Účinek odvaru Bushen Huoxue Xiezhuo na apoptózu a fibrózu ledvinové tkáně u potkanů s 5/6 nefrektomií na základě HIF-1 / PKM2
Jan 27, 2026
3.4 Účinky odvaru Bushen Huoxue Xiezhuo na proteinové exprese -SMA, TGF-, FN a kolagenu-1 v renální tkáni potkanů CRF
Jak je znázorněno na obrázcích 3~6, ve srovnání se skupinou s falešně operovanou skupinou byly proteinové exprese -SMA, TGF-, FN a kolagenu-1 v renální tkáni modelové skupiny významně zvýšeny (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of α-SMA, TGF-β, FN, and collagen-1 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
Tabulka 2 Účinky odvaru Bushen Huoxue Xiezhuo na hladiny močoviny, Scr a ₂-MG v séru u potkanů CRF (x̄±s, n=10)
| Skupina | Močovina/(mmol/l) | Scr/(μmol/L) | ₂-MG/(mg/L) |
|---|---|---|---|
| Falešně provozovaná skupina | 6.23±0.63 | 37.35±0.83 | 0.98±0.13 |
| Modelová skupina | 23.02±0.73* | 118.57±1.03* | 3.95±1.07* |
| Skupina s nízkou dávkou | 21.23±0.69# | 112.45±0.87# | 2.57±0.35# |
| Skupina se střední dávkou | 18.02±0.54# | 93.18±1.17# | 1.98±0.09# |
| Skupina s vysokou dávkou | 15.23±0.33# | 87.24±1.08# | 1.13±0.17# |
| Benazeprilová skupina | 19.09±0.59# | 105.77±0.67# | 2.48±0.15# |
Poznámka: *P<0.05 vs. sham-operated group; #P<0.05 vs. model group
3.5 Účinky odvaru Bushen Huoxue Xiezhuo na expresi mRNA HIF-1, PKM2 a HK2 v renální tkáni potkanů CRF
Jak je znázorněno na obrázku 7, ve srovnání se skupinou s předstíranou operací byly mRNA exprese HIF-1, PKM2 a HK2 v renální tkáni modelové skupiny významně zvýšeny (P<0.05). Compared with the model group, the mRNA expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
Obrázek 3. Účinky přípravku pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a eliminaci zákalu na expresi proteinu -SMA v renální tkáni potkanů CRF (ICH, ×400)
A. Falešně provozovaná skupina
B. Modelová skupina
C. Skupina přípravků pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu s nízkou dávkou ledvin
D. Skupina receptur pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu se střední dávkou ledvin
E. Skupina receptur pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu ve vysokých dávkách
F. Benazepril Group
Obrázek 4. Účinky přípravku pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a eliminaci zákalu na expresi TGF-proteinu v ledvinové tkáni potkanů CRF (ICH, ×400)
A. Falešně provozovaná skupina
B. Modelová skupina
C. Skupina přípravků pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu s nízkou dávkou ledvin
D. Skupina receptur pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu se střední dávkou ledvin
E. Skupina receptur pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu ve vysokých dávkách
F. Benazepril Group
Kliknutím zobrazíte další podrobnosti
Supporting Service Of Wecistanche-Pro více podrobností o spolupráci
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
3.6 Účinky odvaru Bushen Huoxue Xiezhuo na expresi proteinů HIF-1, PKM2 a HK2 v renální tkáni potkanů CRF
Jak je znázorněno na obrázku 8, ve srovnání se skupinou s falešně operovanou skupinou byly proteinové exprese HIF-1, PKM2 a HK2 v renální tkáni modelové skupiny významně zvýšeny (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
3.7 Účinky odvaru Bushen Huoxue Xiezhuo na proteinové exprese Bax, Bcl-2 a kaspázy-3 v renální tkáni potkanů CRF
Jak je znázorněno na obrázku 9, ve srovnání s falešně operovanou skupinou byly proteinové exprese Bax a kaspázy-3 v renální tkáni modelové skupiny významně zvýšeny, zatímco proteinová exprese Bcl-2 byla významně snížena (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of Bax and Caspase-3 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased, and the protein expression of Bcl-2 was significantly increased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
Obrázek 7. Účinky přípravku pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a eliminaci zákalu na expresi HIF-1, PKM2 a HK2 mRNA v ledvinové tkáni potkanů CRF
A. Falešně provozovaná skupina
B. Modelová skupina
C. Skupina přípravků pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu s nízkou dávkou ledvin
D. Skupina receptur pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu se střední dávkou ledvin
E. Skupina receptur pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu ve vysokých dávkách
F. Benazepril Group
Poznámka: Ve srovnání s falešně provozovanou skupinou,
∗ P<0.05; Compared with the model group,
#P<0.05
Obrázek 8. Účinky přípravku pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a eliminaci zákalu na proteiny HIF-1, PKM2 a HK2 v ledvinové tkáni potkanů CRF
A. Falešně provozovaná skupina
B. Modelová skupina
C. Skupina přípravků pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu s nízkou dávkou ledvin
D. Skupina receptur pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu se střední dávkou ledvin
E. Skupina receptur pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu ve vysokých dávkách
F. Benazepril Group
Obrázek 9. Účinky přípravku pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a eliminaci zákalu na expresi proteinů Bax, Bcl-2 a kaspázy-3 v ledvinové tkáni potkanů CRF
A. Falešně provozovaná skupina
B. Modelová skupina
C. Skupina přípravků pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu s nízkou dávkou ledvin
D. Skupina receptur pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu se střední dávkou ledvin
E. Skupina receptur pro tonizaci ledvin, aktivaci krve a odstranění zákalu ve vysokých dávkách
F. Benazepril Group
Poznámka: Ve srovnání s falešně provozovanou skupinou,
∗ P<0.05; Compared with the model group,
#P<0.05
4 Diskuse
V posledních letech nemocných s CKD přibývá a výrazně stoupá i její prevalence. Na základě základní patogeneze CKD jako „deficience komplikované nadbytkem“ navrhl profesor Tan Jinchuan terapeutický princip tonizace ledvin a sleziny, aktivace krevního oběhu a odvodnění zákalu. Předchozí studie ukázaly, že odvar Bushen Huoxue Xiezhuo může regulovat dráhy, jako je autofagie, apoptóza a fibróza, aby chránila funkci ledvin. Relevantní studie ukázaly, že rebarbora, astragalus, andělika, šalvěj miltiorrhiza a jejich aktivní složky mohou inhibovat renální fibrózu a chránit renální funkce [7]. Výsledky této studie ukázaly, že ve srovnání s modelovou skupinou všechny dávkové skupiny odvaru Bushen Huoxue Xiezhuo v různé míře zlepšily sérové hladiny močoviny, Scr a ₂-MG a také ukládání kolagenových vláken v renální tkáni, což naznačuje, že odvar Bushen Huoxue Xiezhuo hraje důležitou roli při ochraně renálních funkcí a oddálení renální fibrózy.
Je pozoruhodné, že podobné renální ochranné účinky byly hlášeny u Cistanche tubulosa, klasické TCM byliny známé jako „pouštní ženšen“ a uznávané jako prvotřídní léčivý materiál vyživující ledviny [15]. V teorii TCM je Cistanche tubulosa vysoce ceněna pro svou schopnost „povzbudit jang ledvin a doplnit esenci“ a moderní výzkumy potvrdily, že je bohatá na účinné látky jako echinakosid, verbascosid a flavonoidy [15]. Tyto složky mohou inhibovat apoptózu renálních buněk, podporovat proliferaci renálních buněk, opravovat poškozenou renální tkáň a dilatovat renální krevní cévy – účinky, které jsou v souladu s mechanismy ochrany ledvin pozorovanými v odvaru Bushen Huoxue Xiezhuo [15]. Tato zjištění zdůrazňují potenciál bylin TCM s vlastnostmi vyživujícími ledviny při léčbě chronického onemocnění ledvin.
Apoptóza je jedním z důležitých mechanismů, které jsou základem patogeneze CRF. Za fyziologických podmínek je udržována jemná dynamická rovnováha mezi členy proapoptotické a antiapoptotické rodiny. Jakmile je apoptóza nadměrně aktivována, povede to k patologickým změnám v glomerulech a renálních tubulech, čímž dojde k poškození funkce ledvin. Při aktivaci proapoptotického proteinu Bax dochází ke zvýšení permeability vnější membrány mitochondrií, což má za následek kolaps vnitřního membránového potenciálu mitochondrií a uvolnění cytochromu C (CytC) do cytoplazmy, který aktivuje kaspázu-9 a dále spouští apoptotickou kaskádu závislou na kaspáze-3 [8]. Relevantní studie ukázaly, že v proximálních tubulárních epiteliálních buňkách může vyřazení genu Bax nebo upregulace exprese Bcl-2 účinně inhibovat apoptotický proces [9]. Tato studie zjistila, že všechny dávky odvaru Bushen Huoxue Xiezhuo významně snížily expresi proapoptotických faktorů Bax a kaspázy-3 a zvýšily expresi antiapoptotického faktoru Bcl-2, což naznačuje, že odvar Bushen Huoxue Xiezhuo může zlepšit funkci ledvin blokováním apoptotické dráhy.
Renální fibróza je chronické onemocnění ledvin zprostředkované četnými cytokiny, regulované četnými signálními cestami a řízené četnými faktory. Je to běžná cesta vedoucí k terminálnímu onemocnění ledvin, charakterizovanému poškozením renální tkáně, zánětem, ukládáním ECM a tubulárním epiteliálně-mezenchymálním přechodem. Renální fibróza zahrnuje glomerulární fibrózu a tubulointersticiální fibrózu [8]. Studie potvrdily, že hlavním patologickým projevem časného CRF je renální fibróza a oddálení progrese renální fibrózy má velký význam pro snížení renálního poškození a zmírnění progrese renálního selhání [10]. TGF- je klíčový podtyp řídící fibrózu, který reguluje syntézu ECM prostřednictvím signální dráhy Smad. FN se podílí na buněčné adhezi, migraci a montáži ECM. Hlavním buněčným zdrojem nadměrného ukládání ECM jsou myofibroblasty a jejich strukturální transdiferenciace je klíčovým faktorem při výskytu a rozvoji renální fibrózy. Kolagen-1 pochází hlavně z myofibroblastů a -SMA, jako jedna z hlavních morfologických charakteristik a aktivačních markerů myofibroblastů, hladiny exprese obou pozitivně korelují se stupněm renální fibrózy [11]. Relevantní studie ukázaly, že u různých chronických onemocnění ledvin je významně zvýšená exprese mRNA a proteinů -SMA a kolagenu-1, doprovázená těžkou renální fibrózou [12]. V této studii Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction významně snížil expresi markerů fibrózy, jako je -SMA, TGF-, FN a Collagen-1, což naznačuje, že Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction má důležité účinky na zlepšení funkce ledvin a zpomalení progrese renální fibrózy.
Signální dráha HIF-1 /PKM2 úzce souvisí s apoptózou. HIF-1 může podporovat apoptózu transkripční aktivací Bax a inhibicí Bcl-2 a PKM2 může vykazovat účinky regulací proteinů souvisejících s apoptózou, jako je p53 po jaderné translokaci [13]. Jako jeden z klíčových regulátorů hypoxické odpovědi savců může HIF-1 upregulovat expresi TGF prostřednictvím HIF-1 v hypoxických renálních tubulárních epiteliálních buňkách v modelu renální intersticiální fibrózy, čímž aktivuje dráhy související se Smad a indukuje expresi markerů fibrózy, jako je -SMA a kolagen-1. Kromě účasti na regulaci apoptózy podporuje PKM2 také energetické potřeby fibrotických buněk regulací glykolytického metabolismu [14]. Výsledky této studie ukázaly, že hladiny HIF-1, PKM2 a HK2 v renální tkáni modelové skupiny CRF byly významně zvýšeny, zatímco hladiny ve skupinách TCM byly významně sníženy, což naznačuje, že odvar Bushen Huoxue Xiezhuo může inhibovat apoptózu a oddálit renální fibrózu potlačením aktivace HIF-1 /PKM2 dráhy v renální tkáni.
Stručně řečeno, Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction může inhibovat buněčnou apoptózu a fibrózu u potkanů CRF, zlepšit poškození ledvin u potkanů s modelem CRF a jeho mechanismus může souviset s regulací signální dráhy HIF-1 /PKM2.
Reference
[1] American Journal of Health-System Pharmacy. Směrnice klinické praxe Kdigo 2024 pro hodnocení a léčbu chronického onemocnění ledvin[J]. Kidney International, 2024, 105(4S): 117-314.[2] Zhang L, Liu L, Bai M a kol. Hypoxií indukovaná HE4 v tubulárních epiteliálních buňkách podporuje akumulaci extracelulární matrix a renální fibrózu prostřednictvím NF-κB[J]. FASEB Journal, 2020, 34(2): 2554-2567.[3] Hu D, Wang L, Zhang Y a kol. Sanqi perorální roztok zlepšuje renální fibrózu potlačením aktivace fibroblastů cestou HIF-1 /PKM2/glykolýzy u chronického onemocnění ledvin[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2024, 335: 118679.[4] Palsson-Mcdermott EM, Curtis AM, Goel G, a kol. Pyruvátkináza M2 reguluje aktivitu Hif-1 a indukci IL-1 a je kritickým determinantem Warburgova efektu v makrofázích aktivovaných LPS[J]. Buněčný metabolismus, 2015, 21(1): 65-80.[5] Viz EJ, Cullen V. Komentář k aktualizaci pokynů pro klinickou praxi KDIGO pro řízení krevního tlaku u chronického onemocnění ledvin z roku 2021[J]. Nefrologie (Carlton, Vic), 2025, 30(1): e14414.[6] Wu ZH, Cao WX, Tan M a kol. Zkoumání účinků odvaru z rebarbory Xiezhuo na autofagii a apoptózu u potkanů s chronickým selháním ledvin na základě dráhy mTORC1/p70S6K[J]. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research, 2023, 34(2): 321-324.[7] Wang J, Li YT, Liu DW a kol. Pokrok ve výzkumu mechanismu hlavních aktivních složek rebarborových antrachinonů proti renální fibróze[J]. Výzkum tradiční čínské medicíny, 2023, 36(10): 92-96.[8] Askari H, Seifi B, Kadkhodaee M, et al. Ochranné účinky sirovodíku na chronické onemocnění ledvin snížením oxidačního stresu, zánětu a apoptózy[J]. EXCLI Journal, 2018, 17: 14-23.[9] Solà-Riera C, García M, Ljunggren HG a kol. Hantavirus inhibuje apoptózu tím, že brání ztrátě potenciálu mitochondriální membrány prostřednictvím up-regulace faktoru pro přežití BCL-2[J]. PLoS Pathogens, 2020, 16(2): e1008297.[10] Yuan L, Wang L, Wang H a kol. Icariin inhibuje hypermethylaci promotoru Epo, reguluje přechod pericyt-myofibroblast a zlepšuje renální anémii u 5/6 nefrektomizovaných potkanů [J/OL]. Farmakologie a kliniky čínské Materia Medica: 1-17 [2025-12-17]. https://doi.org/10.13412/j.cnki.zyyl.20250408.004.[11] Sravani S, Saifi MA, Godugu C. Riociguat zlepšuje poškození ledvin a fibrózu na zvířecím modelu[J]. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020, 530(4): 706-712.[12] Li L, Zhou G, Fu R a kol. Polysacharidy extrahované z Balanophora polyandra Griff (BPP) zlepšují renální fibrózu a EMT prostřednictvím inhibice Hedgehog dráhy[J]. Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2021, 25(6): 2828-2840.[13] Rana NK, Singh P, Koch B. CoCl2-simulovaná hypoxie indukuje buněčnou proliferaci a mění expresní vzorec genů spojených s hypoxií zapojených do angiogeneze a apoptózy[J]. Biologický výzkum, 2019, 52(1): 12.[14] Wang Z, Yu J, Hao D a kol. Transkriptomické signatury reagující na aktivátor PKM2 TEPP-46 v hyperglykemických lidských renálních proximálních epiteliálních tubulárních buňkách[J]. Frontiers in Endocrinology, 2022, 13: 965379.[15] Chengdu WeCistanche Bio-Tech., Co Ltd. Cistanche pro výživu ledvin[EB/OL]. https://www.xjcistanche.com/cistanche-extract-product/cistanche-for-nourishing-kidney.html, 2022-08-01.
