Čínská medicína Cistanche Chemické složení a analýza složek v těle Ⅱ

Zkratka

Cistancheje již od starověku považována za silnou a výživnou vzácnou tradiční čínskou medicínu. Je známá jako "pouštní ženšen". Poprvé bylo zaznamenáno v roce "Shen Nongova Materia Medica" a je uveden jako nejvyšší stupeň. Má funkcevyživující jang ledvin,doplnění esence a krve, zvlhčení střeva vyprazdňování aoddalování stárnutí. Často se používá k léčbě mužské impotence, ženské neplodnosti, nachlazení a průjmu, studené bolesti v pase a kolenou, suchosti krve a zácpě. Cistanche zaznamenané v části 1 „Čínského lékopisu (vydání 2015)“ jsou sušené masité stonky se šupinatými listyCistanche deserticola YCMaaCistanche tubulosa (Schenk) R. Wight. Vzhledem ke zmatenosti léčivých materiálů Cistanche, které jsou v současnosti na trhu, se většina kontroly kvality Cistanche zaměřuje pouze na fenylethanoidové glykosidy. Pro lepší hodnocení kvalityCistanchea zajistit účinnost léčivých materiálů a produktů, tento článek shrnuje pokrok ve výzkumu analýzy chemického složení a analýzy složení in vivo Cistanche s cílem vytvořit komplexnější a účinnější metodu analýzy, která vyrovná současnou analýzu kvality a nedostatky in vivo. studie.

Doplněk Cistanche

Oddíl 1 Pokrok výzkumu v analýze chemických složektradiční čínská medicína Cistanche

Přírodní prostředí a regionální podmínky přímo ovlivňují kvalitu čínských léčivých materiálů nebo přípravků a kvalita čínských léčivých materiálů nebo přípravků úzce souvisí s bezpečností klinické medikace. Pro zlepšení úrovně kontroly kvality léčivých materiálů nebo přípravků Cistanche je proto zvláště důležité stanovit přesné, spolehlivé a rychlé metody stanovení. V posledních letech odvedli domácí i zahraniční vědci mnoho práce na analýze chemických složek Cistanche a také vyzkoušeli různé analytické metody, včetně fingerprintingu, kolorimetrie, HPLC-DAD, HPLC-ELSD, LC-MS, a GC-MS. , FT-IR a 2D-IR atd.

1. Vzor otisku prstu

Metoda otisků prstů je v souladu s konceptem „integrity“ v tradiční čínské medicíně. Jedná se o praktickou metodu kontroly kvality pro identifikaci pravosti tradiční čínské medicíny a hodnocení její konzistence kvality. Je vysoce uznávána v mezinárodním společenství.

Zhu Nailiang a spol! použil UPLC ke stanovení otisků prstů pouštních léčivých materiálů Cistanche a Cistanche tubulosa, kalibroval 15 společných píku a identifikoval 5 společných píku, což ukazuje, že otisky dvou Cistanche shromážděných v lékopisu se významně liší. Tato metoda je jednoduchá a reprodukovatelná a lze ji použít k rozlišení pouštních léčivých materiálů Cistanche a Cistanche tubulosa a hodnocení kvality léčivých materiálů. Zhu Xujiang et al.12 použili HPLC ke stanovení otisků prstů 10 šarží Lanzhou Cistanche ke studiu inherentního rozdílu v kvalitě mezi Lanzhou Cistanche a Cistanche deserticola.

Výsledky ukazují, že ve srovnání s Cistanche má Lanzhou Cistanche mnoho chybějících charakteristických vrcholů, zejména nedostatek charakteristických vrcholů echinaceaside: a podobnost mezi Lanzhou Cistanche a kontrolními léčivými materiály Cistanche je pouze asi {{0}}.04 , což naznačuje, že Lanzhou Cistanche se liší od skutečného Cistanche. Je v tom velký rozdíl. Ma Zhiguo a kol. použil HPLC k vytvoření otisků 10 dávek kousků odvaru Sha Rong a kalibroval 7 běžných píků. Výsledky hodnocení podobnosti byly všechny vyšší než 0,92, což naznačuje, že otisky kousků odvaru Sha Rong jsou specifické a mohou poskytnout určitou úroveň kontroly kvality kousků odvaru Sha Rong. odkaz. Xiong Yuanjun a kol. použil HPLC chromatografii a použil 6 fenylethanoidových glykosidů jako reference pro stanovení otisků prstů a analytických metod pro Cistanche z 9 různých původů v autonomní oblasti Xinjiang Uygur. Výsledky ukázaly, že metoda byla stabilní, spolehlivá a reprodukovatelná. Má dobré vlastnosti a lze s ním zhodnotit kvalitu Cistanche.

Xie Jieina et al [použili chromatografickou kolonu Agilent Zorbax Extend-C8 (150mm x 4,6 mm, 5μm) s použitím 0,095% vodného roztoku kyseliny fosforečné-0,095% fosforečné roztok kyseliny acetonitrilu jako mobilní fáze s lineárním gradientem eluce, eluční gradient byl 0~18 min, 96 % A-4% B; 18~40min, 88%A-12%B; 40~65 min, 85 % A-15 % B; 65~ 75 min, 85 % A-15 % B; 75~ 90 min, 80 %A-20%B; 90~ 100 min, 80%A-20%B; 100 min, 96%A-4%B, detekční vlnová délka 330nm; objemový průtok: 1 ml/min; teplota je 30 stupňů. Byly stanoveny HPLC otisky 16 šarží pouštní cistanche různého původu. Výsledky ukázaly, že vnitřní kvalita léčivých materiálů pouštních cistanche z různých zdrojů se velmi lišila. Touto metodou lze hodnotit kvalitu pouštních léčivých materiálů cistanche. Tu Pengfei a kol. (použil vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii na reverzní fázi ke studiu fenylethanoidových glykosidů obsažených ve 4 domácích léčivých materiálech a 1 variantě a 25 komerčních léčivých materiálech Cistanche a analyzoval jejich HPLC spektra. Výsledky ukázaly, že všechny tyto suroviny obsahují mnoho druhů fenylethanoidních glykosidů, mezi nimiž fenylethanoidní glykosidy obsažené v Cistanche, Cistanche halophylla, Cistanches alba a Cistanches tubulosa mají podobné fenylethanoidní glykosidy, zatímco Cistanche je zcela odlišný od ostatních druhů Obsah echinakosidu a verbascosidu Obsah je nejvyšší v Cistanches . píky léčivých materiálů Cistanche byly kalibrovány. Výsledky ukázaly, že otisky různých šarží léčivých materiálů Cistanche byly významně odlišné, jak ukazují zřejmé rozdíly v počtu chromatografických píků a plochách chromatografických píků různých šarží léčivých materiálů Cistanche. Výsledky hodnocení podobnosti ukázaly, že podobnost malého počtu vzorků není vysoká. Yang Jianhua a kol. 8 zvolil RP-HPLC ke stanovení otisku fenylethanolových glykosidů v Cistanche a porovnal otisky prstů kultivovaných produktů s divokými produkty, různými růstovými stádii a různými léčivými částmi. Studie kalibrovala 19 běžných chromatografických píků a zjistila, že otisky prstů kultivovaného a divokého halo Cistanche jsou velmi podobné.

Typy a relativní obsahy chemických složek jsou stabilní. Otisky prstů v různých růstových stádiích nebo různých částech mají také dobrou konzistenci, ale jsou zřejmé rozdíly v obsahu charakteristických vrcholů. Tato metoda má dobrou reprodukovatelnost a může lépe odrážet vnitřní kvalitu charakteristických složek Cistanche salina. Shi a kol. 9 porovnal otisky HPLC a ISSR (inter-simple sequence repeat) genové otisky Cistanche, Cistanche tubulosa, solené Cistanche a Cistanches a zjistil, že oba otisky byly dobré pro léčivé materiály Cistanche. Proveďte diferenciaci a kontrolu kvality a autor se domnívá, že vzhledem k nízkému obsahu echinacey v Cistanche nemůže Cistanche nahradit Cistanche nebo Cistanche tubulosa v lékopisu. Jiang a kol. (101 zavedl metodu HPLC-DAD-MS k provedení analýzy otisků prstů na 36 léčivých materiálech z masové pasty různého původu (včetně 14 pasty z pouštního masa, 14 tubulárních Cistanche, 2 solených Cistanche a 6 Amaranthus) otisků prstů. Analýza a identifikace 18 fenylethanolových glykosidových sloučenin Výsledky ukázaly, že Cistanches tubularis, Cistanche halophylla a Cistanche mají nejvyšší podobnost, zatímco podobnost Cistanche je nižší, pouze 0,053.

2. Atomová absorpční spektrofotometrie

S komplexním pochopením aktivních složek tradiční čínské medicíny lidmi přitahují anorganické prvky stále větší pozornost. Zejména v posledních letech lze některé účinky tradiční čínské medicíny, které nelze vysvětlit teorií tradiční čínské medicíny, vysvětlit fyziologickými účinky stopových prvků. Studium stopových a makroprvků v Cistanche a jejich odpovídající kalibrace prvků a standardizované metody detekce jsou proto velmi důležité pro vytvoření a zlepšení systému kontroly kvality a bezpečnosti společnosti Cistanche. Atomová absorpční spektrofotometrie se postupně stala hlavní metodou detekce anorganických prvků díky své vysoké citlivosti, vysoké přesnosti, širokému aplikačnímu rozsahu, malému objemu vzorku a snadnému ovládání přístroje. Chen Weijun a kol. (použil mokrou metodu k přímé digesci prášku Cistanche a použil plamenovou atomovou absorpční spektrometrii (FAAS) k přímému měření Pb, Cd a Cu v něm. Výsledky ukázaly, že Cistanche ze tří hlavních produkčních oblastí v Xinjiang nepřekročil limit a byl bezpečný pro klinické použití (121 použil plamenovou atomovou absorpční spektrofotometrii a metodu grafitové pece, aby zjistil, že pouštní Cistanche obsahuje řadu stopových prvků nezbytných pro lidské tělo. Obsah těchto stopových prvků je vysoký. až nízká je Ca, Fe, Mg, Cu, Zn, Pb a Sn a mají vysoký obsah Mg, Ca, Fe a Zn, které mají důležité fyziologické funkce, nutriční účinky a význam pro klinickou diagnostiku a léčbu et al. (3) použili plamenový atomový absorpční spektrofotometr ke stanovení stopových prvků manganu a stopových prvků v Xinjiang Cistanche. Byl porovnán obsah mědi a byly porovnány dvě metody zpracování vzorků suché a mokré digesce. Výsledky ukázaly, že suchá ani mokrá digesce neovlivnily výsledky měření. Xu Fang a kol. 4) Pomocí emisního spektrometru s indukčně vázaným plazmatem (ICP-AES) byl změřen obsah deseti stopových prvků v divokém Cistanche, včetně Li, Mn, Fe, Cu, Zn, Se, Sr, Mo, [a Ca].

3. Vysokoúčinná kapalinová chromatografie

Vysokoúčinná kapalinová chromatografie je široce používána při stanovenífenylethanolové glykosidyv mletém mase díky jeho výhodám vysoké citlivosti a širokému lineárnímu rozsahu. Dong et al.15 vytvořili vysoce účinnou metodu v kapalné fázi, která používá absorpční koeficient místo výšky píku nebo plochy píku, a průběžně určovali 7 fenylethanolových glykosidů v Cistanche tubulosa a Cistanche prostřednictvím poměru absorbančních koeficientů echinaceaside a dalších. sloučeniny. Obsah, včetně strany echinacey, sarkobasinu A, verbascosidu, verbascosidu, 2'acetyl verbascosidu, 6'-acetyl verbascosidu a cistancheosidu C. Výsledky této metody jsou v souladu s metodou externího standardu a výsledky ukazují, že je přesná a spolehlivý. Song Qingqing et al.16 vytvořili online systém pro mikroextrakce s tlakovým rozpouštědlem, turbulentní průtokovou chromatografii, vysoce výkonnou kapalinovou chromatografii a tandemový systém (online PLME-TFC-HPLC). Prášek stopového vzorku byl umístěn do extrakční nádrže a poté vložen do pouzdra předkolony. Potrubí etherketonu (PEEK) je připojeno ke konci objímky předkolony a vodná fáze proudí potrubím PEEK vysokou průtokovou rychlostí, aby se vytvořil vysoký tlak, aby se dosáhlo online mikroextrakce Cistanche tlakovým rozpouštědlem. Současně jsou zavedeny dva elektronické šesticestné ventily pro dokončení celé analýzy. Proces je rozdělen do fáze extrakce a fáze eluce, aby se dosáhlo současného stanovení obsahu tří fenylethanoidových glykosidů v Cistanche tubulosa: echinakosidu, verbascosidu a isomurabastosidu. Guo Xiongfei a spol.!! 7 použil metodu HPLC-UV k porovnání obsahu celkových glykosidů echinaceaside, verbascosidu a fenylethanolu v různých částech Cistanche z různého původu v Hotanu, Xinjiang. Výsledky ukázaly, že maximální rozdíly v obsahu echinaceasidu, verbascosidu a celkových fenylethanolových glykosidů v kořenech a vrcholcích stejné rostliny Cistanche byly až 22,4krát, 16,7krát a 8,7krát, v tomto pořadí. Účinné látky Cistanche jsou distribuovány především v kořenech. Ma Zhiguo a kol. 118 použil vysoce výkonnou metodu v kapalné fázi s reverzní fází k současnému stanovení tří fenylethanoidových glykosidů (verbascosid, chryzophyt a 2'-acetyl chrysophyt) v Amaranthus aurantiacus. Výsledky ukázaly, že obsah chryzofytu v A byl nejvyšší. , obsah verbascosidu je nejnižší a kvalita Amaranth vulgaris zakoupených v různých lékárnách se velmi liší. Zhao Kuijun et al.119 použili metodu HPLC-ELSD k analýze galaktitolu ve 20 šaržích Cistanche a Cistanches tubulosa.

4. LC-MS

Kapalinová chromatografie-hmotnostní spektrometrie (LC-MS) má výhody vysoké rychlosti, silné selektivity, nízkého detekčního limitu a silných kvalitativních a kvantitativních schopností. Je ideálním nástrojem pro analýzu chemických složek tradiční čínské medicíny a používá se především pro kvalitativní stanovení chemických složek mletého masa. a kvantitativní výzkum.

Song a kol. 20] použili technologii HPLC-Qtrap-MS k vytvoření metody pro kvantitativní rozlišení skupin sloučenin Cistanches tubularis (CT) a Cistanche (CD). Celý pracovní postup je rozdělen do tří částí: za prvé, prostřednictvím rozšířeného úplného skenování (EMS), skenování neutrálních ztrát (NL), skenování prekurzorových iontů (Prec) a rozšířeného skenování produktových iontů (EPI), kombinované se standardní kontrolou materiálu, sekundární hmotnostní spektrometrií. informace a související informace uváděné ve stávajících databázích byly použity ke komplexnímu prověření sloučenin v mletém mase; za druhé, metoda HPLC-SMRM byla použita k provedení relativní kvantifikace 513 sloučenin, které byly testovány; konečně byla použita metoda vícerozměrné statistické analýzy v kombinaci s kvantitativními daty k rozlišení skupiny chemického složení CT a CD. Výsledky ukázaly, že betain, meziprodukty trikyselinového cyklu, fenylethanoidní glykosidy a iridoidy byly markery pro rozlišení CT a CD sloučenin. Lu a kol. 1 použil vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii s detektorem diodového pole a hmotnostní spektrometrii s vysokým rozlišením (HPLC-DAD-HRMS) k identifikaci 4 druhů a celkem 36 šarží Cistanche (včetně 14 šarží pouštního Cistanche, 10 šarží tubulárního Cistanche a 12 šarže Cistanche). ) a změřili obsahy těchto 10 sloučenin. K jasnému rozlišení čtyř typů Cistanche byly použity dvě chemometrické metody, hierarchická shluková analýza a analýza hlavních složek. Zhou Ye a spol! 221 použila HPLC-ESI-MS k detekci obsahu sedmi účinných látek v tradiční čínské medicíně Cistanche z pěti různých původů, včetně pouštního sarkosidu A, echinaceasidu, verbascosidu, isolebascosidu, 2'-acetyl verbascosidu, cistanche nosidu C a tubulinu B. Současně byla použita infračervená spektroskopie s Fourierovou transformací pro stanovení otisků prstů pěti druhů Cistanche a byly vypočteny jejich společná maximální rychlost a variační maximální rychlost. Výsledky ukázaly, že výsledky hodnocení léčivých materiálů oběma metodami byly konzistentní. Song et al.123] zavedli online metodu extrakce tlakovým rozpouštědlem – turbulentní průtoková chromatografie – vysokoúčinná kapalinová chromatografie (online PLE-TFC-HPLC). Na příkladu pouštní cistanche dosáhli stanovení obsahu osmi fenylethanolových glykosidů v pouštní cistanche. Měřeno současně. Současně byla použita metoda HPLC-DAD-IT-TOF-MS k identifikaci 91 sloučenin v online extraktu pouště Cistanche a byly porovnány základní diagramy píku online extraktu a ultrazvukové extrakce, což ukazuje, že účinnost extrakce byla v souladu s metodou ultrazvukové extrakce. Wang Yiming et al.124) použili metodu LC/ESI-MS/MS ke studiu 7 fenylethanolových glykosidů v pouštní Cistanche, soli Cistanche a tubulární Cistanche. V důsledku toho bylo identifikováno 7 druhů v pouštní Cistanche a solné syrové Cistanche. Bylo nalezeno 6 druhů a druhy Cistanche obsahovaly pouze 5 druhů. Cao Zhenjie a kol. (25) použili metodu LC-MS ke zkoumání obsahu fenylethanolových glykosidů v pouštní Cistanche v různých obdobích sklizně. Výsledky ukázaly, že obsah echinakosidu, Cistanches A a 2-acetyl verbascosidu se měnil v závislosti na období sklizně. velký rozdíl.

5. Infračervená spektroskopie

Infračervená spektroskopie je spektroskopická metoda, která využívá spojité spektrum elektromagnetických vln v infračervené oblasti jako zdroj záření pro ozařování vzorku a záznam absorpční křivky vzorku. Je to široce používaná metoda v analýze organických sloučenin. Jeho aplikace v mletém mase spočívá především v rozlišení různých částí mletého masa. Xu Rong a kol. (261 použila technologii FT-IR ke studiu rozdílů ve složení různých částí semen Cistanche po stratifikačním ošetření. Výsledky ukázaly, že v semenech Cistanche jsou sacharidy, proteiny, lipidy, pektin a aromatické látky. Laminace Po ošetření je absorpční vrchol Zhang Shengjun et al. 27 použili technologii F-TIR kombinovanou s technologií tříúrovňové identifikace druhého řádu derivátového spektra a 2D-IR technologie pro studium ethanolových extraktů různých koncentrací (10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%) pouštní Cistanche a odpovídající léčivé zbytky Výsledky ukazují, že účinné látky, jako jsou fenylethanoidní glykosidy v mletém mase extrahovaném ethanolem, se odrážejí v infračerveném spektru a bylo zjištěno, že 70% ethanolový extrakt má nejvyšší obsah fenylethanoidových glykosidů. Tuto metodu lze použít k analýze složek léčivých kapalin a reziduí léčiv a k rozlišení jemných rozdílů ve složkách extraktů a reziduí léčiv o různých koncentracích. Může také kombinovat složky extraktů a léčivých reziduí různých koncentrací, aby poskytl celkovou informaci o léčivých materiálech masové pasty. Chen Jun a kol. ( 28 ] použili technologii FT-IR kombinovanou s technologií 2D-IR k identifikaci pouštní Cistanche a jejího zmateného produktu Cynomorium cynomolgus. Bylo zjištěno, že IR spektra těchto tří vykazovala určité rozdíly a rozdíl ve spektrech derivátů druhého řádu byl ještě zřetelnější 2D- IR spektra jsou nejen odlišná, ale také intuitivní. Tato metoda umožňuje rychlou a přesnou identifikaci produktů společnosti Cistanche a jejích 129) používaných technologií FTIR v kombinaci s metodou shlukové analýzy byly vyhodnoceny makroskopické rozdíly pouštní masové pasty v různých metodách zpracování, analýza a 180 vzorků pouštních Cistanche zpracovaných ve 3 celých závodech zpracování a 5 různých metodách zpracování plátků a shluková analýza byla provedena pomocí softwaru Assure ID. Výsledky ukázaly, že vzorky s různými metodami zpracování byly výrazně odlišné. Tato metoda dokáže rychle a efektivně identifikovat různé metody zpracování. Cistanche vzorky. Xu Rong a kol. [30] použili techniky FT-IR a 2D-IR k analýze a vyhodnocení části kůže, střední části a dřeně pouštní Cistanche, jakož i jejího alkoholového extraktu a vodního extraktu. Tato metoda dokáže rychle a komplexně identifikovat jemné rozdíly v různých částech stejného léčivého materiálu. Xu Rong et al.31 použili metodu FT-IR ke studiu různých částí pouštních semen Cistanche a jejich spektrálních charakteristik a rozdílů ve složení po padlí nebo ošetření při vysokých teplotách. Studie zjistila, že složení obalu semene a jádra semene bylo výrazně odlišné. Bylo také zjištěno, že obsah bílkovin a některých cukrů v semenech, které úzce souvisejí s vitalitou, se po padlí nebo ošetření při vysokých teplotách výrazně snížil. Xu Rong a kol. 32 také provedla spektrální analýzu na pouštní Cistanche, tubulární Cistanche a solné Cistanche. Výsledky ukázaly, že IR vzory pouštní Cistanche a tubulární Cistanche byly významně odlišné a derivační spektra druhého řádu pouštní Cistanche a solné Cistanche byla zřejmá. Rozdíly, 2D-IR spektrum intuitivněji odráží rozdíly mezi těmito třemi. Liu Yougang a kol. 133 použila technologii FT-IR k analýze obsahu fenylethanolových glykosidů v pouštních Cistanche, Cistanche tubulosa a jejich 95% ethanolových extraktech. Výsledky ukázaly, že obsah fenyletanolových glykosidů v Cistanche tubuliflora byl významně vyšší než v pouštní Cistanche. Bylo zjištěno, že fenylethanolové glykosidy byly účinně obohaceny v alkoholovém extraktu.

6. GC-MS

Plynová chromatografie-hmotnostní spektrometrie (GC-MS) využívá jako rozhraní elektronové bombardování nebo chemickou ionizaci v kombinaci s relativně obsáhlou komerční databází hmotnostní spektrometrie, která výrazně zlepšuje analytické možnosti hmotnostní spektrometrie a má výhody vysoké citlivosti a dobré opakovatelnosti. Používá se především pro výzkum obtížně těkavých látek a tepelně nestabilních látek. Zhou Yubi et al.141 použili sloupcovou chromatografii k rozdělení složek pouštních Cistanche rozpustných v tucích na tři části: nepolární, slabě polární a polární. Tyto tři části analyzovali metodou GC-MS a identifikovali celkem 73 sloučenin. Byla provedena komplexní analýza v tucích rozpustných složek pouštní masové pasty. Qiao Haili a kol. [35] použili dynamickou adsorpční metodu headspace bagging kombinovanou s technologií GC-MS ke studiu těkavých složek pouštních květenství Cistanche od fáze pučení do fáze plného květu. V důsledku toho bylo v květenstvích Cistanche identifikováno 40 těkavých sloučenin. Hlavními ve fázi pučení byly Uhlovodíky a zelené listové těkavé látky a typy a relativní obsahy se mění s otevíráním květů na květenství. Těkavé složky v raném a plném květu jsou převážně aromatické estery a sloučeniny benzenového kruhu a jejich relativní obsahy jsou výrazně vyšší než ve stadiu pučení. Zvýšit.

7. Ostatní

Protože fenolová skupina fenylethanolových glykosidů se může zabarvit dusičnanem hlinitým a diazoniovými solemi. Du Niansheng a kol. 136] použili kolorimetrickou metodu dusičnanu hlinitého ke stanovení obsahu celkových fenylethanoidových glykosidů v pouštní Cistanche. Výsledky ukazují, že tato metoda je jednoduchá na ovládání, citlivá a přesná, s průměrnou mírou obnovy 100,7 % (n=5) a variačním koeficientem (cv) 1,09 %. Li et al1371 analyzovali obsah fenylethanoidních glykosidů v pouštní Cistanche pomocí kolorimetrické metody s diazoniovou solí. Výsledky ukázaly, že obsah fenylethanolglykosidu ve vzorku byl 1,275 %, průměrná míra obnovy byla 101,3 % a RSD byla 3,7 % (n =4). Gong Lidong a kol. 38) použili kapilární elektroforézně-elektrochemický detekční systém (CE-ED) ke studiu monosacharidového složení polysacharidů Cistanche (pouštní Cistanche vyráběný ve Vnitřním Mongolsku, Xinjiang trubkový květ Cistanche a uměle pěstovaný trubkový květ Cistanche) a stanovení obsahu monosacharidů. Li Yuxia a spol! 39 použil analyzátor aminokyselin k analýze složení různých aminokyselin v Cistanche v poušti Xinjiang. Studie zjistila, že vzorek Cistanche obsahoval po zpracování kyselou hydrolýzou celkem 17 druhů aminokyselin, s celkovým hmotnostním zlomkem aminokyselin 7,87 % a proteinem 16,38 %. Mezi nimi lidské tělo Sedm esenciálních aminokyselin je v rozumném poměru, E/T=38,5 %, E/N=62,6 %. Li Bin a kol. [40] použili ultrafialový spektrofotometr (UV) v kombinaci s Nashovým činidlem ke stanovení maximální vlnové délky absorpce mannitolu 413 nm a změřili obsah mannitolu v 6 dávkách soleného Cistanche. Ma Xizhong [4] použil k extrakci těkavých složek z tradiční čínské medicíny Rouhuanrong technologii superkritické kapalinové extrakce (SFE) a ke stanovení jejich obsahu kombinovanou kapilární plynovou chromatografii (CGC) a plynovou chromatografii/hmotnostní spektrometrii (GC/MS).

Část 2 Pokrok ve výzkumu analýzy složek v tradiční čínské medicíně Cistanche

Složky obsažené v tradiční čínské medicíně jsou extrémně složité a jejich vícesložkové, vícecestné, vícecílové a integrované regulační účinky se staly v oboru konsensem. To přineslo velké výzvy pro objasnění účinných látek a mechanismu účinku tradiční čínské medicíny. Se zavedením a zdokonalením teorie sérové ​​medicinální chemie tradiční čínské medicíny domácím vědcem profesorem Wang Xijunem si učenci postupně uvědomili, že poté, co je tradiční čínská medicína podávána vhodnými cestami, prochází v těle vstřebáváním, metabolismem a dalšími procesy, a to, co se nakonec vstřebá do krve, jsou často polymonomery. Skupina účinných látek je tvořena složkami, její struktura může být buď prototypová složka, metabolit monomeru složky nebo nová chemická složka vytvořená interakcí mezi složkami monomeru v tradiční čínské medicíně, nebo může být vytvořena tělo působením léků endogenních fyziologicky aktivních látek.

1. In vivo analýza složení hlavních chemických složek Cistanche

Cistanche je známé tonikum v tradiční čínské medicíně. Ačkoli je široce používán v klinických aplikacích, výzkum jeho metabolismu v těle se většinou zaměřuje na studium několika samostatných účinných látek, jako je echinaceaside, verbascosid a chrysophyllin. V současnosti je složení těla Cistanche uváděné v literatuře. Hlavními analytickými metodami jsou HPLC-UV a LC-MS.

Jia a kol. [{{0}}] zavedl metodu HPLC-UV pro studium farmakokinetiky a metabolismu echinaceasidu in vivo a extrahoval, separoval a testoval metabolity na účinnost. Wang a kol. I44 použil technologii LC/MS-IT-TOF v kombinaci s účinnými strategiemi pro objevování metabolitů k provádění holografického screeningu a identifikaci in vivo metabolitů echinacey. Cui a kol. 145] použili technologii UPLC-ESI-Q-TOF-MS ke studiu in vivo chemického složení echinaceaside a verbascosidu, aktivních složek Cistanche, a nakonec identifikovali 29 sloučenin z plazmy, moči, stolice a žluči. metabolit. Deng et al.146 použili technologii HPLC/Q-TOF-MS k systematické analýze metabolitů a metabolických drah chrysofylinu v těle a provedli screening a identifikovali 66 metabolitů z potkaního trusu. Studie ukázala, že chrysophyllin se snadno přeměňuje na isochrysosid a snadno se hydrolyzuje na produkty degradace. Hlavními metabolickými cestami chlorofylinu jsou hydrolýza, hydroxylace, acetylace, sulfonace, redukce, dehydrogenace a dimethylační reakce. Qi et al147 použili UPLC/ESI-QTOF-MS v kombinaci s technologií MSE k analýze chemických složek verbascosidu in vivo a identifikovali 35 metabolitů z moči potkanů, včetně 19 metabolitů mateřského léčiva a 16 metabolitů degradačních produktů. věci. Tato metoda je rychlá a spolehlivá, poskytuje spolehlivé informace o metabolismu verbascosidu a lze ji široce využít při studiu metabolitů přírodních produktů. Yang et al.48] použili LC-MS/MS ke studiu in vivo farmakokinetického procesu echinacey. Wu a kol. 149] použili technologii LC-MS/MS kombinovanou s jednoduchou metodou extrakce na pevné fázi (SPE) ke stanovení obsahu verbascosidu v plazmě a tkáňových homogenátech a ke studiu jeho distribuce v mozku a farmakokinetických procesů in vivo. Yang a kol. (0) úspěšně aplikoval technologii LC-MS/MS na in vivo farmakokinetickou studii gangliosidu B prostřednictvím intravenózního podání.

2. In vivo analýza složek extraktu Cistanche

V současné době stále chybí systematický výzkum složek extraktu Cistanche. Hlavní analytické metody jsou HPLC a UPLC-Q-TOF-MS.

Zhou et al[51 použili metodu HPLC s použitím mikroemulze jako mobilní fáze k oddělení a identifikaci čtyř fenylethanoidních glykosidů (echinakosid, anthokyanosid B, verbascosid a isorebascosid) v krevních složkách svrabu Amaranthus. Tato metoda odstraňuje složité kroky předúpravy biologických vzorků a umožňuje přímou analýzu biologických vzorků až po naředění mikroemulzní mobilní fází. Li Wenlan a kol. 152-53] použil technologii vysokoúčinné kapalinové chromatografie-kvadrupólové hmotnostní spektrometrie s časem letu (HPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS) ke studiu chemického složení krys po orálním podání pouštního Cistanche. Porovnáním kontrolní skupiny a podle chromatogramu dávkované skupiny bylo v moči a séru potkanů ​​identifikováno celkem 24 sloučenin, včetně 9 prototypových složek a 15 metabolitů. Současně byly odvozeny hlavní metabolické dráhy Cistanche v těle (celkem 9 typů), včetně methylační reakce, demethylační reakce, hydrolytické reakce, hydroxylační reakce, acetylační reakce, glukuronidační reakce, dehydrogenační reakce, sulfonační a esterifikační reakce. . Li a spol! 54 použili technologii UPLC-Q-TOF-MS kombinovanou s ortogonální metodou parciální diskriminační analýzy nejmenších čtverců (OPLS-DA) k rychlému screeningu plazmy, moči a výkalů krys po perorálním podání tuberózy Cistanche a pouštní Cistanche. prototypy a metabolity. Výsledky: Z pouště Cistanche bylo identifikováno 71 chemických složek, včetně 25 prototypů a 46 metabolitů; Z Cistanche tubulosa bylo identifikováno 45 chemických složek, včetně 18 prototypů a 27 metabolitů. Studie prokázala, že fenylethanoidní glykosidy se v gastrointestinálním traktu krys rozkládají hlavně na malé molekulární sloučeniny; Cistanchesid B, Cistancheoside C, Cistanchesid D a Cistancheoside E existují pouze v pouštním Cistanche a jsou snadno metabolizovány na methylovaný hydroxytyrosol. Metabolity Cistanche a Cistanche lze rozlišit.