Cistanche Shaoyao Powder zmírňuje diabetickou nefropatii u myší Db/db regulací polarizace makrofágů a zánětu

2 Výsledky

2.1 Účinky prášku Cistanche Shaoyao na obecný stav db/db myší

Myši v db/m normální kontrolní skupině vykazovaly dobrý duševní stav, štíhlý tvar těla, agilní reakce, lesklou srst a normální příjem vody a výdej moči. Naproti tomu myši db/db v modelové skupině vykazovaly známky únavy, obezity, pomalé reakce, matnou srst, sníženou aktivitu, stočené držení těla a významně zvýšenou spotřebu vody a výdej moči. Myši v každé léčené skupině vykazovaly různé stupně zlepšení celkového stavu ve srovnání s modelovou skupinou.

 

 

podrobnosti o výhodách cistanche

Kliknutím zobrazíte další podrobnosti

 

 

 

2.2 Účinky prášku Cistanche Shaoyao na GSP a UACR u myší db/db

Ve srovnání s normální kontrolní skupinou byly v modelové skupině významně zvýšeny glykovaný sérový protein (GSP) a poměr albuminu ke kreatininu v moči (UACR) (P<0.01). After treatment, GSP and UACR levels significantly decreased in all Cistanche Shaoyao Powder groups (P<0.05, P<0.01), indicating therapeutic efficacy (see Table 2).

 

Podpůrná služba Wecistanche-Největší vývozce cistanche v Číně:
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

 

2.3 Účinky prášku Cistanche Shaoyao na sérum Scr, BUN, TC a TG u myší db/db

Sérový kreatinin (Scr), dusík močoviny v krvi (BUN), celkový cholesterol (TC) a triglyceridy (TG) byly významně zvýšené v modelové skupině ve srovnání s normální skupinou (P<0.01). All treatment groups showed significant reductions in Scr and BUN (P<0.01). TG levels decreased in the high-dose Cistanche Shaoyao Powder and irbesartan groups (P<0.05, P<0.01), while TC levels significantly decreased in the medium-dose, high-dose, and irbesartan groups (P<0.01) (see Table 3).

2.4 Účinky prášku Cistanche Shaoyao na sérové ​​TNF-, IL-10 a MCP-1 u myší db/db

Hladiny TNF- a MCP-1 byly významně zvýšeny a hladiny IL-10 významně sníženy v modelové skupině ve srovnání s normální skupinou (P<0.01). Treatment with Cistanche Shaoyao Powder significantly reduced TNF-α (P<0.05, P<0.01), decreased MCP-1 in the medium- and high-dose groups (P<0.01), and increased IL-10 levels (P<0.01), with statistically significant differences (see Table 4).

 

2.5 Účinky prášku Cistanche Shaoyao na renální histopatologii u db/db myší

Barvení HE a PAS ukázalo, že ledviny normálních myší měly intaktní glomeruly, normální objem, žádnou proliferaci nebo expanzi mesangiálních buněk a pravidelné renální tubuly bez zjevného ukládání kolagenu. Naproti tomu modelová skupina vykazovala glomerulární hypertrofii, mezangiální proliferaci, rozšířené mezangiální oblasti, infiltraci zánětlivých buněk a vakuolární degeneraci tubulárních epiteliálních buněk. Barvení PAS odhalilo významné ukládání glykogenu a Massonovo barvení ukázalo zvýšenou akumulaci kolagenových vláken. Všechny léčebné skupiny vykazovaly různé stupně patologického zlepšení (viz obrázek 1).

 

2.6 Účinky prášku Cistanche Shaoyao na renální intenzitu fluorescence F4/80 u db/db myší

Intenzita fluorescence F4/80, marker infiltrace makrofágů, byla v modelové skupině významně zvýšena ve srovnání s normální skupinou (P<0.01). All treatment groups showed significantly reduced fluorescence intensity (P<0.05, P<0.01) (see Figure 2, Table 5).

 

2.7 Účinky prášku Cistanche Shaoyao na expresi CD206 v renální tkáni db/db myší

Imunohistochemie ukázala, že exprese CD206 v glomerulech i intersticiu byla v modelové skupině ve srovnání s normální skupinou snížena. Exprese CD206 byla významně zvýšena ve skupinách s nízkou, střední a vysokou dávkou prášku Cistanche Shaoyao Powder a ve skupině s irbesartanem (viz obrázek 3).

 

2.8 Účinky prášku Cistanche Shaoyao na renální expresi TNF-, IL-10, iNOS a Arg-1 mRNA u myší db/db

Exprese mRNA TNF- a iNOS byla v modelové skupině významně zvýšená, zatímco hladiny mRNA IL-10 a Arg-1 byly významně sníženy (P<0.01). Treatment with Cistanche Shaoyao Powder significantly reduced iNOS mRNA expression across all doses (P<0.01), decreased TNF-α mRNA in the medium- and high-dose groups (P<0.01), and significantly increased IL-10 and Arg-1 mRNA levels (P<0.05, P<0.01) (see Table 6).

 

2.9 Účinky prášku Cistanche Shaoyao na expresi proteinů iNOS, Arg-1, CD86 a CD206 v renální tkáni

Modelová skupina vykazovala významně zvýšenou expresi iNOS a CD86 proteinu a sníženou expresi Arg-1 a CD206 (P<0.01). Treatment with Cistanche Shaoyao Powder significantly reduced iNOS and CD86 protein expression (P<0.05, P<0.01) and increased Arg-1 and CD206 expression (P<0.05, P<0.01) (see Figure 4, Table 7).

 

3 Diskuse

Diabetické onemocnění ledvin (DKD) je jedním z nejčastějších chronických onemocnění ledvin. Mezi jeho charakteristické patologické rysy patří přetrvávající proteinurie, strukturální poškození ledvinových tkání a progresivní renální dysfunkce. Jako hlavní mikrovaskulární komplikace diabetu se DKD stala hlavní příčinou konečného stádia renálního onemocnění (ESRD) [20]. Zatímco kontrola glykémie, krevního tlaku a lipidů může oddálit progresi onemocnění, v současné době neexistují žádné účinné terapie, které by DKD úplně zastavily. Nedávné studie prokázaly významnou infiltraci makrofágů v ledvinách pacientů s DKD [21], což poskytlo nový pohled na její základní mechanismy.

Podle klasické čínské medicíny je DKD výsledkem nevyřešenýchXiaokesyndrom chřadnutí-žízně způsobený nedostatkem sleziny a ledvin, vedoucí k chronickému poškození ledvinových cév, vyčerpání qi a jin a nakonec k nedostatku jak qi, tak krve. Vlhkost a krevní stáze se zakořenily v ledvinách a tvoří jádro patogeneze „vazby vlhké stáze s nedostatkem sleziny a ledvin“.

Cistanche Shaoyao prášek, složený zCistanche deserticola, Paeoniae Radix Alba, Poria kokos, Atractylodes macrocephala, Chuanxiong RhizomaaAlisma orientalis, obsahuje vyvážené složení, které povzbuzuje krev a slezinu, podporuje diurézu a reguluje čchi, krev a tekutiny. Moderní farmakologický výzkum ukázal, že jeho aktivní složky – paeoniflorin, triterpeny, polysacharidy, kyselina ferulová a ligustrazin – mají protektivní účinky na ledviny tím, že inhibují zánět, oddalují fibrózu a regulují metabolismus glukózy a lipidů [22].

Studie in vitro potvrdily, že kyselina ferulová a paeoniflorin v tomto vzorci přímo modulují polarizaci makrofágů a podporují posun z fenotypu M1 na M2 [23–25]. Paeoniflorin například inhibuje signalizaci TLR2 za účelem snížení polarizace M1 a zánětu za hyperglykemických podmínek [26].

V této studii vykazovaly db/db myši v modelové skupině špatný celkový stav, zvýšené GSP, UACR, Scr, BUN, TC a TG spolu s glomerulární hypertrofií, mezangiální proliferací, zánětlivou infiltrací, akumulací glykogenu a zvýšenou depozicí kolagenu. Léčba práškem Cistanche Shaoyao významně zlepšila tyto parametry, což naznačuje jeho vícecílové renální ochranné účinky.

Chronická hyperglykémie a její metabolity indukují poškození ledvin prostřednictvím přetrvávajícího zánětu a fibrózy [27]. Klíčovými přispěvateli k tomuto procesu jsou makrofágy, včetně rezidentních i infiltrujících podskupin [28–30]. Klinická data ukazují, že infiltrace makrofágy koreluje s proteinurií, renálním poklesem a špatnou prognózou [7]. TNF-, klíčový prozánětlivý cytokin, poškozuje endoteliální buňky a filtrační bariéru, stimuluje expresi MCP-1 a podporuje nábor monocytů/makrofágů, čímž udržuje lokální zánět [31,32].

Makrofágy jsou vysoce plastické a mohou se polarizovat na podskupiny M1 (prozánětlivé) nebo M2 (protizánětlivé). Makrofágy M1 vylučují TNF-, IL-6, IL-12 a iNOS, zatímco makrofágy M2 exprimují CD206 a Arg-1 a vylučují IL-10 [33–35]. Tyto podtypy interagují s renálními vnitřními buňkami a přispívají k zánětu a fibróze [36,37]. Obnovení rovnováhy M1/M2 je tedy slibnou strategií léčby DKD [38–40].

Tato studie zjistila, že prášek Cistanche Shaoyao snižuje sérové ​​TNF- a MCP-1 a zároveň zvyšuje IL-10. Fluorescence F4/80 byla snížena, což ukazuje na menší infiltraci makrofágů. mRNA exprese TNF- a iNOS se snížila, zatímco IL-10 a Arg-1 vzrostly. Imunohistochemie a western blotting ukázaly zvýšenou expresi CD206 a Arg-1 a sníženou expresi iNOS a CD86, což potvrzuje posun od makrofágů M1 k M2.

Závěrem lze říci, že prášek Cistanche Shaoyao zmírňuje progresi DKD u db/db myší inhibicí polarizace M1 a podporou polarizace M2, snižuje zánět a oddaluje fibrózu. Budoucí studie budou dále zkoumat jeho molekulární mechanismy in vitro.

Omezení:Tato studie používala spíše odvar než původní práškovou formu. Zatímco odvar je standardní v klinických a farmakologických studiích, rozdíly v chemickém složení a biologické dostupnosti mezi dávkovými formami vyžadují další zkoumání.