Pokrok a aplikace v technologii otisků prstů na čínské Materia Medica Ⅱ

1.2 Elektrochemický otisk prstu

Elektrochemie je jednoduchá analytická metoda založená na elektrochemických vlastnostech a principech testované látky, která je levná, vysoce citlivá a vyžaduje málo spotřebního materiálu [19]. Tato metoda má však určitá omezení a v současné době je použitelná hlavně pro analýzu čínských léčiv, která obsahují chemické složky, jako jsou terpeny (jako Angelica sinensis), flavonoidy (jako Scutellaria baicalensis), alkaloidy (jako Aconite) a antrachinony ( jako je rebarbora), které mohou podléhat elektrochemickým reakcím.

Wu Di a kol. [20] použili elektrochemický otisk ke stanovení optimálního extrakčního procesu Scutellaria baicalensis Georgi, což představuje dobrou metodu pro racionální využití čínských léčivých materiálů. Shi Huihui a kol. [21] použili technologii chemických oscilací reakce Belousov-Chabotinsky (BZ) ke zkoumání účinků teploty, rychlosti rotace a počtu léčivých materiálů přidaných k experimentálním výsledkům a vytvořili rozumné experimentální podmínky pro získání elektrochemického otisku Magnolia biondii Pamp. ., poskytující novou metodu kontroly kvality Magnolia biondii. Zou Guihua a kol. [22] vytvořili nelineární elektrochemický otisk Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. A Gentiana macrophylla Pall. Elektrochemické otisky dvou léčivých materiálů jsou vizuálně odlišné, což lze použít jako jednoduchou a účinnou metodu k rozlišení Codonopsis pilosula od Gentiana macrophylla. Dai Hongxia a kol. [23] provedli elektrochemickou analýzu na 20 šaržích Angelica sinensis (Oliv.) Diels s dobou růstu 1, 2 a 3 roky. V kombinaci s analýzou hlavních komponent bylo zjištěno, že elektrochemické otisky prstů a parametry oscilací (včetně doby indukce oscilace, maximálního potenciálu, životnosti oscilace, maximální amplitudy, potenciálu zastavení a počtu cyklů) Angelica sinensis v různých obdobích růstu byly významně odlišné. které lze použít jako základ pro identifikaci Angelica sinensis v různých obdobích.

ČÍNSKÝ MATERIÁL LÉKAŘSKÁ BYLINA CISTANCHE HPLC OTISK PRSTŮ

1.3 Chromatografický otisk prstu

1.3.1 Chromatografie na tenké vrstvě

Chromatografie na tenké vrstvě je chromatografická metoda, která dosahuje separace tím, že se spoléhá na různé adsorpční kapacity stejného adsorbentu pro různé chemické složky. Je to nejběžněji používaná metoda pro identifikaci tradiční čínské medicíny s výhodami snadné obsluhy, jednoduchého vybavení, dobré citlivosti, vysoké srovnatelnosti, silné specifičnosti a snadného vývoje barvy. Autenticita léčivého materiálu může být určena přítomností nebo nepřítomností skvrn na tenké vrstvě destičky. Hloubka a velikost barvy skvrn může do určité míry odrážet kvalitu léčivého materiálu[24]. V současné době vysoce výkonná tenkovrstvá chromatografie(HPTLC) se často používá k nahrazení vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) pro kvalitativní a kvantitativní identifikaci produktů tradiční čínské medicíny díky své jednoduchosti, přesnosti, nízké ceně, vysoké účinnosti a rychlosti. HPTLC otisky mají lepší rozlišení a dokážou rozumně a přesně odhadnout účinné látky v léku v kratším čase[25]. Vzhledem k velkému množství ovlivňujících faktorů (vlhkost, teplota atd.) je však reprodukovatelnost výsledků ve srovnání s HPLC špatná. Loescher a kol. [26] použili HPLC a HPTLC k analýze extraktu z Calendula officinalis a zjistili, že HPLC je pro kvantitativní analýzu vhodnější než HPTLC.

V reakci na tento účinek Li Xiangjun et al. [27] vytvořili řadu odpovídajících řešení, včetně provádění experimentu s vývojem v chladničce nebo v uzavřeném zařízení s řízenou teplotou, aby se snížil vliv teploty, a přidáním různých poměrů kyseliny sírové na jeden konec vyvíjecího válce pro kontrolu vlhkosti.

ČÍNSKÝ MATERIÁL LÉKAŘSKÁ BYLINA CISTANCHE HPLC LABLE

Patil a kol. [28] stanovili HPTLC otisk petroletherového extraktu Catsia tora Linn. Výsledky ukázaly, že listy, semena a květy obsahovaly 10, 7 a 11 druhů přísad. Tuto metodu lze použít k identifikaci pravosti Catsia tora Linn. Xiao Honghua a kol. [29] použili tenkovrstvou chromatografii kombinovanou s hmotnostní spektrometrií k vytvoření otisku chromonů, organických kyselin a triterpenoidních saponinů na tenké vrstvě u Cimicifuga foetida L. a provedli analýzu podobnosti, shlukovou analýzu a analýzu hlavních složek u 16 šarží Vzorky Cimicifuga z pěti zdrojů, které poskytují základ pro kontrolu kvality Cimicifuga.

Guzelmeric a kol. [30] použili ethylacetát-kyselinu mravenčí-kyselinu octovou-vodu (30:1,5:1,5:3) jako vyvíjecí rozpouštědlo k vyvinutí HPTLC otisku apigenin-7-glukosidu, aktivního markeru Matricaria chamomilla L., které lze použít jako hlavní vodítko pro hodnocení kvality heřmánku. Bazylko a kol. [31] stanovili HPTLC otisk pěti flavonoidních sloučenin, jmenovitě tagetoidy, kvercetin, flavonoidy, kyselinu kávovou a kyselinu chlorogenovou, z Galinsoga parviflora Cav. Tato metoda může být použita k identifikaci Galinsoga parviflora. Ethanolic et al. [32] zjistili otisk ethanolového extraktu Acacia catechu (L. f.) Willd. Pomocí HPTLC bylo provedeno jednoduché a rychlé kvantitativní hodnocení rutinu a kvercetinu v extraktu. Agatonovic-Kustrin a kol. [33] použili HPTLC ke kvantitativní analýze apigeninu, Matricaria a bisabololu v extraktech z listů a květů Pyrethrum parthenium (L.) Smith, Matricaria chamomilla L. a Calendula officinalis L., v kombinaci s metodou DPPH pro srovnání antioxidantu kapacita těchto komponentů. Tato metoda je jednoduchá, rychlá, spolehlivá a levná a lze ji také použít ke screeningu antioxidační aktivity rostlinných extraktů.

1.3.2 Metoda HPLC HPLC je univerzální analytická metoda pro detekci různých chemických složek v tradiční čínské medicíně.

Je široce používán při detekci chemických složek v tradiční čínské medicíně díky svým výhodám vysokého tlaku, vysoké citlivosti, vysoké účinnosti a automatizaci [34]. K tomu lze připojit UV detektor, detektor diodového pole (DAD), elektrochemický detektor, detektor vypařovacího světla atd., to vše ukazuje svou nenahraditelnou přednost.

Qiao a kol. [35] použili komplexní dvourozměrnou kapalinovou chromatografii s reverzní fází × reverzní fází (RP × RP 2DLC) k oddělení fenolických sloučenin získaných extrakcí lékořice ethylacetátem Glycyrrhiza uralensis Fisch.

311 sloučenin bylo detekováno během 40 minut a struktury 21 neznámých sloučenin byly předběžně charakterizovány hmotnostní spektrometrií a 8 z nich bylo v lékořici nalezeno vůbec poprvé. Výsledky ukázaly, že systém RP×RP2DLC/MS má dobrý vliv na separaci komplexních extraktů tradiční čínské medicíny a na kvalitativní analýzu přírodních produktů. Peng Liang a kol. [36] analyzovali flavonoidní složky 10 šarží Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino stanovil HPLC fingerprint Gynostemma pentaphyllum a kalibroval 11 společných charakteristických píků. Výsledky analýzy podobnosti ukázaly, že nejvyšší podobnost 10 šarží otisků prstů Gynostemma pentaphyllum vzhledem k referenčnímu spektru byla 0,989 a nejnižší byla 0,128, což naznačuje, že flavonoidní složky Gynostemma pentaphyllum z různých původů byly podobné v typu, ale měly značné rozdíly v obsahu. Sun a kol. [37] použili metodu HPLC-DAD k analýze podobnosti chemických složek Bupleurum chinense DC. a B. scorzonerifolium Willd. Poprvé a bylo zjištěno, že tyto dva měly 12 společných flavonoidních píku a 4 saponinové píky, v daném pořadí, a zároveň každý měl 6 jedinečných flavonoidních píků a 5 saponinových píků, v tomto pořadí. Výsledky ukázaly, že tato metoda může rozumně a efektivně odrážet rozdíl v chemických složkách mezi Bupleurum a Bupleurum chinense. Korelace mezi těmito dvěma je špatná. Proto by měl být Bupleurum chinense v klinické praxi používán s opatrností. On a spol. [38] kvantitativně analyzovali 10 druhů bioaktivní kyseliny gallové, kyseliny chlorogenové, kofeinu a katechinů obsažených v 10 šaržích zeleného čaje Ziyang. Vyvinutý otisk HPLC byl jednoduchý a spolehlivý. Li a kol. [39] stanovili HPLC otisk slupky granátového jablka. Vybrali 15 charakteristických píku a vyhodnotili podobnost 10 šarží slupky granátového jablka na 0,968. Také oddělili a kvantitativně analyzovali v něm obsažený punicalagin, kyselinu galovou, katechin, kyselinu chlorogenovou, kyselinu kávovou, epikatechin, rutin a kyselinu ellagovou, což poskytuje spolehlivou a účinnou metodu pro identifikaci pravosti a kontroly kvality slupky z granátového jablka. Sumathy a kol. [1] použili HPLC kombinovanou s HPTLC a plynovou chromatografií-hmotnostní spektrometrii (GC-MS) ke stanovení chemického složení methanolového extraktu z Ixora chinensis Lam. HPLC analýza ukázala přítomnost biochinu A, myricetinu, kvercetinu, rutinu, daidzeinu a formononetinu; kyselina ursolová byla nalezena v otisku prstu HPTLC; GC-MS bylo nalezeno 24 fytochemických složek; tato kombinovaná kvalitativní a kvantitativní metoda může snadno vyhodnotit kvalitu a stabilitu Ixora chinensis Lam. Ge a kol. [40] vytvořili UHPLC-DAD otisk prstu Radix Angelicae Pubescentis, kvantitativně analyzovali kumariny a fenolové kyseliny obsažené v Radix Angelicae Pubescentis a kvalitativně identifikovali jeho aktivní složky pomocí hmotnostní spektrometrie s kvadrupólovým časem letu (Q-TOF-MS). Našli 9 fenolových kyselin, 30 kumarinů a 41 sloučenin myrhy a adenosinu. Kombinovali metodu diskriminační analýzy, aby efektivně a rychle rozlišili 32 šarží Radix Angelicae Pubescentis z různých provincií. Tato metoda poskytuje nový nápad pro kontrolu kvality Radix Angelicae Pubescentis.

SEZNAM SPECIFIK CISTANCHE

Yang a kol. [41] použili ultra-vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii (UPLC)-DAD detektor a technologii ESI-MS k získání otisku HPLC a hmotnostní spektrometrie tablet Xiaoyanlidan. Analyzovali 113 vzorků Xiaoyanlidan Tablets a získali 39 píku, z nichž 26 bylo z Quassia, 9 z Andrographis paniculata a 4 z Rhizoma Cynoglossi. Pomocí chemometrických metod podobnosti a PCA určili, že pěti významnými složkami jsou 4-methoxy-5-hydroxyferrocefalostomon, andrografolid, dehydroandrografolid, neoandrografolid a kyselina rozmarinová. Zavedli systematický a komplexní otisk pro zlepšení a vyhodnocení kvality tablet Xiaoyanlidan. Fan a kol. [42] stanovili HPLC a UPLC otisky flavonoidních glykosidů v Lophatherum gracile Brongn. a izolovali nový flavonoid C-glykosid luteolin 6-C- -D-glukuronová kyselina-(1→2){{19 }}D-pyranoglukosid poprvé. Poprvé také objevili optické izomery dvou sloučenin, flavonoidního flavonoidu a flavonoidního hydroxyflavonoidu. Použili jednorozměrnou a dvourozměrnou nukleární magnetickou rezonanci a hmotnostní spektrometrii k rozlišení a určení jejich struktur, což poskytlo novou metodu kontroly kvality Lophatherum gracile Brongn. Tshibangu a kol. [43] použili HPLC-DAD v kombinaci s tenkovrstvou chromatografií, nukleární magnetickou rezonancí a hmotnostní spektrometrií k účinné separaci hlavních biflavonoidních sloučenin GB1, GB2, GB-1a a flavonoidů z Garcinia kola Linn. a potvrdili jejich strukturu , který může být použit jako rutinní analytická metoda pro farmaceutické přípravky. Zhao a kol. [44] stanovili HPLC-UV-MS otisk Andrographis paniculata (Burm. f.) Nees, kvantitativně stanovili andrografolid a dehydroandrografolid obsažený v Andrographis paniculata, a vyhodnotili rozdíly 10 šarží Andrographis paniculata kombinací analýzy podobnosti a PCA. Tato metoda poskytuje základ pro kontrolu kvality Andrographis paniculata.

Ahmed a kol. [45] použili HPLC k získání otisku pryskyřice Commiphora wightii (Arn.) Bhandari a kvantitativně analyzovali trans- a cis-sterolon v ní obsažené. Zároveň tato metoda dokáže efektivně rozlišit 22 šarží pryskyřice Commiphora wightii a 9 šarží falšované pryskyřice, což lze použít jako metodu k identifikaci pravosti pryskyřice Commiphora wightii.

2 Biologické otisky prstů

Biologické otisky prstů jsou použití metod analýzy genové sekvence na molekulární úrovni k rozlišení a klasifikaci geografické distribuce a změn v čínských léčivých materiálech, včetně genomických otisků prstů, proteomických otisků prstů[60] a otisků DNA[61]. V současné době existuje méně studií o biologických otiscích prstů čínských léků než o chemických otiscích. Nejčastěji používané metody jsou elektroforéza na polyakrylamidovém gelu (PAGE), technologie molekulárních markerů s náhodně amplifikovanou polymorfní DNA (RAPD), polymerázová řetězová reakce.

(PCR) a další metody.

Liu Li a kol.[62] f. použil RAPD markery v kombinaci s PCR a shlukovou analýzou k účinné identifikaci Panax notoginseng (Burk.) f. H. Chen, Panax ginseng CA Mey. a americký ženšen Panaxquinquefolium L. Fan Wei et al. [63] poprvé vytvořili proteinový otisk SDS-PAGE Eupolyphaga sinensis Walker, Bombyx mori Linnaeus a Scolopendra dotační mutilans L. Koch, který poskytuje spolehlivou a účinnou metodu pro identifikaci těchto tří léčivých materiálů. Wei Yicong a kol. [64] navrhl dual-site specific primery a zkonstruoval multiplexní PCR Rychlá identifikace dvou léčivých materiálů, Houttuynia cordata Thunb. A Gymnotheca chinensis Decne., dokáže současně pozitivně identifikovat dva druhy a určit, zda jsou smíšené. Wang Fu a kol. [65] použili sekvenci ITS2 (interní transkribovaný spacer 2) jako čárový kód DNA k přesné identifikaci čínské medicíny Zanthoxylumbungeanum Maxim. A jeho koření Zanthoxylumbungeanum Maxim., poskytující základ pro identifikaci čínské medicíny Zanthoxylumbungeanum a jejího koření Zanthoxylumbungeanum.