0). Unbound dye was subsequently removed by gel filtration (Micro Bio-Spin® Columns with Bio-Gel® P-30, Bio-Rad) and the resultant fluorescence was measured using an infrared scanner (Odyssey CLx, LI-COR; EX 685 nm, EM 700 nm). Miura and colleagues32 referred to the mineral detected as low-density (L)-CPP, however, here we refer to them as CPM to reflect the origin of this mineral fraction in vivo. In our hands, the mean interassay analytical coefficient of variation (CVA) for the CPM assay was 4.9%.
Pro analýzu průtokovou cytometrií byly alikvoty zmrazeného séra zpracovány pomocí standardizovaných postupů popsaných dříve50. CPP-I a CPP-II byly měřeny, jak bylo popsáno dříve, pomocí nastavení průtokového cytometru BD FACSVerse k rozlišení částic<200 nm from the background and operate with fluorescence triggering on OsteoSense-positive events33,37. In this assay, CPP is distinguished from membrane-delimited mineral-containing extracellular vesicles using phosphatidyl serine–binding cadherin-FITC (Haematologic Technologies Inc., Essex Junction, VT). CPP-I and CPP-II were distinguished by differences in side scatter (SSC) intensity (related to particle size) and OsteoSense fluorescence intensity. Interassay CVA for CPP-I and CPP-II were<15% and<10%, respectively.
5. Ostatní minerální markery.
Sérum T50 bylo měřeno společností Calciscon AG, Biel, Švýcarsko, jak bylo popsáno dříve, za použití nefelometru Nephelostar (BMG Labtech, Ortenberg, Německo)40. Průměrná interassay CVA pro T50 byla 3,4 procenta. Hydrodynamický poloměr CPP-II byl měřen dynamickým rozptylem světla za použití DynaPro Plate Reader II (Wyatt Technology, Santa Barbara, CA, USA), jak popsal Chen et al.47 Te interassay CVA pro velikost CPP-II byla 4 procenta. Komerční imunotesty byly použity k měření iFGF23 (Kainos Laboratories, Tokio, Japonsko), 1,25 dihydroxy vitaminu D Immunodiagnostic Systems, Boldon, UK) a fetuinu-A (R&D Systems, Minneapolis, USA) podle pokynů výrobce. Průměrná interassay CVA byla 3,8 procenta, 5,5 procenta a 3,2 procenta. Citrát v séru byl měřen pomocí kolorimetrického testu (Sigma-Aldrich, Darmstadt, Německo) s průměrnou intertestovou CVA 3,5 procenta.
6. Statistická analýza.
Using GLIMPSE, a validated linear mixed model power and sample size calculator51, we estimated that 10 participants would provide>90 procentní výkon pro detekci zdvojnásobení CPP v postprandiálním období s chybovostí typu I 0,05. Studie nebyla zaměřena na zjištění rozdílu mezi skupinami.
Demografické údaje a biochemické údaje nalačno byly porovnány mezi skupinami pomocí nepárového t-testu nebo Kruskal-Wallisova testu pro normální a zkreslené spojité proměnné a chí-kvadrát testu pro kategorické proměnné.
Snažili jsme se popsat postprandiální odpověď v rámci skupiny a mezi skupinami pro každý opakovaný parametr. Za tímto účelem jsme pro každý parametr přizpůsobili modely lineárních smíšených efektů (LMM) s použitím přístupu omezené maximální věrohodnosti a nestrukturované kovarianční matice52. Pro každý LMM jsme modelovali skupinu, kategorický čas a interakci po skupinách jako fixní efekty a pro každého účastníka bylo zahrnuto náhodné zachycení, aby se zohlednila korelace opakovaných měření. Kontrolní skupina a čas '0' byly použity jako referenční hodnoty pro skupinu a čas. K testování rozdílů v postprandiální odpovědi mezi CKD a kontrolními skupinami byly použity odhady koeficientů pro interakční termíny skupiny po čase. Po přizpůsobení každého LMM jsme také provedli post hoc párová srovnání, abychom otestovali rozdíly v průměrných hodnotách mezi skupinami v každém časovém bodě a otestovali odchylku od základní linie nalačno v každé skupině. Pro tato párová srovnání jsme použili Bonferroniho korekční metodu k úpravě pro vícenásobná srovnání. CPM, CPP-I, CPP-II, velikost CPP-II, PTH a iFGF23 byly přirozeně log-transformovány před nasazením LMM, aby byla zajištěna normální distribuce reziduí. Pro snazší interpretaci byly odhady koeficientů pro interakční členy z těchto modelů umocněny, aby se odvodily odhady procentuální změny. Pro LMM CPM naznačovaly termíny interakce skupina po čase významný rozdíl v postprandiální odpovědi mezi skupinami. Abychom dále prozkoumali vliv funkce ledvin na postprandiální hladiny CPM, vypočítali jsme také plochu pod křivkou (AUC) pro CPM pomocí kubické spline metody (čas 0 až 240 min) a zkoumali jsme vztah mezi eGFR , AUC a maximální koncentrace CPM (pomocí Spearmanovy korelace pořadí) a také mezi CKD a časem maximální koncentrace CPM (pomocí testu chí-kvadrát).
Několik vzorků mělo nedetekovatelné hladiny CPP-I (2 vzorky v kontrolní skupině a 6 ve skupině s CKD) nebo CPP-II (5 v kontrolní skupině a 10 ve skupině s CKD). Pro hlavní analýzy byla pro tyto levocenzurované hodnoty použita spodní mez kvantifikace pro test (133 částic/ml). Abychom vyhodnotili potenciální zkreslení z tohoto přístupu, provedli jsme analýzu citlivosti, kde byly LMM pro CPP-I a CPP-II znovu upraveny po imputaci levcenzorovaných hodnot pomocí víceúrovňové Tobit regrese, kde čas a skupina byly zadány jako nezávislé proměnné 53.
Dvoustranné hodnoty p<0.05 were considered significant. All data were analyzed using Stata MP version 17.0 (StataCorp, College Station, USA) and figures were produced using GraphPad Prism version 9.2.0 (GraphPad Sofware, San Diego, USA).
Herba Cistanche
Diskuse
Podle našich nejlepších znalostí se jedná o první studii, která uvádí významný postprandiální účinek příjmu výživy na sérové hladiny CPM, CPP-I a CPP-II u lidí. Tyto účinky byly běžné u jedinců s normální a poškozenou funkcí ledvin; postprandiální exkurze CPM v séru však byla mnohem výraznější u účastníků CKD. Zjistili jsme také časný a přechodný postprandiální účinek na T50, který byl přítomen bez ohledu na funkci ledvin a doprovázený současným zvýšením sérového fetuinu-A.
Naše zjištění jsou v souladu s představou, že střevní absorpce dietní minerální zátěže může přímo vést k tvorbě cirkulujících CPM, CPP-I a CPP-II. To bylo navrženo již dříve10,15,16, ale je založeno převážně na údajích o zvířatech33,48. Naproti tomu důkazy u lidí byly nepřímé, pocházejí ze studií intestinálních vazačů fosfátů u pacientů s CKD závislých na hemodialýze34,37,55. Malá studie Yamady et al. navrhla denní variace CPP v séru s postprandiálními vrcholy, nicméně tato studie používala starší techniku testu, která nebyla schopna samostatně kvantifikovat poddruhy CPM a CPP, a všichni účastníci byli hospitalizováni kvůli léčbě nestabilního diabetu56. Naproti tomu všichni účastníci této studie byli klinicky stabilní, a pokud je nám známo, poprvé jsme prokázali, že postprandiální exkurze jsou pozorovány nejen u jedinců s CKD, ale také u zdravých dospělých, což potvrzuje roli tvorby CPM a CPP při normální fyziologické reakci na požití potravy.
Nárůsty sérových CPM a CPP byly pozorovány i po relativně mírné a fyziologicky relevantní nutriční minerální zátěži (tabulka 1). Naproti tomu u konvenčnějších markerů minerálního metabolismu byla minimální postprandiální variace. Předchozí studie podobně ukázaly omezenou postprandiální odchylku ve fosfátech7,57 s výjimkou případů, kdy jsou subjekty vystaveny velké farmakologické zátěži58,59. Ve zdraví je celkový fosfát v těle regulován tak, že čistá střevní absorpce odpovídá vylučování močí8. Tato odpověď však není okamžitá a může být pozorováno několik hodin zpoždění, než dojde ke zvýšení vylučování fosfátů močí, i když je fosfátová zátěž podána intravenózně8. Namísto toho zvířecí modely prokázaly, že jiné, nerenální mechanismy slouží k akutnějšímu udržování sérových iontových koncentrací prostřednictvím distribuce do kostí a jiných tkání59–61. Je pravděpodobné, že tvorba CPM a CPP může být důležitým dodatečným dočasným depotem fosfátu (a vápníku), který může akutně tlumit místní minerální zátěže, například z gastrointestinálního systému14. Fyzikálně-chemické vlastnosti CPM a CPP znamenají, že v oběhu mohou existovat potenciálně velká množství jinak nerozpustných minerálů bez rizika srážení, což zdánlivě usnadňuje bezpečnou hromadnou přepravu minerálů na místa použití nebo likvidace.
Pozorovali jsme přechodné zvýšení sérového fetuinu-A ve skupině s CKD. Na rozdíl od toho se fetuin-A jevil jako stabilní v kontrolách, avšak když byla párová srovnání opakována bez korekce pro vícenásobná srovnání, došlo k významnému zvýšení po 30 a 60 minutách u kontrol (doplňková tabulka S8), což naznačuje, že jsme mohli být nedostatečně schopni detekovat základní efekt. Kromě toho, že jde o negativní reaktant akutní fáze, s hladinami silně potlačenými v reakci na akutní a chronické záněty62, je málo známo o dalších mechanismech, které přímo regulují jaterní syntézu a sekreci fetuinu-A, a existuje nedostatek předchozích údajů o denních, nebo akutní postprandiální variace u jakéhokoli druhu. Vzhledem k pozorovanému vzestupu sérového fetuinu-A po krmení, zejména ve skupině CKD, a nezbytné úloze fetuinu-A při tvorbě CPM a CPP, je zajímavé zvážit, zda může být krmení „snímáno“ prostřednictvím dosud neznámého mechanismu. což vede k jaternímu uvolňování fetuinu A, které se shoduje s přílivem minerálů ze střev. Uedono a kol. nedávno navrhl, že samotný CPP může být spouštěčem exprese fetuinu-A v kultivovaných hepatocytech63. Mechanismy kontrolující uvolňování fetuinu-A a jejich reakce na minerální zátěž tedy vyžadují další zkoumání.
T50 je funkční hodnocení schopnosti séra odolávat ex vivo tvorbě CPP-II, což představuje kombinaci různých potencujících (včetně vápníku a fosfátu) a inhibujících (včetně fetuinu-A, albuminu, hořčíku, citrátu a bikarbonátu) kalcifikačních faktorů40. Pozorovali jsme časné, ale přechodné zvýšení T50. To bylo pozorováno v obou skupinách, ale ve skupině s CKD byl vrchol shodný se zvýšením sérového fetuinu-A. Dále, mezi všemi účastníky, změna T50 od výchozí hodnoty velmi úzce korelovala se změnou fetuinu-A v séru (doplňkový obrázek S2), což naznačuje, že fetuin-A může být hlavním faktorem, který je základem pozorovaných změn v T50. Ve skutečnosti jsme nenašli odpovídající časné postprandiální změny u jiných známých modulátorů T50 (sérový fosfát, vápník, bikarbonát, hořčík nebo albumin), i když to nevylučuje jemnější změny v jednom z těchto faktorů nebo jejich kombinaci. . Například pozitivní interakce mezi jednotlivými skupinami byla přítomna u sérového bikarbonátu ve skupině s CKD po 120 minutách, což se překrývalo se zvýšením T50. Pokud jde o fetuin-A, existovala také korelace mezi změnou bikarbonátu a T50 od výchozí hodnoty (doplňkový obr. S4), i když to bylo relativně slabé ve srovnání s korelací s fetuinem (r=0.385 vs. r=0.839). Nicméně postprandiální „alkalický příliv“ je uznávaným fenoménem a je pravděpodobné, že k pozorovaným postprandiálním změnám v T5064 přispělo více faktorů. Studované jídlo také obsahovalo překvapivé množství citrátu (~16 mM), známého silného inhibitoru tvorby CPP, ačkoliv došlo k malému zvýšení sérového citrátu ve skupině s CKD, tato změna se neshodovala s pozorovanými změnami T50, ani neexistovala žádná celková korelace mezi změnou T50 a sérovým citrátem v obou skupinách. Jiné dříve popsané modulátory T50, jako je pyrofosfát a zinek, nebyly v této studii měřeny. Ačkoli tyto nebo jiné dosud neznámé faktory mohly také přispět k pozorovanému postprandiálnímu zvýšení T50, poznamenáváme, že k významnému ovlivnění T5065 jsou obecně nutné poměrně podstatné změny v koncentraci těchto malých anorganických molekul. Na rozdíl od postprandiálních účinků na T50 zůstal hydrodynamický poloměr CPP-II v obou skupinách zdánlivě nezměněn.
Kapsle Cistanche
Zatímco postprandiální výkyvy CPM byly pozorovány v obou skupinách, hladiny CPM byly konzistentně vyšší ve skupině CKD v každém z časových bodů a termíny interakce mezi skupinami naznačovaly, že velikost postprandiální odpovědi byla významně větší. u účastníků CKD než u kontrol. V explorativní analýze tedy existovala silná korelace mezi eGFR a CPM AUC a maximální koncentrací. Vrcholové hladiny CPM se také vyskytovaly později ve skupině s CKD. Teoreticky by tyto rozdíly mohly naznačovat zvýšenou produkci CPM po nutričním příjmu a/nebo zhoršenou schopnost odstraňovat CPM u pacientů s CKD. Posledně uvedené je podpořeno nedávnými údaji od Koepperta et al., kteří použili živou dvoufotonovou mikroskopii, aby ukázali, že cirkulující CPM je u myší převážně vyčištěn glomerulární filtrací29. Rozumnou předpovědí proto může být, že schopnost vymazat CPM se sníží, když GFR klesá. Změny v jiných aspektech minerální homeostázy, včetně kostní přeměny66, a opožděné renální exkreci akutní fosfátové zátěže7,59 jsou však také běžně pozorovány u CKD a mohly přispívat ke zvýšení postprandiálních hladin. Nedávné důkazy zpochybnily zažitý názor, že CKD ovlivňuje čistou střevní absorpci fosfátů57,67,68. Zaznamenali jsme však, že šest ze 14 jedinců ve skupině s CKD užívalo cholekalciferol. S ohledem na potenciál stimulačních účinků vitaminu D na střevní minerální absorpci jsme provedli ad hoc průzkumnou analýzu, abychom otestovali, zda použití nutričního vitaminu D ovlivnilo akutní odpověď CPM, CPP-I a CPP-II na krmení (doplňkové tabulky S9–S11). Kromě jediné pozitivní interakce pro CPP-I po 30 minutách u pacientů užívajících cholekalciferol nebyly všechny ostatní termíny interakce a post hoc párová srovnání CPM, CPP-I a CPP-II významné, což naznačuje, že cholekalciferol Bylo nepravděpodobné, že by použití mělo podstatný vliv na postprandiální kinetiku CPM/CPP. Zatímco malá velikost vzorku a potenciál pro zkreslení mohou bránit konečným závěrům, nedostatečný účinek může také odrážet převahu absorpce fosfátů prostřednictvím paracelulární dráhy, když je minerál nadbytek, který není aktivně regulován osou vitaminu D69.
Na rozdíl od CPM jsme u CPP-I ani CPP-II nepozorovali silný účinek na funkci ledvin. Na rozdíl od CPM je cirkulující CPP primárně odstraňován z oběhu nerenálními mechanismy. Zvířecí modely a modely in vitro navrhly rychlou clearance CPP-I převážně jaterními sinusoidními endoteliálními buňkami28 a CPP-II rezidentními makrofágy jater a sleziny70. Je pravděpodobné, že zatímco účastníci naší skupiny s CKD vykazovali důkazy o změněném metabolismu CPM, že tyto samostatné dráhy clearance CPP byly dostatečné k udržení normálních postprandiálních profilů CPP. Předpokládali jsme, že skupina s CKD bude mít výrazně vyšší hladiny CPP ve srovnání s kontrolami na základě předchozích studií, i když tyto studie zahrnovaly pacienty s pokročilejším CKD, kteří byli závislí na dialýze33, nebo používali starší a nepřímou metodu měření CPP20,23. Jedinci s pokročilejším CKD než ti studovaní zde mohou vykazovat větší rozdíly v hladinách CPP nalačno a po jídle. Nedostatek oddělení CPP mezi naší CKD a kontrolní skupinou může být také způsoben naším omezeným počtem účastníků, což také omezilo naši schopnost formálně testovat účinek stadia CKD (doplňkový obrázek S6). Naše studie byla skutečně založena na zkoumání postprandiálních reakcí spíše než na rozdílech mezi skupinami. Je třeba poznamenat, že se zdálo, že CPP-I se vrátil na hladiny nalačno dříve u kontrol než u účastníků CKD a po 120 minutách byla pozitivní interakce mezi skupinami pro CPP-II u účastníků CKD. Oba nálezy potenciálně signalizují, že jsme mohli pozorovat výraznější účinky mezi skupinami ve větší kohortě. K nulovým zjištěním mohla také přispět vyšší analytická nepřesnost pro měření CPP založená na průtokové cytometrii.
Kromě poskytnutí nových poznatků o fyziologii metabolismu CPM a CPP má naše studie také přímý význam pro optimalizaci použití těchto nových markerů metabolismu minerálů v budoucích studiích. Zatímco každý z těchto nových testů se ukázal jako slibný v rané klinické práci, jen velmi málo studií uvedlo43 nebo kontrolovalo stav nalačno/absorpci46,56. V této studii mělo několik jedinců nedetekovatelné hladiny CPP-I nebo CPP-II nalačno a časně postprandiální období a tento hluboký účinek hladovění na sérový CPP je sám o sobě dříve neohlášený a pozoruhodný. Naproti tomu hladiny CPM nalačno byly měřitelné a významně vyšší ve skupině s CKD než u kontrol, což naznačuje, že trvalé zvýšení CPM se nemusí nutně projevit zvýšenými hladinami CPP u pacientů s CKD nezávislým na dialýze.
Předchozí epidemiologické studie naznačovaly spojitost mezi zvýšenými hladinami CPM a CPP s řadou náhradních markerů vaskulárního onemocnění21,23,24, jakož i s kardiovaskulárními příhodami25 a mortalitou ze všech příčin22. Laboratorní studie dále poskytly věrohodné mechanismy, kterými může CPP zprostředkovat tyto patologické vaskulární výsledky26–28. Zatímco však studie in vitro naznačují, že mnohé z těchto toxicit jsou indukovány způsobem závislým na dávce, pokud má CPP normální fyziologickou roli ve zdraví, není jasné, v jakém bodě se tyto částice mohou stát škodlivými. Znalost vlivu nutričního příjmu na kinetiku CPP, jak je zde odhalena, se může ukázat jako zásadní pro další pochopení tohoto procesu. Prahová koncentrace pro nástup patologických účinků CPM a CPP může být (alespoň zpočátku) dosažena pouze v postprandiálním stavu in vivo. Pokud ano, dynamické testování postprandiální odpovědi může poskytnout další příležitosti k vyhodnocení dřívějších projevů dysregulovaného metabolismu minerálů, jakož i rizika souvisejícího vaskulárního onemocnění. Další důležitou možností je, že složení a tím i vnitřní toxicita CPP-I a CPP-II se liší mezi zdravím a CKD45.
Doplněk Cistanche
Omezení
Uznáváme, že tato studie má několik omezení, včetně omezeného počtu pacientů, jak již bylo uvedeno. Pozoruhodně jsme také použili standardizované jídlo podávané po celonočním hladovění, takže nemůžeme komentovat účinek různého složení jídla nebo účinek následných jídel podávaných po zbytek dne. Jídlo jsme vybrali na základě jeho komerční dostupnosti, umožňující standardizaci mezi účastníky, a protože představovalo fyziologicky relevantní nutriční zátěž (tabulka 1). Je však možné, že pokud byli účastníci vystaveni většímu množství minerálů, mohlo být zřejmé další oddělení mezi těmi s normální a narušenou funkcí ledvin. Podobně, vzhledem k tomu, že jsme jednotlivce pozorovali pouze čtyři hodiny po jídle, je možné, že kumulativní účinek následujících jídel mohl také skupiny dále odlišit.
Nezískali jsme výkaly ani moč, a tak nemůžeme komentovat celkové množství minerálů absorbovaných nebo vyloučených během studie. Předpokládáme, že změny v každém měření pozorované po krmení přímo souvisí s nutričním příjmem. Tento předpoklad je nepřímo podpořen podrobnými zobrazovacími studiemi, které ukazují proudění vápníkových a fosfátových iontů po příjmu potravy57, stejně jako přímými důkazy ze studií na zvířatech, které ukazují, že akutní orální žaludeční sonda u myší s pufrovaným fosfátovým roztokem vede ke skokům v séru CPM/CPP48. Nicméně jsme nepozorovali účastníky v podmínkách prodlouženého hladovění, a tak nemůžeme přesvědčivě vysvětlit diurnální výkyvy v žádném ze studovaných parametrů nesouvisející s dietou. Měli jsme však dva vzorky nalačno, jejichž průměr byl použit jako „čas 0“, a variabilita mezi těmito vzorky nalačno byla triviální ve srovnání s velikostí změn pozorovaných v postprandiálním období.
Použili jsme Bonferroniho metodu, abychom zohlednili vícenásobná post hoc párová srovnání mezi skupinami a uvnitř skupin pro každý parametr. Jedná se nepochybně o konzervativní přístup a pokud je nám známo, není to žádný přijatý žádnou jinou podobnou krmnou studií postprandiálního minerálního metabolismu. Tento přístup jsme zvolili vzhledem k velkému počtu časových bodů a srovnání, která byla provedena, a zdůvodnili jsme, že je vhodnější zaměřit se na nejrobustnější a nejvýznamnější signály. V důsledku toho nám však možná unikli menší, ale potenciálně relevantní efekty. Neopravovali jsme vícenásobné testování napříč různými minerálními parametry vzhledem k pravděpodobnosti vzájemně závislých fyziologicky spojených změn.
Cistanche tubulosa
Závěr
Naše studie poprvé odhalila, že příjem nutričních minerálů vede k tvorbě CPM a CPP v krvi jako normální fyziologické odpovědi na krmení. Tato zjištění potvrzují hypotézu, že tvorba CPM/CPP pomáhá budovat postprandiální minerální zátěže a funguje jako dočasná cirkulující zásoba objemových fosforečnanů vápenatých, které jsou nakonec určeny pro využití/skladování (např. minerální prekurzor pro mineralizaci kostí) nebo eliminaci. Pozorovali jsme také vyšší hladiny CPM v séru nalačno a větší postprandiální odpověď u pacientů s poruchou funkce ledvin, což naznačuje, že metabolismus CPM je u CKD zjevně změněn. Analýza postprandiální manipulace s CPM/CPP může poskytnout nový pohled na mechanismy spojující nadměrný příjem vápníku a fosfátů ve stravě se zvýšeným rizikem kardiovaskulárních onemocnění u pacientů s poruchou vylučování minerálů. V širším měřítku tyto nové poznatky podtrhují důležitý, ale často opomíjený příspěvek koloidní biochemie k homeostáze minerálů.
Reference
1. Magalhães, MCF, Marques, PAAP & Correia, RN Biomineralization—Medical Aspects of Solubility (eds. Königsberger, E. & Königsberger, L.). 71–123. (Wiley, 2006).
2. Holt, C., Lenton, S., Nylander, T., Sorensen, ES & Teixeira, SC Mineralizace měkkých a tvrdých tkání a stabilita biofluidů. J. Struct. Biol. 185, 383–396 (2014).
3. Reznikov, N., Steele, JAM, Fratzl, P. & Stevens, MM Materiálová vize mineralizace extracelulární matrix. Nat. Rev. Mater. 1, 16041 (2016).
4. Smith, ER Vaskulární kalcifikace u urémie: New-age koncepty o problému stáří. Metody Mol. Biol. 1397, 175–208 (2016).
5. Chen, J. a kol. Kalcifikace koronárních tepen a riziko kardiovaskulárních onemocnění a úmrtí u pacientů s chronickým onemocněním ledvin. JAMA Cardiol. 2, 635–643 (2017).
6. Kestenbaum, BR a kol. Výskyt a progrese koronární kalcifikace u chronického onemocnění ledvin: Multietnická studie aterosklerózy. Kidney Int. 76, 991-998 (2009).
7. Isakova, T. a kol. Postprandiální minerální metabolismus a sekundární hyperparatyreóza u časného CKD. J. Am. Soc. Nephrol. 19, 615–623 (2008).
8. Scanni, R., vonRotz, M., Jehle, S., Hunter, HN & Krapf, R. Lidská odpověď na akutní enterální a parenterální fosfátové zátěže. J. Am. Soc. Nephrol. 25, 2730–2739 (2014).
9. Pasch, A., Jahnen-Dechent, W. & Smith, ER Fosfát, kalcifikace v krvi a minerální stres: Fyziologický systém krevních minerálních pufrů a jeho souvislost s kardiovaskulárním rizikem. Int. J. Nephrol. 2018, 9182078 (2018).
10. Jahnen-Dechent, W. a kol. Bahno v krvi: Úloha protein-minerálních komplexů a extracelulárních vezikul při biomineralizaci a kalcifikaci. J. Struct. Biol. 212, 107577 (2020).
11. Schinke, T. a kol. Sérový protein alfa2-HS glykoprotein/fetuin inhibuje tvorbu apatitu in vitro a mineralizaci buněk kalvárie. Možná role v mineralizaci a homeostáze vápníku. J. Biol. Chem. 271, 20789-20796 (1996).
12. Heiss, A. a kol. Strukturální základ inhibice kalcifikace pomocí alfa 2-HS glykoproteinu/fetuinu-A. Tvorba koloidních kalciproteinových částic. J. Biol. Chem. 278, 13333–13341 (2003).
13. Cai, MM, Smith, ER & Holt, SG Te role fetuinu-A při obchodování s minerály a jejich ukládání. Bonekey Rep. 4, 672 (2015).
14. Smith, ER, Hewitson, TD & Jahnen-Dechent, W. Kalciproteinové částice: Minerál se chová špatně? Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 29, 378–386 (2020).
15. Jahnen-Dechent, W., Schäfer, C., Ketteler, M. & McKee, MD Minerální chaperony: Role fetuinu-A a osteopontinu v inhibici a regresi patologické kalcifikace. J. Mol. Med. (Berl.) 86, 379–389 (2008).
16. Jahnen-Dechent, W. & Smith, ER Přírodní lék na fosfátové potíže: Kalciproteinové částice regulují systémový metabolismus minerálů. Kidney Int. 97, 648–651 (2020).
17. Schafer, C. a kol. Sérový protein alfa 2-Heremans-Schmidův glykoprotein/fetuin-A je systémově působící inhibitor ektopické kalcifikace. J. Clin. Investovat. 112, 357-366 (2003).
18. Herrmann, M. a kol. Lumenální kalcifikace a mikro vaskulopatie u myší s deficitem fetuinu-A vedou k víceorgánové morbiditě. PLoS ONE 15, e0228503 (2020).
19. Heiss, A., Pipich, V., Jahnen-Dechent, W. & Schwahn, D. Fetuin-A je minerální nosný protein: Malý úhel rozptylu neutronů poskytuje nový pohled na řízenou inhibici kalcifikace Fetuinem-A. Biophys. J. 99, 3986–3995 (2010).
20. Smith, ER a kol. Koncentrace fetuinu-A v séru a kalciproteinové částice obsahující fetuin-A u pacientů s chronickým zánětlivým onemocněním a selháním ledvin. Nefrologie (Carlton) 18, 215–221 (2013).
21. Smith, ER a kol. Fosforylované kalciproteinové částice obsahující fetuin-A jsou spojeny s tuhostí aorty a procyklickým prostředím u pacientů s CKD před dialýzou. Nephrol. Vytáčení. Transplantace. 27, 1957–1966 (2012).
22. Smith, ER a kol. Sklon ke kalcifikaci v séru předpovídá mortalitu ze všech příčin u predialyzačního CKD. J. Am. Soc. Nephrol. 25, 339–348 (2014).
23. Hamano, T. a kol. Fetuin-minerální komplex odráží mimokostní kalcifikační stres u CKD. J. Am. Soc. Nephrol. 21, 1998–2007 (2010).
24. Nakazato, J. a kol. Asociace kalciproteinových částic měřená novou metodou s koronárním arteriálním plakem u pacientů s ischemickou chorobou srdeční: Průřezová studie. J. Cardiol. 74, 428–435 (2019).
25. Gatate, Y. a kol. Střednědobá prediktivní hodnota kalciproteinových částic u pacientů s udržovací hemodialýzou založená na testu gelové filtrace. Ateroskleróza 303, 46–52 (2020).
26. Cai, MMX, Smith, ER, Tan, SJ, Hewitson, TD & Holt, SG Te role sekundárních kalciproteinových částic v mineralizačním paradoxu chronického onemocnění ledvin. Calcif. Tkáň. Int. 101, 570–580 (2017).
27. Aghagolzadeh, P. a kol. Kalcifikace buněk hladkého svalstva cév je indukována sekundárními kalciproteinovými částicemi a zesílena tumor nekrotizujícím faktorem alfa. Ateroskleróza 251, 404–414 (2016).
28. Koppert, S. a kol. Buněčná clearance a biologická aktivita kalciproteinových částic závisí na jejich stavu zrání a krystalinitě. Přední. Immunol. 9, 1991 (2018).
29. Koeppert, S. a kol. Živé zobrazování clearance kalciproteinových částic a receptorem zprostředkované vychytávání: role kalciproteinových monomerů. Přední. Buňka. Dev. Biol. 9, 633925 (2021).
30. Shishkova, D. a kol. Kalciumfosfátové bióny způsobují hyperplazii intimy v intaktních aortách normolipidemických potkanů prostřednictvím endoteliálního poškození. Int. J. Mol. Sci. 20, 5728 (2019).
31. Kuro-o, M. Fosfát-centrické paradigma pro patofyziologii a terapii chronického onemocnění ledvin. Kidney Int. Suppl. 2011(3), 420–426 (2013).
32. Miura, Y. a kol. Identifikace a kvantifikace plazmatických kalciproteinových částic s odlišnými fyzikálními vlastnostmi u pacientů s chronickým onemocněním ledvin. Sci. Rep. 8, 1256 (2018).
33. Smith, ER a kol. Nový průtokový cytometrický test na bázi fluorescenční sondy pro nanočástice obsahující minerály v séru. Sci. Rep. 7, 5686 (2017).
34. Nakamura, K. a kol. Vliv uhličitanu lanthanitého na kalciproteinové částice u hemodialyzovaných pacientů. Clin. Exp. Nephrol. 24, 323–329 (2020).
35. Tiong, MK a kol. Vliv středního řezu dialyzátoru na proteiny vázané uremické toxiny a markery minerálního metabolismu u pacientů na hemodialýze. Hemodální. Int. https://doi.org/10.1111/hdi.12924 (2021).
36. Tiong, MK, Smith, ER, Toussaint, ND, Al-Khayyat, HF & Holt, SG Redukce kalciproteinových částic u dospělých užívajících infliximab pro chronické zánětlivé onemocnění. JBMR Plus 5, e10497 (2021).
37. Smith, ER, Pan, FFM, Hewitson, TD, Toussaint, ND & Holt, SG Vliv sevelameru na kalciproteinové částice u hemodialyzovaných pacientů: Te sevelamer versus vápník ke snížení kalciproteinových částic obsahujících fetuin-A na dialýze (SCaRF) randomizováno kontrolovaný soud. Kidney Int. Rep. 5, 1432–1447 (2020).
38. Ruderman, I., Smith, ER, Toussaint, ND, Hewitson, TD & Holt, SG Podélné změny v kostním a minerálním metabolismu po vysazení cinakalcetu u dialyzovaných pacientů se sekundární hyperparatyreózou. BMC Nephrol. 19, 113 (2018).
39. Bressendorf, I. a kol. Vliv zvýšení hořčíku v dialyzátu na kalciproteinové částice, zánět a kostní markery: Post hoc analýza z randomizované kontrolované klinické studie. Nephrol. Vytáčení. Transplantace. 36, 713–721 (2021).
40. Pasch, A. a kol. Test na bázi nanočástic měří celkový sklon ke kalcifikaci v séru. J. Am. Soc. Nephrol. 23, 1744–1752 (2012).
41. Eelderink, C. a kol. Sklon ke kalcifikaci v séru a riziko kardiovaskulární mortality a mortality ze všech příčin v obecné populaci: Studie PREVENT. Arterioskler. Tromb. Vasc. Biol. 40, 1942–1951 (2020).
42. Bundy, JD a kol. Sklon ke kalcifikaci v séru a kalcifikace koronárních tepen u pacientů s CKD: Studie Te CRIC (Chronic Renal Insufficiency Cohort). Dopoledne. J. Ledviny. Dis. 73, 806–814 (2019).
43. Bundy, JD a kol. Sklon k sérové kalcifikaci a klinické příhody u CKD. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 14, 1562–1571 (2019).
44. Pasch, A. a kol. Sklon ke kalcifikaci krve, kardiovaskulární příhody a přežití u pacientů na hemodialýze ve studii EVOLVE. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 12, 315–322 (2017).
45. Smith, ER, Hewitson, TD, Hanssen, E. & Holt, SG Biochemická transformace kalciproteinových částic u urémie. Kost 110, 355–367 (2018).
46. Chen, W. a kol. Asociace velikosti částic sérového kalciproteinu a doby transformace s arteriální kalcifikací, arteriální tuhostí a mortalitou u pacientů na hemodialýze. Dopoledne. J. Kidney Dis. 77, 346–354 (2021).
47. Chen, W. a kol. Pacienti s pokročilým chronickým onemocněním ledvin a vaskulární kalcifikací mají velký hydrodynamický poloměr sekundárních kalciproteinových částic. Nephrol. Vytáčení. Transplantace. 34, 992–1000 (2019).
48. Akiyama, KI a kol. Kalciproteinové částice regulují expresi fibroblastového růstového faktoru-23 v osteoblastech. Kidney Int. 97, 702–712 (2020).
49. Smith, ER Kalciproteinové částice: minerální biomarker, který potřebuje lepší měření. Ateroskleróza 303, 43–45 (2020).
50. Smith, ER Izolace a kvantifikace kalciproteinových částic obsahujících fetuin-A z biologických tekutin. Metody Mol. Biol. 1397, 221–240 (2016).
51. Guo, Y., Logan, HL, Glueck, DH & Muller, KE Výběr velikosti vzorku pro studie s opakovanými měřeními. BMC Med. Res. Methodol. 13, 100 (2013).
52. Liu, C., Cripe, TP & Kim, MO Statistické problémy v longitudinální analýze dat pro studie účinnosti léčby v biomedicínských vědách. Mol. Ter. 18, 1724–1730 (2010).
53. Tobin, J. Odhad vztahů pro omezené závislé proměnné. Econometrica 26, 24–36 (1958).
54. Ter Meulen, KJ a kol. Dialyzát kyseliny citronové zlepšuje náchylnost hemodialyzovaných pacientů ke kalcifikaci: Multicentrická prospektivní randomizovaná zkřížená studie. PLoS ONE 14, e0225824 (2019).
55. Tiem, U. a kol. Účinek terapie vazačem fosfátů s oxyhydroxidem železitým na sklon ke kalcifikaci u pacientů s chronickou hemodialýzou: randomizovaná, kontrolovaná, zkřížená studie. Clin. Ledviny J. 14, 631–638 (2021).
56. Yamada, H. a kol. Denní variabilita sérových hladin kalciproteinových částic a jejich souvislost s parametry minerálního metabolismu: Průřezová pilotní studie. Nefrologie (Carlton) 23, 226–230 (2018).
57. Stremke, ER a kol. Střevní absorpce fosforu u středně těžkého CKD a zdravých dospělých byla stanovena pomocí radioizotopového indikátoru. J. Am. Soc. Nephrol. 32, 2057–2069 (2021).
58. Volk, C. a kol. Akutní účinky anorganického aditiva fosforu na minerální metabolismus a kardiometabolické rizikové faktory u zdravých jedinců. J. Clin. Endocrinol. Metab. 107, e852–e864 (2022).
59. Turner, ME a kol. Zhoršená tolerance fosfátů byla odhalena při akutní orální expozici. J. Bone Miner. Res. 33, 113–122 (2018).
60. Tomáš, L. a kol. Akutní adaptace na perorální nebo intravenózní fosfát vyžaduje parathormon. J. Am. Soc. Nephrol. 28, 903–914 (2017).
61. Zelt, JG a kol. Akutní ukládání tkáňových minerálů v reakci na fosfátový pulz u experimentálního CKD. J. Bone Miner. Res. 34, 270–281 (2019).
62. Lebreton, JP a kol. Sérová koncentrace lidského alfa 2 HS glykoproteinu během zánětlivého procesu: důkaz, že alfa 2 HS glykoprotein je negativní reaktant akutní fáze. J. Clin. Investovat. 64, 1118-1129 (1979).
63. Uedono, H. a kol. Účinky kalciproteinových částic obsahujících fetuin-A na posttranslační modifikace fetuinu-A v buňkách HepG2. Sci. Rep. 11, 7486 (2021).
64. Niv, Y. & Fraser, GM Te alkalický přílivový jev. J. Clin. Gastroenterol. 35, 5-8 (2002).
65. Smith, ER, Hewitson, TD & Holt, SG Diagnostické testy na vaskulární kalcifikaci. Adv. Chronické onemocnění ledvin. 26, 445–463 (2019).
66. Sprague, SM a kol. Diagnostická přesnost markerů kostního obratu a kostní histologie u pacientů s CKD léčených dialýzou. Dopoledne. J. Kidney Dis. 67, 559–566 (2016).
67. Vorland, CJ a kol. Progrese onemocnění ledvin nesnižuje intestinální absorpci fosforu u potkaního modelu chronického onemocnění ledvin - poruchy minerálních kostí. J. Bone Miner. Res. 35, 333–342 (2020).
68. Marks, J. a kol. Střevní absorpce fosfátů v modelu chronického selhání ledvin. Kidney Int. 72, 166–173 (2007).
69. Hill Gallant, KM & Vorland, CJ Střevní vstřebávání fosforu: Nejnovější poznatky v translačním a klinickém výzkumu. Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 30, 404–410 (2021).
70. Herrmann, M. a kol. Clearance kalciproteinových částic obsahujících fetuin-A je zprostředkována scavengerovým receptorem-A. Circ. Res. 111, 575–584 (2012).
71. Sanitarium Health Food Company. UP&GO™ vanilková ledová příchuť. https://www.sanitarium.com.au/products/up-and-go/up-and-go/vanilla-ice-favor (2021).
72. Národní rada pro zdraví a lékařský výzkum australské vlády. Referenční hodnoty živin pro Austrálii a Nový Zéland. https://www.nrv.gov.au/nutrients (2021).
Mark K.Tiong1,2, Michael MX Cai1, Nigel D.Toussaint1,2, Sven‑JeanTan1,2, Andreas Pasch3,4,5 & Edward R. Smith1,2
1 Nefrologické oddělení, The Royal Melbourne Hospital, Grattan Street, Parkville, VIC 3052, Austrálie.
2 Department of Medicine (RMH), University of Melbourne, Parkville, Austrálie.
3 Calciscon AG, Biel, Švýcarsko.
4 Lindenhofspital Bern, Bern, Švýcarsko.
5 Ústav fyziologie a patofyziologie, Univerzita Johannese Keplera, Linz, Rakousko.
