Cistanche Tubulosa chrání dopaminergní neurony prostřednictvím regulace apoptózy a neurotrofického faktoru odvozeného z gliových buněk: in vivo a in vitro-Ⅱ

Behaviorální testy

Plavecký test (Zhu et al., 2014)

Koordinace pohybu těla u myší byla měřena pomocí testu plavání. Myši byly jednotlivě umístěny do vodní nádrže (25 cm na výšku a 10 cm v průměru) obsahující 10 cm vody a testovány v tichém prostředí, aby se zaznamenalo jejich stacionární trvání po dobu 5 minut.

Open Field Test (Kawai et al., 1998)

Lokomotorická aktivita byla měřena pomocí testu Open field. Myši byly testovány v tichém a slabě osvětleném prostředí a jednotlivě umístěny do průhledné akrylové nádoby o rozměrech 30 cm × 30 cm × 15 cm se separační mřížkou 6 cm × 6 cm na dně. Myším bylo poskytnuto 10 minut, aby se adaptovaly na prostředí, a poté byly pětkrát po sobě měřeny chůze počtu mřížek a frekvence chovu jednotlivých myší, aby se získaly průměrné hodnoty.

PŘÍRODNÍ CISTANCHE TUBULOSA PRO ZLEPŠENÍ SEXUÁLNÍ FUNKCE PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Odběr vzorků mozkové tkáně

Před odběrem vzorků tkáně byly myši krmeny ad libitum s volným přístupem k vodě a dostávaly lékovou intervenci po dobu 14 po sobě jdoucích dnů. Čtyři myši v každé skupině byly vybrány a rychle dekapitovány. SN (Bregma: -2,75 mm -2,92 mm) z každého zvířete byl izolován a umístěn na led. Mozkové tkáně byly opláchnuty 0,9% ledově studeným roztokem chloridu sodného, ​​aby se odstranila veškerá krev, a vysušeny na filtračním papíru před uložením při -80°C. Čtyři myši z každé skupiny byly intraperitoneálně anestetizovány a jejich hrudníky byly otevřeny. Do levé komory každého zvířete byla poté vložena infuzní jehla. K odstranění krve v oběhovém systému byl odříznut oušek pravé síně a zvíře bylo infuzováno 4 °C normálním fyziologickým roztokem, dokud játra nezbledla, aby se zajistila následná perfuze. Jakmile se výtok z pravé síně vyjasnil, každé zvíře bylo perfundováno 4% fixačním prostředkem paraformaldehydem. Po perfuzi byla mozková tkáň každého zvířete pečlivě rozřezána a následně fixována ve 4% paraformaldehydu po dobu 24 hodin. Fixované mozkové tkáně byly poté opláchnuty pod tekoucí vodou, dehydratovány v odstupňované sérii ethanolových roztoků a vyčištěny v xylenovém roztoku. Následovalo ponoření do parafínu a zalití.

Změny množství DA měřeno pomocí HPLC

Nanopráškový SN z každé skupiny byl umístěn do ledové lázně obsahující 0,9% roztok chloridu sodného (poměr 1:9). Mozková tkáň byla homogenizována za použití ultrazvukového rozrušovače buněk a centrifugována při 1200 otáčkách za minutu po dobu 20 minut při 4 °C, aby se získal supernatant. Pro HPLC byla použita kolona Hypersil AA-ODS (2,1 mm x 200 mm, 5 um) při teplotě kolony 30 °C. Detekce fluorescence byla prováděna při 280 nm λex a 340 nm λem. Objem injekce byl 10 ul.

Exprese TH, GDNF, GFR 1 a Ret detekovaná imunohistochemií

Z každého zvířete byly izolovány parafinové řezy (5 µm silné) individuální mozkové tkáně a umístěny do 40◦C teplé vodní lázně pro zploštění a přilnutí ke skleněným sklíčkům. Všechna tkáňová sklíčka byla inkubována v sušárně při 60 °C po dobu 3–6 hodin, následovalo xylenové odparafinování, dehydratace gradientem ethanolu a získání antigenu inkubací v pufru s kyselinou citrónovou a zahříváním v mikrovlnné troubě po dobu 20 minut. Tkáňová sklíčka pak byla inkubována ve 3% roztoku H202 při teplotě místnosti po dobu 10 minut. Po trojím promytí v PBS byla tkáňová sklíčka inkubována s normálním sérem v uzavřené komoře při teplotě místnosti po dobu 20 minut. Imunohistochemické barvení bylo provedeno podle pokynů výrobce. K výpočtu hodnoty integrované optické hustoty v pozitivně obarvených buňkách byl použit analyzátor obrazu Motic Med 6.0.

Western blot analýza v mozkových tkáních myší

Tato studie hodnotila proteinovou expresi tyrosinhydroxylázy (TH), GDNF, GFR 1, Ret, Bcl2 a Bax. Mozkový lyzát z každé skupiny byl homogenizován po dobu 3{{1{12}}}} min na ledu, následovala nízkoteplotní centrifugace, 20,000 ot./min., při 4 ◦C po dobu 5 minut k odběru supernatantu. Vzorky proteinů byly separovány za konstantního tlaku pomocí 10% SDS-PAGE gelu, jak je popsáno výše. Koncentrace primární protilátky: TH 0,15 mg/ml, GDNF 0,5 mg/ml, GFR 1 0,8 mg/ml, Ret 0,63 mg/ml, Bcl-2 0,34 mg/ml a Bax 0,11 mg/ml. Postup byl stejný jako výše.

PŘÍRODNÍ CISTANCHE TUBULOSA PRO ANTI AGE ANTI-ALZHEIMER PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Statistická analýza

Tato studie používala pro zpracování a analýzu dat statistický software SPSS 20.0. Hodnoty parametrů byly vyjádřeny jako průměr ± standardní odchylka (¯x ± S). ANOVA byla použita pro jednofaktorovou analýzu dat. K porovnání skupin bylo použito LSD nebo Games-Howellův test. P< 0.05 (or P < 0.01) was considered as a statistically significant difference.

VÝSLEDKY

Aktivní složky nanoprášku C. tubulosa

V rozsahu skenování 200–400 nm měly ECH u C. tubulosa a VER ve 330 nm maximální absorpční pík, který se objevil do 20 min. ICA měla maximální absorpční píky při 270 nm a objevila se po 20 minutách (obrázek 1A). Výsledky ukázaly, že negativní vzorky neinterferovaly s detekcí (obrázek 1B). Vzorky a kontrola měly stejné chromatografické píky a negativní vzorek neměl žádné. To ukázalo, že ostatní složky ve vzorku neinterferovaly s měřenou složkou. Kromě toho mohou tři složky a sousední píky dosáhnout základní linie separace a stupeň separace byl větší než 1,5.

C. tubulosa nanoprášek se sníženým MPP+ -indukovaná cytotoxicita v buňkách MES23.5

Životaschopnost buněk MES23.5 byla významně snížena se zvyšujícími se koncentracemi MPP+. Obrázek 2F ukazuje významnou cytotoxicitu různých koncentrací MPP+.

Nanoprášek C. tubulosa snížil cytotoxicitu vyvolanou MPP+- a zvýšil životaschopnost buněk MES23.5. Obrázek 2G ukazuje, že dávky nanoprášku C. tubulosa 10–250 µg/ml vykazovaly na dávce závislé ochranné účinky na buňky MES23.5 ošetřené MPP+-.

Cytomorfologický účinek nanoprášku C. tubulosa

Normální buňky MES23.5 měly dobrou buněčnou adhezi a byly vřetenovitého tvaru s jasnými buněčnými hranicemi a synapsemi. MPP+-poškozené buňky MES23.5 vykazovaly špatnou buněčnou adhezi a smršťování a mnohé byly suspendovány v médiu se staženými synapsemi. Tyto buňky byly agregované, scvrklé a kulaté s vakuolami uvnitř a jádra se rozpadla nebo zhroutila. Nanoprášek C. tubulosa v různých dávkách zlepšil cytomorfologii buněk MES23.5 v různé míře zlepšením buněčné adheze a synaptické clearance skupiny vehikula. Buňky MES23.5 ve skupině léčené vysokou dávkou C. tubulosa vykazovaly morfologii podobnou normální kontrolní skupině (obrázky 2A–E).

Účinek nanoprášku C. tubulosa na expresi TH a apoptózu v buňkách

Obrázek 3 ukazuje významné snížení exprese TH proteinu ve skupině s vehikulem. Exprese TH proteinu se zvýšila odlišně ve skupinách léčených různými dávkami C. tubulosa. Test LSD však ukázal, že mezi třemi léčenými skupinami nebyl žádný významný rozdíl.

Obrázek 4 ukazuje výsledky hodnocení apoptózy pomocí průtokové cytometrie. Rychlost apoptózy ve skupině s vehikulem byla významně vyšší než v ostatních skupinách. Buňky ošetřené různými dávkami nanoprášku C. tubulosa vykazovaly různé stupně poklesu apoptotické rychlosti ve srovnání se skupinou s vehikulem. Buňky ve skupině léčené střední a vysokou dávkou C. tubulosa měly nejvýraznější zlepšení apoptotické rychlosti ve srovnání s ostatními skupinami léčenými C. tubulosa. Test LSD ukázal, že nebyl žádný významný rozdíl mezi dvěma léčenými skupinami, ale také významný rozdíl mezi skupinou s nízkou dávkou.

Vliv nanoprášku C. tubulosa na expresi Bcl2/Bax proteinu v buňkách

Obrázek 5 ukazuje, že exprese Bcl2 proteinu v buňkách skupiny s vehikulem byla významně nižší ve srovnání s normální kontrolní skupinou. Naproti tomu exprese Bax proteinu v buňkách skupiny s vehikulem byla významně vyšší než v normální kontrolní skupině. Skupiny léčené C. tubulosa vykazovaly zvýšenou expresi proteinu Bcl2 a sníženou expresi proteinu Bax v buňkách MES23.5 ošetřených MPP+-. Mezi třemi léčenými skupinami byly v testu LSD významné rozdíly. Tyto účinky byly závislé na dávce.

Behaviorální testy

Výsledky testu Swimming naznačovaly, že myši ve skupině s vehikulem měly relativně dlouhou dobu stacionárního trvání, která se časem prodlužovala. V den 14 měly myši ve skupině s vehikulem významně delší dobu nehybnosti než myši v normální kontrolní skupině. Stacionární trvání myší v

nízká dávkaC. tubulosaléčená skupina se významně nelišila od skupiny myší ve skupině s vehikulem. Stacionární doba trvání myší ve skupině s vysokou dávkou C. tubulosa byla významně kratší než u myší ve skupině s vehikulem.

Výsledky testu v otevřeném poli naznačují, že po poškození vyvolaném MPTP u myší vykazovaly myši ve skupině s vehikulem významný pokles své schopnosti spontánní aktivity, jak ukazuje frekvence chovu. Po 14-denní správěC. tubulosa nanoprášekmyši ve skupinách, kterým byla podávána střední a vysoká dávka, měly významně vyšší frekvenci chovu ve srovnání s myšmi ve skupině s vehikulem (obrázky 6A, B).

Vliv nanoprášku C. tubulosa na obsah DA u myší

Změny v obsahu DA v SN byly stanoveny pomocí HPLC. Bylo zjištěno, že obsah DA v mozku skupiny s vehikulem byl významně snížen. Obsah DA v mozcích PD myší ve skupině léčené nízkou dávkou C. tubulosa se významně nelišil od myší ve skupině s vehikulem. Však,léčba C. tubulosazvýšily hladiny DA v mozcích PD myší způsobem závislým na dávce. Mozky PD myší léčených vysokou dávkou C. tubulosa měly významně vyšší obsah DA než mozky myší ve skupině s vehikulem (obrázek 6C).

Účinek nanoprášku C. tubulosa na expresi TH u myší

Počet TH-pozitivních buněk a hladina exprese TH proteinu v SN MPTP-indukovaných PD myší byly nižší než u myší v kontrolní skupině. Po léčbě C. tubulosa se počet TH-pozitivních buněk a hladina exprese TH proteinu u SN myší s PD indukovanou MPTP zvýšily, se signifikantním rozdílem mezi skupinou léčenou vysokou dávkou C. tubulosa a skupinou s vehikulem testem LSD; a mezi třemi léčenými skupinami byly významné rozdíly (obrázek 7).

Vliv nanoprášku C. tubulosa na proteinovou expresi GDNF a jeho receptorů, GFR 1 a Ret u myší

Proteinová exprese GDNF a jeho receptorů, GFR 1 a Ret, v pozitivně obarvených buňkách, byla hodnocena pomocí imunohistochemie. Analýza Western blot byla použita k vyhodnocení hladin proteinové exprese v SN různých skupin myší. Nálezy pro různé skupiny byly při použití dvou detekčních metod podobné. Exprese GDNF a jeho receptorových proteinů, GFR 1 a Ret, v pozitivně obarvených buňkách v SN myší ve skupině s vehikulem, byla významně nižší než u myší v normální kontrolní skupině. Různé dávky léčby C. tubulosa zvýšily počet GDNF-, GFR 1- a Ret-pozitivních buněk (obrázky 8A–S).

Proteinová exprese GDNF, GFR 1 a Ret v SN myší ve skupině s vehikulem byla významně nižší než u myší v kontrolní skupině. Zvýšení léčebných koncentracíC. tubulosa nanopowervýznamně zvýšily expresi těchto proteinů. Proteinová exprese GDNF, GFR 1 a Ret v SN myší ve skupině léčené vysokou dávkou C. tubulosa byla významně vyšší než u myší ve skupině s vehikulem (P< 0.01; Figures 8T, U). 

Vliv nanoprášku C. tubulosa na proteinovou expresi Bcl2/Bax u myší

Exprese proteinu Bcl2 byla významně snížena a exprese proteinu Bax byla významně zvýšena u SN myší ve skupině s vehikulem (P< 0.01) compared with the mice in the normal control group. High-dose C. tubulosa treatment significantly increased Bcl2 protein expression and significantly reduced Bax protein expression in the brains of the vehicle mice (P < 0.01; Figure 9). LSD test showed there was no significant difference between the middle-dose and high-dose groups but a significant difference between the low-dose group. 

DISKUSE

PD a apoptóza

PD je neurodegenerativní porucha. Podle Zhang et al. (2005) je prevalence 10,7 % u čínské populace ve věku nad 55 let a 1,67 % u populace ve věku nad 65 let. Počet pacientů s PD se každoročně zvyšuje s urychlením globálního stárnutí, což představuje velkou finanční zátěž pro rodiny pacientů. a společnost obecně. V mozku se na syntéze a sekreci DA podílejí především dopaminergní neurony. Jsou široce distribuovány v centrálním nervovém systému a lokalizovány primárně v SN (80 %). TH je klíčový enzym omezující rychlost pro syntézu DA. Inhibice aktivity TH tedy snižuje syntézu DA (Huot a Parent, 2007). Hlavními patologickými a biochemickými změnami PD jsou apoptóza dopaminergních neuronů v SN, významné snížení nigrostriatálního DA a tvorba Lewyho tělísek v dopaminergních neuronech (Dexter a Jenner, 2013). Etiologie PD zahrnuje přidružené genetické faktory, faktory prostředí a stárnutí nervového systému (Allam et al., 2005). Patogeneze PD zůstává v moderní medicíně nejasná. Od konce 60. let 20. století se substituční léčba levodopou úspěšně používá k léčbě PD a byla uznána jako hlavní zlom v léčbě PD. Dlouhodobá aplikace této terapie však způsobuje vedlejší účinky a terapie neléčí základní příčiny PD (Del Sorbo a Albanese, 2008). Proto je pro léčbu PD zásadní aktivní výzkum nových léků nebo léčebných metod zaměřených na ochranu dopaminergních neuronů.

V dřívějších studiích aplikace koncového značení dUTP nick end zprostředkovaného deoxynukleotidyltransferázou ukázala, že 0,6 %–4,8 % dopaminergních neuronů v SN pacientů s PD vykazovalo apoptózu (Mochizuki et al., 1996). Elektronová mikroskopie ukázala apoptotické rysy, včetně chromatické kondenzace a apoptotických tělísek v dopaminergních buňkách (Anglade et al., 1997). Tompkins a kol. (1997) provedli ultrastrukturální analýzu pitev mozkové tkáně pacientů s PD, AD a difuzní chorobou Lewyho tělísek (DLBD). Našli apoptotická tělíska v husté vrstvě SN u pacientů s PD a DLBD, což poskytuje nezvratný důkaz neuronální apoptózy u PD a souvisejících onemocnění. Proto je snížení nebo potlačení apoptózy v dopaminergních neuronech zásadní pro léčbu PD.

Předchozí studie ukázaly, že MPTP vyvolal symptomy podobné PD. MPTP prochází hematoencefalickou bariérou a je metabolizován monoaminooxidázami typu B v astrocytech. Následně se přeměňuje na toxický MPP+, který se hromadí v mitochondriích dopaminergních neuronů prostřednictvím příjmu bílkovin DA transportéru. Vytváří tak nadbytek volných kyslíkových radikálů, které inhibují aktivitu komplexu I mitochondriálního dýchacího řetězce a syntézu ATP. Tyto děje dále podporují tvorbu volných radikálů a reakce oxidačního stresu a nakonec vedou k degeneraci a smrti dopaminergních neuronů. Tato studie tedy použila MPP+ k vytvoření vehikula in vitro v dopaminergních neuronech MES23.5 a MPTP k indukci myši s vehikulem pro vzájemné ověření. Podle výsledků testu MTT MPP+ významně snížil životaschopnost buněk MES23.5, což naznačuje, že MPP+ byl cytotoxický pro dopaminergní neurony. Výsledky také ukázaly, že C. tubulosa účinně zesiluje expresi antiapoptotických proteinů a inhibuje zvýšení apoptózy indukované MPP+-.

PD a GDNF

GDNF je neurotrofní faktor, který byl poprvé izolován Lin et al. (1993). Lin a kol. (1993) také ukázali, že GDNF má specifické nutriční účinky na dopaminergní neurony ve středním mozku krys. GDNF, neurturin (NTN), persephin (PSP) a artemin (ART) tvoří rodinu GDNF. Jsou to strukturálně podobné a funkčně příbuzné sekreční proteiny (Kotzbauer a kol., 1996; Baloh a kol., 1998; Milbrandt a kol., 1998; Woodbury a kol., 1998).

GDNF receptor se skládá ze dvou složek. První složka, GFR , je fixována k vnější membráně glykosylfosfatidylinositolu (GPI) a ukotvena k povrchu konexinu. Druhou složkou je protein Ret. Výzkum ukázal, že existují čtyři různé typy GFR: GFR 1, GFR 2, GFR 3 a GFR 4. GFR 1 je vysokoafinitní receptor GDNF (Onochie et al., 2000; Chen et al., 2001; Lindahl a kol., 2001). Protein Ret je funkčním receptorem GDNF. Homodimerní molekula GDNF se přímo váže na GFR 1 za vzniku komplexů a interaguje s Ret, což vede k dimerizaci a aktivaci Ret. Díky autofosforylaci Ret aktivuje Ret několik běžných TH signálních drah. V nepřítomnosti proteinu Ret způsobuje GDNF kromě exprese mRNA a funkční aktivity C-fos prostřednictvím jeho receptorového proteinu GFR 1 proteinovou fosforylaci MAPK, PI-3 a PLC- (He et al., 2008).

Studie prokázaly, že GDNF měl nejsilnější ochranný účinek na dopaminergní neurony (Rangasamy et al., 2010; Campos et al., 2012). Ve vehikulech používajících MPTP a 6-hydroxydopamin (6-OHDA) k vyvolání poškození dopaminergních neuronů chrání GDNF dopaminergní neurony snížením apoptózy a podporou axonálního růstu k indukci diferenciace kmenových buněk (Lucas et al., 2012; Littrell a kol., 2013). Lin a kol. (1993) ukázali, že GDNF specificky podporuje životaschopnost, diferenciaci a axonální růst dopaminergních neuronů, aby podpořil příjem DA v neuronech. Studie také ukázala, že GDNF nejenže zabránil akutní toxicitě, ale také zmírnil dlouhodobou toxicitu MPP+ nebo 6-OHDA v dopaminergních neuronech a navíc zabránil buněčné smrti ve stresovaných nebo poškozených buňkách (Yu et al., 2010). Kromě toho GDNF podporoval proliferaci a diferenciaci nervových kmenových buněk směrem k dopaminergním neuronům ve středním mozku (Lindsay, 1995), aby zachránil dopaminergní neurony před retrográdní degenerací (Hong-Juan et al., 2011).

Studie ukázaly, že exprese GDNF v SN byla významně snížena ve zvířecích vehikulech (Yang et al., 2010). To naznačuje, že to může být jeden z mechanismů patogeneze u PD potkanů. Injekce 5–15 µg/d GDNF do laterální komory nebo striata zvířete s vehikulem indukovaným MPTP po tři po sobě jdoucí měsíce podpořila nigrostriatální opravu dopaminergního systému u zvířete s vehikulem (Grondin et al., 2002). Studie léčby PD GDNF ve zvířecích vehikulech prokázaly, že intracerebrální injekce GDNF do různých oblastí mozku, jako je SN, nucleus caudatus a laterální komora, zlepšila poruchy pohybu spojené se zvířecími modely PD, včetně snížené motorické aktivity, svalové rigidity a třes (Grondin et al., 2002). GDNF však nemůže přímo procházet hematoencefalickou bariérou. Proto lokální cerebrální injekce GDNF zahrnuje značné riziko a obtíže při klinické aplikaci. Aplikace pro zavedení exogenního GDNF prostřednictvím mikrosfér s řízeným uvolňováním, kapslí s prodlouženým uvolňováním a virových genů jsou stále studovány (Liang et al., 2010; Yang et al., 2010; Qiao et al., 2012). Vzhledem k omezením různých technik pro zavedení exogenního GDNF do mozku jsou pro klinické použití významná neuroprotektivní činidla, která podporují uvolňování endogenního GDNF.

PD aC. tubulosaNanoprášek

PD je častější u dospělých středního věku a starších osob. Teorie TCM předpokládá, že PD je primárně lokalizována v mozku a je způsobena především nedostatkem jater a ledvin, kromě vitální energie a krevní insuficience. Podle této teorie by se tak léčba PD měla zaměřit na povzbuzení ledvin a kostní dřeně.Yang a kol. (2010)použili randomizované, dvojitě zaslepené a placebem kontrolované klinické studie a zjistili, že kombinovaná léčba pomocí Madoparu a receptur na tonizaci ledvin zmírňuje motorické dysfunkce pacientů s PD. Výsledek léčby byl lepší než při jediné terapii pomocí Madoparu. Léčebná účinnost monoterapie TCM nebo preskripce sloučenin u PD byla potvrzena na zvířecích modelech PD a klinických aplikacích. Aplikace TCM k tonizaci ledvin a podpoře krevního oběhu snížily dávkování monoterapie PD pomocí Madoparu. Některé studie naznačují, že TCM zlepšila symptomy PD a chránila dopaminergní neurony, což mohlo úzce souviset s podporou endogenní exprese GDNF (Hong-Juan a kol., 2011; Qiao a kol., 2012).

Sloučenina tonizující ledviny použitá v této studii,C. tubulosananoprášek, obsaženýCistanche, epimediumaRhizoma polygonati. Moderní výzkumy naznačují, že chemické složeníCistancheje ECH, který chrání dopaminergní neurony v SN u MPTP-indukovaných PD myší a inhibuje redukci DA a DA transportéru (Zhao a kol., 2010). Kromě toho zabraňuje 6-OHDA-indukovanému snížení DA a chrání striatální dopaminergní neurony (Chen a kol., 2007). Epimedium inhibuje aktivaci kaspázy-3 a vykonává neuroprotektivní roli (Liu a kol., 2011). Flavonoidy Epimedium účinně podporují proliferaci a diferenciaci nervových kmenových buněk (Yao a kol., 2010).

V této studiiC. tubulosananoprášek antagonizoval zvýšení MPP+-indukovaná apoptóza způsobem závislým na dávce. Výrazně zlepšil expresi TH vin vitrovehikulum a mělo významné antiapoptotické účinky na dopaminergní neurony. Myši s vehikulem indukované MPTP vykazovaly poruchy chování a významně redukovaly expresi TH ve tkáních středního mozku a hladiny DA, což jsou typické patologické rysy PD. Různé dávkyC. tubulosananoprášek zkrátil dobu nehybnosti, zvýšil autonomní aktivity, zlepšil poruchy chování, zvýšil hladiny DA v mozku a zvýšil expresi TH ve vozidlech. Tyto výsledky tomu nasvědčovalyC. tubulosananoprášek vykazoval ochranné účinky v dopaminergních neuronech, čímž zlepšoval poruchy chování vehikul. Různé dávkyC. tubulosananoprášek zvýšil expresi GDNF proteinu a jeho receptorových proteinů v mozku myší s vehikulem. Vysoká dávkaC. tubulosaléčba významně upregulovala expresi Bcl2 a snížila expresi Bax, což nasvědčuje tomuC. tubulosananoprášekmůže podporovat expresi a sekreci GDNF v mozku myši poškozené MPTP. Kromě toho může mít neuroprotektivní účinky na dopaminergní neurony a minimalizovat neuronální apoptózu prostřednictvím neurotrofických podpůrných rolí GDNF.

Tato studie to prokázalaC. tubulosananoprášek vykazoval ochranné účinky na dopaminergní neurony v obouin vitroain vivoa zvýšenou expresi TH pro zlepšení obsahu DA. Zlepšil také poruchy chování u myší s vehikulem indukovaným MPTP, reguloval proteinovou expresi GDNF a jeho receptorových proteinů v SN a měl antiapoptotické účinky u PD myší. Mechanismus, který je základem klinických účinkůC. tubulosananoprášek u PD může zahrnovat zvýšení obsahu endogenního GDNF v mozku a tím snížení poškození dopaminergních neuronů.

PŘÍRODNÍ CISTANCHE TUBULOSA PRO ZLEPŠENÍ SEXUÁLNÍ FUNKCE PHGS75% ECH 30% ACT 12