Kapsle na bázi cistanche zmírňují chronickou nebakteriální prostatitidu u potkanů modulací střevní mikroflóry, sérových metabolitů a signální dráhy SPHK1/S1P1/PI3K/Akt
Jul 04, 2025
3.5 Metabolomická analýza séra CBC u EAP potkanů
3.5.1 Vícerozměrná statistická analýza fekálního metabolismu
Analýza hlavních složek (PCA) odhalila jasné skupinové separace v pozitivním iontovém módu mezi iontynormální, modelové a vysokodávkované CBC skupiny, sCBC skupina shlukování blíže k normální skupiněa dále od modelové skupiny. V režimu negativních iontů bylo pozorováno částečné překrývání mezi normálními a modelovými skupinami, zatímco vzorky ošetřené CBC stále vykazovaly dobré rozlišení (obrázek 5).
Částečná diskriminační analýza metodou nejmenších čtverců (PLS-DA) potvrdila silný klasifikační účinek ve všech třech skupinách v obou režimech ionizace. The200násobný permutační testověřila spolehlivost modelu pomocí aQ² intercept pod 0,05, což znamená, že nedochází k nadměrnému vybavení. Sestupný trend vhodnoty R2 a Q2podél osy X dále potvrdila stabilitu modelu (obrázek 6).
CISTANCHE NA BÁZI FORMULOVÉHO ČAJU
3.5.2 Identifikace diferenciálních metabolitů ovlivněných CBC
Diferenciální sérové metabolity byly filtrovány na základěVIP > 1od PLS-DA,násobná změna Větší nebo rovna 1ap < 0,05. Po vyloučení exogenních sloučenin,10 významných endogenních metabolitůbyly identifikovány (tabulka 9).
3.5.3 Analýza obohacení dráhy KEGG
To ukázala analýza KEGG obohacení různých metabolitůLéčba CBC může modulovat klíčové metabolické dráhypodílí se na chronické prostatitidě. Obohacené cesty zahrnovaly:
Metabolismus sfingolipidů
Metabolismus retinolu
Metabolismus glycinu, serinu a threoninu
Metabolismus glycerofosfolipidů
Metabolismus kyseliny arachidonové(Obrázek 7)
Je známo, že tyto cesty hrají důležitou roliimunitní regulace, oxidační stres a zánět.
3.5.4 Korelace mezi diferenciálními metabolity a střevní mikrobiotou
Spearmanova korelační analýza byla provedena mezi 10 různými metabolity a významně změněnými bakteriálními taxony. Mezi pozoruhodné korelace patří:
PA(6-keto-PGF1 /i-20:0): pozitivně koreluje sLactobacillusaRomboutsia ilealis, negativně sNeglectibacter timonensis
SM[d16:2/20:4-2OH]: pozitivně koreluje sParaprevotella claraaRomboutsia ilealis
PS[18:1/20:0]: pozitivně koreluje sRomboutsia ilealis, negativně sOscillospiraceae
lysoPA(0:0/18:0): negativně koreluje sLactobacillusaRomboutsia ilealis, pozitivně sNeglectibacter timonensis
Kyselina ureidoizobutyrová: negativně koreluje sParaprevotella clara
16(R)-HETEa(2R,3R)-2-aminooktadekan-l,3-diol: pozitivně koreluje sNeglectibacter timonensis
sfingosin: negativně koreluje sRomboutsia ilealis, pozitivně sNeglectibacter timonensis
lysoPA(18:0/0:0)aRetinoyl-glukuronid: negativně koreluje sBifidobacterium animalisaRomboutsia ilealis(Obrázek 8)
Tyto korelace naznačujísilná vazba mezi metabolomickými změnami vyvolanými CBC a modulací střevní mikroflóry.
3.6 Regulace dráhy SPHK1/S1P1/PI3K/Akt společností CBC
Analýza Western blot to ukázalaExprese proteinů SPHK1 a S1P1 byly v modelové skupině významně zvýšenéve srovnání s normální skupinou. CBC (vysoká dávka) významnědownregulované hladiny proteinů SPHK1 a S1P1. Mezi skupinami nebyl pozorován žádný významný rozdíl v expresi SPHK2 (obrázek 9, tabulka 10).
navícPI3K a Akthladiny exprese byly významně sníženy v modelové skupině, zatímcop-PI3K a p-Akthladiny byly významně zvýšeny, což ukazuje na aktivaci dráhy. CBC léčbaobnovené úrovně PI3K a Aktainhiboval jejich fosforylaci, sníženípoměry p-Akt/Akt a p-PI3K/PI3K.
Tyto výsledky tomu nasvědčujíCBC inhibuje signální dráhu SPHK1/S1P1/PI3K/Akt, což přispívá k jeho protizánětlivému účinku.
4. Diskuse
Chronická nebakteriální prostatitida (CNP) má na svědomí více90 % všech diagnóz prostatitidya je spojen s komplexní etiologií, včetněpatogenní mikrobiální infekce, oxidační stres, imunitní dysregulace a autoimunitní reakce [20–21].
Nedávné důkazy tomu nasvědčujízánět a autoimunitajsou ústřední pro patogenezi CNP [22–24]. Theexperimentální potkaní model autoimunitní prostatitidy (EAP)., který napodobuje lidskou CNP v histopatologii a imunitní odpovědi, byl proto vybrán [25].
V našich předchozích studiích farmakochemie séra byly složky CBC nalezeny vvyšší množství ve stolici než v séru, což naznačujestřevní interakce jako primární cesta účinku(viz rozšířené publikační materiály CNKI).
CBC zlepšuje patologii prostaty a zánětlivé indexy
Barvení HE ukázalo, že CBC zmírnillymfocytární infiltrace, obnovenaacinární strukturaa zvýšilžlázové sekrety. CBC výrazněsnížený počet leukocytův homogenátech prostaty a obnovenhustota lecitinového těla-oba klíčové diagnostické markery CNP [26–28]. Zánět vede k poškození epitelu a snížené sekreci lecitinu, zatímco aktivované makrofágy pohlcují lecitinová tělíska [29]. CBC účinně zvrátila tyto patologické změny.
CBC takésnížené prozánětlivé cytokiny(TNF-, IL-1, IL-6, IL-8, IL-2, iNOS) azvýšené protizánětlivé IL-10podporuje jeho silné protizánětlivé působení.
CBC reguluje dysbiózu střevní mikroflóry
CNP je úzce spojena snerovnováha střevní mikroflóry, což může snížitmastné kyseliny s krátkým řetězcem (SCFA)a narušit střevní bariéru, což umožňujeLPS translokacea spouštění zánětu prostaty prostřednictvímmikrobiálně asociované molekulární vzory (MAMP) [30].
Studie to ukazujíCistanche polyfenolyzlepšit nerovnováhu mikroflóry a modulovat klíčové taxony, kterých se to týkázánětlivé onemocnění střev (IBD)[31]. V této studiiLactobacillus a Bifidobacterium animalisbyly u EAP potkanů vyčerpány, ale zotavily se po léčbě CBC. Je známo, že tato probiotika zmírňují urogenitální záněty [32–33]. naproti tomuVeillonella, často obohacený o autoimunitní stavy [34], byl zvýšen u EAP potkanů a snížen po podání CBC. Podobně,Prevotellaceae, spojený s karcinomem prostaty [35], byl obohacen ve skupině EAP a snížen o CBC.
CBC moduluje klíčové metabolické cesty
Metabolomika odhalenaelevace sfingosinuu EAP potkanů, významně snížené CBC, což naznačuje zapojení dometabolismus sfingolipidů. Sfingolipidy jsou klíčové strukturní a signální molekuly, které se účastníbuněčný růst, apoptóza a imunitní regulace [36].
Sfingosin-1-fosfát (S1P), syntetizovalSPHK1/2, je silný lipidový mediátor, který se váže naS1P receptory (S1PR)regulovat obchodování s imunitními buňkami a podílí se na němzánětlivých a autoimunitních onemocnění[37–39]. Modulátor S1PRFTY720 (fingolimod)bylo prokázáno, že snižuje zánět a poškození tkáně v modelech EAP [40].
S1P také aktivuje downstream cesty jakoPI3K/Akt, které jsou spojeny s chronickým zánětem. V naší studii CBCdownregulované SPHK1 a S1P1a inhibovánFosforylace PI3K a Akt, což naznačuje regulační účinek na tuto kritickou osu.
Závěr
Tato studie, integracesekvenování střevní mikroflóry a necílená metabolomika, to dokazujeKapsle na bázi Cistanche (CBC)účinně:
Zlepšitpoškození tkáně prostaty
Potlačitzánětlivé cytokiny
Obnovitprospěšná střevní flóra
Regulovatmetabolismus sfingolipidů
InhibovatSignalizace SPHK1/S1P1/PI3K/Akt
Tato zjištění poskytujípřesvědčivé důkazypro potenciál CBC jako avícecílová bylinná terapie pro chronickou nebakteriální prostatitidua nabídnout avědecký základ pro jeho rozšířenou klinickou aplikaci.
