Srovnání kontrolních účinků rhizosférických půdních bakterií na půdou přenášené choroby Cistanche Deserticola

Abstraktní: Ke screeningu rhizosférických bakterií, které mají kontrolní účinky na půdní choroby Cistanche deserticola, byly použity různé roky výsadby Cistanche deserticola pod listnatými lesy v okrese Tonghua. Pomocí rhizosférické půdy Cistanche deserticola jako materiálu byly bakterie izolovány pomocí metoda gradientového ředění a antagonistické bakterie byly testovány pomocí metody konfrontace destiček. Výsledky ukazují, že z rhizosféry Cistanche deserticola bylo z půdy izolováno 37 bakteriálních kmenů a 8 kmenů mělo inhibiční účinky na vadnutí Cistanche deserticola. Mezi nimi kmeny s kódem 5-2, 11-6 a 11-7 vykazovaly antibakteriální aktivitu. Účinek je nejvýznamnější. 9 kmenů má inhibiční účinky na plíseň Cistanche deserticola a ve srovnání s CK inhibiční účinky dvou bakteriálních kmenů 15-6 a 11-1 na úrovni {{10}},01 Existuje velmi významný rozdíl v průměru bakterií, přičemž tři bakteriální kmeny, 11-1, 15-6 a 15-5, vykazují významné rozdíly na úrovni 0,05. 9 kmenů Má určitý inhibiční účinek na kořenovou hnilobu Cistanche deserticola, ale žádný z nich není významný, přičemž kmeny 11-7 mají největší antibakteriální průměr. Bakterie 5-2, 11-1, 11-7kmeny 15-5 a 15-6 lze dále identifikovat a dále studovat.

Cistanche deserticola

Kliknutím sem zobrazíte čajové produkty Cistanche deserticola

【Požádejte o více】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Klíčová slova:Cistanche deserticola; Širokolistý les; Biologická kontrola; Metoda deskové konfrontace

Cistanche deserticola [1] se pěstuje hlavně v oblasti pohoří Changbai a je hlavní produkční oblastí Cistanche deserticola v Číně, která představuje 85 procent produkce země a 52 procent světové produkce. Cistanche deserticola obsahuje různé bioaktivní složky, jako jsou saponiny a polysacharidy, které byly studovány a mají určité účinky v oblastech, jako je protinádorová, imunologie a výživa. Kvalita a výnos Cistanche deserticola jsou omezeny půdními chorobami Cistanche deserticola [3], což znamená, že patogeny v půdě mohou poškodit kořeny a stonky plodin a způsobit nemoci. Půdní choroby Cistanche deserticola zahrnují hnilobu kořenů, plíseň šedá, hnilobu stonků, vadnutí a náhlou smrt. Cistanche vadnutí je způsobeno Fusarium oxysporum, které může způsobit chorobné skvrny na stoncích a listech, což nakonec vede k poléhání a smrti Cistanche. Patogenní bakterie onemocnění vadnutí Cistanche deserticola jsou většinou Rhizoctonia solani [6]. Infikované místo vytváří chorobné skvrny, šíří se do okolí a nakonec celá rostlina uschne a zemře. Choroba kořenové hniloby Cistanche deserticola je způsobena Fusarium oxysporum [7], která může produkovat velké množství spor pro difúzi a proliferaci, což vede k patologickým změnám v kořenech Cistanche deserticola, neschopnosti normálně absorbovat živiny z půdy a nakonec kořen Cistanche deserticola hnije a umírá.

Květenství Cistanche deserticola

Použití mikroorganismů pro prevenci a kontrolu nemocí je ekologický účinný prostředek biologické ochrany bez znečištění. Přestože chemická kontrola má významné účinky a rychlé účinky a může krátkodobě účinně kontrolovat choroby, její poškození životního prostředí a půdy je často nevratné. Tato studie si klade za cíl vyšetřit rhizosférické bakterie Cistanche deserticola, které mají antibakteriální účinky na choroby přenášené půdou a poskytnout referenční základ pro produkci mikrobiálních látek.

1 Materiál a metody

1.1 Materiály

V červenci 2020 byly ke sběru vzorků půdy ze základny Cistanche deserticola pod širokolistým lesem v Shihu Township v okrese Tonghua použity konvenční metody s roky výsadby 2, 5, 8, 11 a 15 let, stejně jako půda. z oblastí bez výsadby Cistanche deserticola. Vzorky byly chlazeny na 4 stupně v laboratoři a očíslovány pro budoucí použití. Pro kultivaci hub použijte médium PDA a pro kultivaci bakterií peptonové médium z hovězího extraktu.

Pouštní žijící cistanche

Tři patogenní bakterie, Fusarium sp., Rhizoc tonia solani a Fusarium solani, všechny poskytla Mikrobiologická laboratoř Tonghua Normal University.

1.2 Experimentální metody

K izolaci mikrobiálních kmenů v rhizosférické půdě Cistanche deserticola [10] byla použita metoda gradientového ředění a ke screeningu rhizosférických bakterií s antagonistickými účinky byla použita metoda konfrontace ploten. Nejprve aktivujte tři typy patogenních bakterií v médiu PDA [11] a poté vytvořte bakteriální koláč s kolonií směrem dolů. Naočkujte ji do středu média PDA a použijte očkovací kroužek k naočkování bakterií rhizosféry do vzdálenosti 23 mm od okraje misky, přičemž jako slepá kontrola se nenaočkují žádné bakterie. Pro každé ošetření proveďte 3 replikáty, inkubujte při 30 stupních po dobu 4-7 dnů, sledujte přítomnost antibakteriálních kroužků [12] a změřte antibakteriální průměr.

Data byla analyzována pomocí softwaru Excel 2016 pro statistiku dat a softwaru DPS pro analýzu dat.

2 Výsledky a analýza

Izolace a čištění bakterií v rhizosférické půdě Panax ginseng pod listnatými lesy

37 bakteriálních kmenů bylo izolováno z půdy ženšenu pod listnatými lesy a půdy s rhizosférou ženšenu v různých letech výsadby, jak je uvedeno v tabulce 1.

Tabulka 1 Počet a číslování bakterií izolovaných z půdy rhizosféry ženšenu

Poznámka: V tabulce je věk výsadby Cistanche deserticola 0, což se vztahuje na půdu v ​​oblasti, kde se Cistanche deserticola nevysazuje. První číslice představuje věk výsadby Cistanche deserticola a poslední číslice představuje číslo kmene

2.2 Screening biokontrolních bakterií v rizosférické půdě Cistanche deserticola pod listnatými lesy

Prostřednictvím experimentů bylo předběžně vyšetřeno 8 kmenů bakterií s antagonistickými účinky na onemocnění Cistanche wilt, 9 kmenů bakterií s antagonistickými účinky na onemocnění Cistanche wilt a 10 kmenů bakterií s antagonistickými účinky na onemocnění kořenové hniloby ženšenu.

2.2.1 Antagonistický účinek biokontrolních bakterií na onemocnění Cistanche wilt

Mezi 37 kmeny bakterií izolovaných z rhizosférické půdy Cistanche deserticola mělo 8 kmenů inhibiční účinky na Fusarium oxysporum, zatímco 29 kmenů nemělo žádný inhibiční účinek. Podle plochého konfrontačního experimentu byl změřen průměr inhibiční zóny každé antibakteriální bakterie proti patogenu onemocnění vadnutí Cistanche deserticola [13]. Tři opakovaná experimentální data byla vložena do Excelu a na datech byla provedena analýza významnosti rozdílu pomocí softwaru DPS. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 2.

Tabulka 2 Stanovení kontrolního účinku různých antibakteriálních bakterií na vadnutí Cistanche deserticola

Výsledky analýzy ukázaly, že pouze inhibiční průměry {{0}} se významně lišily od kontroly, zatímco inhibiční průměry 5-2, 11-6 a 11-7 byly výrazně odlišné od kontroly. Mezi ošetřeními nebyl žádný rozdíl na úrovni 0.01. Na úrovni 0,05 byl významný rozdíl mezi bakteriemi 11-7 a 11-1, 15-5 a 15-6, zatímco mezi bakteriemi nebyl významný rozdíl 11-7 a 5-2, 11-4, 11-5 a 11-6. Bakterie 5-2, 11-6 a 11-7 lze zvážit pro další výzkum jejich antibakteriálních účinků v terénu.

2.2.2 Antagonistický účinek biokontrolních bakterií na plíseň Cistanche deserticola

Z 37 bakteriálních kmenů izolovaných z rhizosféry půdy Cistanche deserticola mělo 9 kmenů inhibiční účinek na Fusarium oxysporum, zatímco 28 kmenů nemělo žádný inhibiční účinek. Výsledky statistické analýzy jsou uvedeny v tabulce 3.

Tabulka 3 Stanovení kontrolního účinku různých antibakteriálních bakterií na onemocnění vadnutí Cistanche deserticola

Z výsledků analýzy v tabulce 3 je vidět, že ve srovnání s CK je velmi významný rozdíl v antibakteriálním průměru dvou bakteriálních kmenů 15-6 a 11-1 na 0 .01 úroveň a na úrovni 0,05 je velmi významný rozdíl v antibakteriálním průměru tří bakteriálních kmenů 15-6, 11-1 a 15-5. Mezi ostatními faktory a CK nebyl významný rozdíl. Mezi třemi bakteriálními kmeny 11-1, 15-5 a 15-6 mezi různými způsoby léčby nebyl žádný významný rozdíl v antibakteriálním průměru. Mezi 15-6 a jinými bakteriemi byl významný rozdíl v antibakteriálním průměru a nebyl významný rozdíl mezi 5-2, 11-1, 11-3, 11-4, 11-7 a 15-5, ale byl významný ve srovnání s 0-3 a 15-4. 15-6, 11-4 a 15-5 mají nejlepší účinky na kontrolu bakterií a jejich účinnost lze dále testovat.

2.2.3 Antagonistický účinek biokontrolních bakterií na kořenovou hnilobu Cistanche deserticola

Tabulka 4 Stanovení kontrolního účinku různých antibakteriálních bakterií na kořenovou hnilobu Cistanche deserticola

Výsledky v tabulce 4 ukazují, že bakterie 11-7 mají určitý inhibiční účinek na vadnutí ženšenu, ale tento účinek není významný. Těchto 10 skupin bakterií nemá žádný významný inhibiční účinek na patogenní bakterie ve srovnání s kontrolní skupinou.

3 Shrnutí a diskuse

V tomto experimentu bylo izolováno celkem 37 bakteriálních kmenů z rhizosférické půdy ženšenu vysazeného po 2, 5, 8, 11 a 15 let bez ženšenu pod listnatými lesy. Bylo vyšetřeno osm kmenů bakterií s inhibičními účinky na onemocnění vadnutí ženšenu, přičemž kmeny 5-2, 11-6 a 11-7 měly nejvýznamnější antibakteriální účinky. Devět kmenů má inhibiční účinky na onemocnění vadnutí ženšenu. Ve srovnání s CK je velmi významný rozdíl v antibakteriálním průměru dvou bakteriálních kmenů, {{10}} a 11-1, na úrovni 0.01. Na úrovni 0,05 je velmi významný rozdíl v antibakteriálním průměru tří bakteriálních kmenů, 11-1, 15-6 a 15-5. 9 kmenů má určité inhibiční účinky na hnilobu kořenů ženšenu, ale žádný z nich není významný, přičemž kmeny 11-7 mají největší inhibiční průměr.

Superman bylinky cistanche

Mezi nimi bakteriální kmeny 5-2, 11-1, 11-7, 15-5 a 15-6 lze použít jako vynikající antibakteriální bakterie pro kultivaci a množení a dále studovat jejich antibakteriální účinky v terénu. Inhibiční účinek na jiné patogenní bakterie onemocnění ženšenu vyžaduje další zkoumání.

Pouštní ženšen

Využití mikroorganismů ke kontrole chorob rostlin má malý dopad na životní prostředí a člověka, což odráží koncepci udržitelného rozvoje [14], a má široké vyhlídky na rozvoj. Zavedení biologických prostředků do výroby a popularizace také zlepší povědomí lidí o ochraně životního prostředí. Použití bakteriostatických činidel vhodných pro pole přinese dlouhodobé výhody a udržitelné ekologické výhody.

odkaz

[1] Chen Hongyu, Cao Yang, Yang Huaping. Analýza aplikační hodnoty účasti Lin Xiashana na pěstování ženšenu [J]. Úvod do tradiční čínské medicíny, 2019, 25 (06): 67-68 plus 81

[2] Zhang Lianxue, Chen Changbao, Wang Yingping a kol. Výzkum kontinuálního pěstování ženšenu a jeho řešení [J] Journal of Jilin Agricultural University, 2008,30 (4): 481-485491

[3] Park Jingpei, Dai Yueqiang, Zhou Xiaomei. Pokrok ve výzkumu v biologické kontrole nemocí ženšenu [J]. Journal of Jilin Normal University (Natural Science Edition), 2021, 42 (04): 103-107

[4] Předběžná studie o screeningu, identifikaci a hodnocení antibakteriální účinnosti 7 antibakteriálních kmenů ženšenových chorob od Shao Tianwei [D]. Beijing Union Medical College, 2017

[5] Teng Fang. Výzkum onemocnění vadnutí ženšenu [J]. Journal of Plant Pathology, 1989, (02): 122

[6] Gao Wei. Komplexní techniky prevence a kontroly onemocnění vadnutím ženšenu [J]. Přátelé farmářského bohatství, 2018, (19): 29

[7] Chen Dede. Analýza patogenů hniloby kořene ženšenu a hniloby rzi a screening a identifikace antagonistů [D]. Zemědělská univerzita Jilin, 2019

[8] Li Haoyu. Izolace a identifikace antagonistických mikroorganismů v půdě rhizosféry brambor a předběžná studie jejich antibakteriálních účinků [D]. Zemědělská univerzita Vnitřního Mongolska, 2020

[9] Shao Tianwei, Ding Wanlong, Li Yong. Screening a identifikace antagonistických kmenů patogenních bakterií ženšenu [J]. Moderní čínská medicína, 2017, 19 (05): 693-697

[10] Zhang Jiejing, Chen Dede, Gao Jixuan a kol. Screening a identifikace antibakteriálních bakterií proti hnilobě rzi ženšenové a jejich vliv na mikrobiální diverzitu v rhizosférické půdě [J]. Journal of Jilin Agricultural University, 2020, 42 (05): 526-532

[11] Sun Wei. Metoda pro bakteriální aktivaci [J]. Průvodce bezpečností potravin, 2020, (35): 78

[12] Jiang Zhu. Biologická kontrola půdních houbových chorob ženšenu [D]. Univerzita Heilongjiang, 2010

[13] Wei Chuanhao, Wang Meiqin. Inhibiční účinek antibakteriální bakterie GHt-q6 na patogen vadnutí okurky [J]. Shanxi Agricultural Science, 2021,49 (04): 494-498

[14] Song Jinqiu, Tian Canxi. Biologická kontrola endofytů rostlin při chorobách rostlin [J]. Hubei Agricultural Mechanization, 2020, (04): 69-70