Charakterizace sedmnácti složek v kultivovaných cistanches Herba z pouště Tarim pomocí HPLC-MS

[Abstraktní]Cíl: Identifikovat chromatografické složky 60% methanolového extraktu vCistanches deserticola Herbakultivován v poušti Tarim pomocí HPLC-MS.

Metoda: Analýza HPLC-MS byla provedena na koloně Agilent ZOＲBAX Eclipse Plus C18 (6 mm x 250 mm, 5 um)，. Mobilní fází byl acetonitril-0. 1% vodný roztok kyseliny mravenčí gradientovou elucí při průtoku 1 ml·min-1 a detekční vlnová délka byla 254 nm. Teplota kolony byla nastavena na 25 stupňů a vstřikovaný objem byl 10 μl. Výsledek: Šestnáct chromatografických píku / sedmnáct složek bylo přesně identifikováno porovnáním retenčního času, molekulové hmotnosti a fragmentových iontů sloučenin, které jsme izolovali a identifikovali. Tyto chromatografické složky byly stanoveny jako koniferin, demethyl syringin, syringin, echinakosid, cistanosid A, verbascosid ( tubulosid A ), cistanosid B, isoverbaskosid, 2'-acetylcistanosid A, cistanosid C, isocistanosid C,2'-acetylverbaskosid, aepridistanosid, aepridistanosid B. J.

Závěr: Metoda HPLC-MS je vhodná pro identifikaci chromatografických složek 60% methanolového extraktu v Cistanches Herba？ Tato studie poskytne vědecké důkazy pro komplexní analýzu chemických složek této léčivé byliny.

［Klíčová slova］ Cistanches deserticolaHerba; Cistanche; HPLC-MS; methanolový extrakt

Cistanche deserticola YCMa

Cistanche deserticola, také známý jako "pouštní ženšen",je známé tonikum čínské medicíny, který je distribuován ve Vnitřním Mongolsku, Ningxia, Gansu a Xinjiang v Číně [1].Má účinek na tonizaci jangu ledvin, prospívá krevní esenci, zvlhčuje střeva a vyprazdňuje. Běžně se používá na klinikách k léčbě mužské impotence, ženské neplodnosti, studené bolesti v pase a koleni, krevní stáze, zácpaatd. [2-3].Cistanche deserticola, což jezahrnuta v první části čínského lékopisu (vydání 2015) je sušený dužnatý stonek Cistanche deserticola a Cistanche tubulosa (4). Náš výzkumný tým prováděl systematický a hloubkový výzkum rostlin Cistanche po mnoho let.Chemickými složkami rostlin Cistanche jsou především fenylethanoidní glykosidy, dále iridoidy a jejich glykosidy, lignany a jejich glykosidy, benzylalkoholové glykosidy aj.[5]. Moderní farmakologické studie ukazují, že fenylethanolglykosidy, hlavní složky rodu, mají neuroprotektivní, antioxidační, jaterní ochranné, antibakteriální, antivirové, protinádorové, protizánětlivé a další účinky [6-11].

Pouštní ženšen

V Číně je Cistanche deserticola rozšířena v západním Vnitřním Mongolsku, severním Xinjiang a Qaidam Basin v Qinghai, ale ne v Tarim Basin v jižním Sinjiangu.. Na konci devadesátých let minulého století za účelem ochrany ropného pole Tazhong a kontroly pouště zavedlo velitelství ropného pole velké množství haloxylonového ammodendronu kolem ropného pole Tazhong a na obou stranách pouštní dálnice a naočkovalo haloxylonový ammodendron cistanchem, což je již více než 10 let. Vzhledem k teplému klimatu v jižním Sin-ťiangu a dobrým podmínkám kapkové závlahy v ropné základně je výnos cistanche deserticola velmi vysoký a výnos čerstvé cistanche deserticola na mu dosahuje více než 500 kg [8]. Mnoho chemických složek v Cistanche deserticola vytvořilo velké množství izomerů v důsledku různých poloh připojení substituentů. To přináší velké obtíže při identifikaci chromatografického píku tohoto léčivého materiálu. Je obtížné přesně identifikovat složky chromatografického píku, pokud se spoléháme pouze na LC-MS bez monomerních sloučenin jako kontroly. Proto existuje jen málo literárních zpráv o této práci v rané fázi. Autor izoloval mnoho monomerních sloučenin [9-11] z Cistanche deserticola pěstovaných v poušti Tazhong v raném stádiu. Prostřednictvím těchto monomerních sloučenin získaných v raném stádiu byly přesně identifikovány HPLC parciální chromatografické píky 60% methanolového extraktu Cistanche deserticola. To nejen zabrání opakované identifikaci některých známých sloučenin v chemických složkách Cistanche deserticola, ale také poskytne určitý odkaz pro další výzkum kontroly kvality léčivého materiálu. V tomto článku bylo pomocí HPLC-MS identifikováno 17 složek 0% methanolového extraktu z Cistanche deserticola.

Plátek Cistanche deserticola

Kliknutím sem zobrazíte produkty Cistanche

【Požádejte o více】 E-mail: xue122522@foxmail.com / WhatsApp: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1.Materiál

přístroj pro nukleární magnetickou rezonanci Inova-500 (Varian, USA); hmotnostní spektrometr 6320IonTrap LC-MS, kolona EclipseXDB-C18 (4,6 mm x 250 mm, 5 um) (Agilent, USA); elektronická váha QUINTIX313-1CN typ 1/10000 (divize Sedaris); KQ-500DV ultrazvuková čistička (Jiangsu Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); KMUP - Ⅰ Trace Analytical Ultra Pure Water Generation System (Chengdu Haochun Instrument Equipment Co., Ltd.).

Všech 39 kontrolních látek použitých v tomto experimentu bylo autorem izolováno z poušti kultivované Cistanche deserticola v Tazhongu v rané fázi a jejich struktury byly určeny pomocí NMR a dalších spektroskopických technik. Struktury 39 kontrolních vzorků byly identifikovány jako Cistanche deserticoside J, Cistanche deserticoside K, Cistanche deserticoside L, Cistanche deserticoside M, Cistanche deserticoside N, epimeridinosidA, Isocistanchesid C, angiocyanin B, Cistanche heterophyllin, Isocornicin, Cistanche Cistanche deserticoside D, C'-cystanchemos acetyl deserticoside 2 Cistanche deserticosid A, 2' - acetyl Cistanche deserticosid A, Cistanche deserticola B, Cistanche deserticola A, Echinoside A, Cistanche deserticola glykosid E, Salidroside, 6 '- acetyl salidroside, saliside B, syringin, demethyl syringin, jalovec, (2}, 2E, (2}, E2E, 7-dimethyl-8-hydroxyctadien-1-O- - D-glukosid, (+) - syringin, (+) - syringin-4'- O- - D-glukopyranosid, (+) - isoeucomminA, eucomminA, (+) - kalafuna monomethyl ether} D'-glukosid, larva rosin monomethyl ether - --40} O- -D-glukosid, larvicidující-4-O- -D-glukosid- -D glukopyranosid, hesperidin A, oblast A, 6-deoxycatapol. Čistota všech výše uvedených referenčních látek je více než 98,0 %. Acetonitril je chromatograficky čistý (DikmaPure, USA), voda je ultračistá voda a další činidla použitá v testovacím procesu jsou analyticky čistá činidla vyráběná společností Beijing Chemical Plant.

Léčivý materiál použitý v tomto experimentu, Cistanche deserticola, byl sesbírán z pouštní oblasti Tazhong v Sin-ťiangu v listopadu 2010. Profesor Tu Pengfei z Farmaceutické fakulty Pekingské univerzity jej identifikoval jako sušený dužnatý stonek rostliny Cistanche deserticola z Leobaceae. Vzorek byl uložen v Centru moderního výzkumu tradiční čínské medicíny na Pekingské univerzitě (číslo vzorku: CD201011).

Plátek Cistanche deserticola

2.Metody a výsledky

2.1 Příprava referenčního roztoku

Odeberte asi 1 mg z každého z 39 kontrolních vzorků získaných z Cistanche deserticola v raném stádiu, přesně je zvažte, vložte do 5ml odměrné baňky, rozpusťte je v methanolu a nadávkujte na stupnici a poté získejte jediný kontrolní roztok.

2.2 Příprava zkušebního roztoku

S odkazem na Čínský lékopis, vydání 2015, odeberte asi 1 g prášku produktu (přes čtvrté síto), přesně jej zvažte, vložte do 100 ml hnědé láhve, přesně přidejte 50 ml 60% metanolu, utlačte, dobře protřepejte, zvažte hmotu, namočte ji na 30 minut, přidejte ultrazvuk, znovu zchladíme 50% methanolem, pro 4 redukovanou hmotu naberte, dobře protřepejte, odstavte, odeberte supernatant a použijte 0,45 μM mikroporézní membránovou filtraci, odeberte kontinuální filtrát, abyste získali testovací roztok.

2.3 Chromatografické podmínky

AgilentEclipse XDB-C18 chromatografická kolona (4,6 mm × 250 mm, 5 μm), detekční vlnová délka 254 nm, teplota kolony 25 stupňů; Použití acetonitrilu (A) - 0.1% vodného roztoku kyseliny mravenčí (B) jako mobilní fáze, gradientová eluce (0 - 20min, 5% - 15% A; 20 - 50min, 15% - 30% A; 50 - 60min, 30% - 50% A; %} 60 - 70% A; %{0}); Průtok: 1,0 ml · min-1, injekční objem: 10 μl.

2.4 Podmínky hmotnostního spektra

Kapilární teplota 350 stupňů; Kapilární napětí 3500V; Průtok pláště plynu (dusík) 12,0L · min-1; Tlak pomocného plynu (dusík) 206,8kPa; Úplný rozsah skenování hmotnostní spektrometrie je m/z 50~1000; Kolizní plyn helium, energie srážky je automaticky zvolena během testu; Sbírejte 1 jehlu pro každý pozitivní a negativní iontový režim.

2.5 Test referenční látky

39 referenčních roztoků připravených podle 2.1 bylo testováno za 2.3 chromatografických podmínek a 2.4 hmotnostních spektrometrických podmínek a byl zaznamenán jejich retenční čas a relativní molekulová hmotnost (tabulka 1).

2.6 Stanovení zkušebního roztoku

Vezměte léčivý materiál Cistanche deserticola shromážděný z pouštní oblasti Tazhong, Xinjiang, a připravte zkušební roztok podle metody popsané v bodě 2.2. Poté proveďte stanovení podle chromatografických podmínek popsaných v 2.3 a za podmínek hmotnostní spektrometrie popsaných v 2.4 a určete jeho HPLC chromatogram a hmotnostní spektrometrii v pozitivním a negativním iontovém módu (obrázky 1-3).

Obr. 1 HPLC chromatogram 60% methanolového extraktu Cistanches Herba

Obr. 2 Pozitivní TIC MS chromatogram 60% methanolového extraktu Cistanches Herba

Obr. 3 Negativní TIC MS chromatogram 60% methanolového extraktu Cistanches Herba

2.7 Identifikace HPLC chromatogramu léčivých materiálů

Za stejných podmínek (2,3 chromatografické podmínky a 2,4 hmotnostní spektrometrie) byly složky identifikovány porovnáním retenčního času a relativní molekulové hmotnosti testovaného vzorku a kontrolního vzorku. Specifický postup identifikace píku chromatogramu testovaného vzorku (obrázek 1) je následující.

2.7.1 Identifikace chromatografického píku 1

Retenční čas chromatografického píku 1 je 16,67 minut. V pozitivním iontovém módu je pík excimerového iontu m/z365 uveden jako [M+Na]+, zatímco v negativním iontovém módu je uveden pík excimerového iontu m/z387 [M+COOH]-. Relativní molekulová hmotnost píku 1 je určena na 342. Je také uveden fragmentový iont m/z179, který pochází ze ztráty 1 molekuly glukózy, 163 D, v důsledku štěpení glykosidové vazby. Podle retenčního času a relativní molekulové hmotnosti referenční látky byl chromatografický pík 1 identifikován jako koniferin.

2.7.2 Identifikace chromatografického píku 2

Retenční čas chromatografického píku 2 je 17,36 min. V režimu záporných iontů jsou uvedeny píky excimerových iontů m/z357 [M – H] -, 393 [M+Cl] - a relativní molekulová hmotnost píku 2 je stanovena na 358. Současně je fragmentový ion m/z195 odvozen od ztráty 1 molekuly glukózy, 163 Da, v důsledku štěpení vazby na glykosid. Chromatografický pík 2 byl identifikován jako demethylsyringin podle retenčního času a relativní molekulové hmotnosti referenční látky.

2.7.3 Identifikace chromatografického píku 3

Retenční čas chromatografického píku 3 je 19,04 min, pík excimerového iontu m/z395 [M+Na] je uveden v pozitivním iontovém módu a pík excimerového iontu m/z417 [M+HCOO] - je dán v negativním iontovém módu a relativní molekulová hmotnost píku 3 je určena jako stejný čas 29 m/fragment odvozený ze ztráty 0 m/z 372. 1 molekuly glukózy, 163 Da, v důsledku porušení glykosidové vazby. Chromatografický pík 3 byl identifikován jako syringin podle retenčního času a relativní molekulové hmotnosti referenční látky.

2.7.4 Identifikace chromatografického píku 4

Retenční čas chromatografického píku 4 je 27,66 min. Pík excimerového iontu m/z804 [M+NH4] je uveden v režimu kladných iontů a pík excimerového iontu m/z785 [M–H] - je uveden v režimu záporných iontů. Relativní molekulová hmotnost píku 4 je stanovena na 786. Současně je fragmentový iont m/z623 odvozen od ztráty 1 molekuly kofeinu, 163 Da, rozbitím esterové vazby. V kombinaci s retenčním časem a relativní molekulovou hmotností referenční látky byl chromatografický pík 4 identifikován jako echinacea.

2.7.5 Identifikace chromatografického píku 5

Retenční čas chromatografického píku 5 je 31,48 min, pík excimerového iontu m/z818 [M+NH4 je uveden v pozitivním iontovém módu a pík excimerového iontu m/z799 [M–H] - je uveden v negativním iontovém módu a relativní molekulová hmotnost píku 5 je stanovena na 700, z 6 je odvozen od stejného fragmentu esteru. ztráta 1 molekuly kofeinu při porušení vazby, 163Da. Kombinací retenčního času a relativní molekulové hmotnosti referenční látky bylo potvrzeno, že chromatografický pík 5 byl cistanche glykosid A.

Tabulka 1 Molekulová hmotnost a retenční čas (tＲ) 39 standardních sloučenin

2.7.6 Identifikace chromatografického píku 6

Retenční čas chromatografického píku 6 je 34,17 min. Dva píky excimerových iontů m/z846642 [M+NH4] + jsou uvedeny v režimu kladných iontů a dva píky excimerových iontů m/z827623 [M–H] - jsou také uvedeny v režimu záporných iontů. Spekuluje se, že pík 6 může obsahovat dvě sloučeniny s relativní molekulovou hmotností 828624. Současně je fragmentový iont m/z665461 odvozen od štěpení esterové vazby ztráty 1 molekuly kofeinu, 163 Da, a fragmentový iont m/z622 je odvozen od rozpadu acetylesterové vazby. Tyto dvě sloučeniny byly izolovány a kombinovány s retenčním časem a relativní molekulovou hmotností referenční látky; chromatografický pík 6 byl směsí Cimicifugarinu a antokyaninu A.

2.7.7 Identifikace chromatografického píku 7

Retenční čas chromatografického píku 7 je 35,34 min. Pík excimerového iontu m/z832 [M+NH4]+, 837 [M+Na]+ je uveden v pozitivním iontovém módu a pík excimerového iontu m/z813 [M–H] - je uveden v negativním iontovém módu a relativní molekulová hmotnost píku 7 je 814. Současně/z-fragment z6 odvozený od ztráty esterové vazby7 je 1 molekula iontové vazby kyseliny ferulové, 177 Da. V kombinaci s retenčním časem a relativní molekulovou hmotností referenční látky byl chromatografický pík 7 identifikován jako cistanche glykosid B.

2.7.8 Identifikace chromatografického píku 8

Retenční čas chromatografického píku 8 je 36,17 min, pík excimerového iontu m/z647 [M+Na] je dán v pozitivním iontovém módu a pík excimerového iontu m/z623 [M–H] - je dán v záporném iontovém módu a relativní molekulová hmotnost píku 8 je určena jako 624, jehož počátek je 624, 6 iontový původ. z rozpadu esterové vazby a ztráty 1 molekuly kofeinové skupiny, 163 Da. V kombinaci s retenčním časem a relativní molekulovou hmotností referenční látky byl chromatografický pík 8 identifikován jako heteroceenosid.

2.7.9 Identifikace chromatografického píku 9

Retenční čas chromatografického píku 9 je 38,20 minut. Píky excimerových iontů m/z860 [M+NH4]+, 865 [M+Na] jsou uvedeny v režimu kladných iontů a píky m/z841 [M–H] -, 877 [M+Cl] - jsou uvedeny v režimu záporných iontů. Relativní molekulová hmotnost píku 9 je stanovena na 842. Současně je fragmentový iont m/z679636 odvozen ze ztráty 1 molekuly kofeinu, 163 Da, a 1 molekuly acetylu, 43 Da. Retenční čas a relativní molekulová hmotnost referenční látky jsou konzistentní a identifikační pík 9 je 2- 2'-acetylcistanche glykosid A.

2.7.10 Identifikace sytostitografický peak 10

Retenční čas chromatografického píku 10 je 39,04 min. Pík excimerového iontu m/z656 [M+NH4]+, 661 [M+Na] je uveden v režimu kladných iontů a pík m/z637 [M–H] -, 673 [M+Cl] - je uveden v režimu záporných iontů. Relativní molekulová hmotnost píku 10 je stanovena na 638. Současně je fragmentový iont m/z475 odvozen od ztráty přerušením esterové vazby 1 molekuly kofeinu, 163 Da. Retenční čas a relativní molekulová hmotnost referenční látky jsou konzistentní a identifikační pík 10 je Cistanche C.

2.7.11 Identifikace chromatografického píku 11

Retenční čas chromatografického píku 11 je 40,82 min. Pík excimerového iontu m/z661 [M+Na]+, 677 [M+K+ je uveden v režimu kladných iontů a pík m/z637 [M–H] -, 673 [M+Cl] - je uveden v režimu záporných iontů. Lze určit, že relativní molekulová hmotnost píku 11 je 638. Současně je fragmentový iont m/z475 odvozen od ztráty 1 molekuly kofeinu, 163 Da, rozbitím esterové vazby. Kombinací retenčního času a relativní molekulové hmotnosti referenční látky byl chromatografický pík 11 identifikován jako izocistanche glykosid C.

2.7.12 Identifikace chromatografického píku 12

Retenční čas chromatografického píku 12 je 41,48 min. Pík excimerového iontu m/z684 [M+NH4]+, 689 [M+Na+ je uveden v režimu kladných iontů a pík m/z665 [M–H] - excimerového iontu je uveden v režimu záporných iontů. Lze určit, že relativní molekulová hmotnost píku 12 je 666. Současně se ukazuje, že fragmentový iont m/z503460 pochází ze ztráty 1 molekuly kofeinu, 163 Da, a 1 molekuly acetylu, 43 Da, rozbitím esterové vazby. Podle retenčního času a relativní molekulové hmotnosti referenční látky byl chromatografický pík 12 identifikován jako a2'-acetylyl coeliaosid.

Experiment Cistanche deserticola

2.7.13 Identifikace chromatografického píku 13

Retenční čas chromatografického píku 13 je 44,29 min, pík excimerového iontu m/z689 [M+Na] je uveden v pozitivním iontovém módu a pík excimerového iontu m/z665 [M–H] - je dán v negativním iontovém módu a relativní molekulová hmotnost píku 13 je 666,566, že je to stejný čas00 fragment0046 pochází z přerušení esterové vazby ztráty 1 molekuly kofeinu, 163 Da, a 1 molekuly acetylu, 43 Da. V kombinaci s retenčním časem a relativní molekulovou hmotností referenční látky byl chromatografický pík 13 identifikován jako anthokyanin B.

2.7.14 Identifikace chromatografického píku 14

Retenční čas chromatografického píku 14 je 46,67 min. Pík excimerového iontu m/z675 [M+Na] je uveden v režimu kladných iontů a pík excimerového iontu m/z651 [M–H] - je uveden v režimu záporných iontů. Relativní molekulová hmotnost píku 14 je 652. Současně je fragmentový iont m/z475 odvozen od ztráty 1 molekuly skupiny kyseliny ferulové, 177Da, přerušením esterové vazby. V kombinaci s retenčním časem a relativní molekulovou hmotností referenční látky byl chromatografický pík 14 identifikován jako epimeridinosid A.

2.7.15 Identifikace chromatografického píku 15

Retenční čas chromatografického píku 15 je 49,90 min. Pík excimerového iontu m/z698 [M+NH4]+, 703 [M+Na+ je uveden v režimu kladných iontů a pík m/z679 [M–H] -, 715 [M+Cl] - je uveden v režimu záporných iontů. Relativní molekulová hmotnost píku 15 je 680. Současně je fragmentový iont m/z517474 odvozen ze ztráty 1 molekuly kofeinu, 163 Da, a 1 molekuly acetylu, 43 Da. Chromatografický pík 15 byl identifikován jako cistanche glykosid K na základě retenčního času a relativní molekulové hmotnosti referenční látky.

2.7.16 Identifikace chromatografického píku 16

Retenční čas chromatografického píku 16 je 55,36 minut. V pozitivním iontovém módu je uveden pík excimerového iontu m/z717 [M+N, zatímco v negativním iontovém módu je uveden pík excimerového iontu m/z693 [M–H] -, 729 [M+Cl] -, což vede k relativní molekulové hmotnosti 694 pro pík 16. Současně je ukázáno, že 4 fragment iont/vazba 457 pochází z 74mesterové vazby ztráta 1 molekuly skupiny kyseliny ferulové, 177 Da, a 1 molekuly acetylové skupiny, 43 Da. V kombinaci s retenčním časem a relativní molekulovou hmotností referenční látky byl chromatografický pík 16 identifikován jako cistanche glykosid J. Chromatografické píky 60% methanolového extraktu Cistanche deserticola byly identifikovány pomocí HPLC-MS v kombinaci s relativní molekulovou hmotností, retenčním časem a fragmentovým iontem separované referenční látky. Výsledky ukázaly, že 17 složek ze 16 chromatografických píku bylo přesně identifikováno (tabulka 2).

Tabulka 2: Identifikované chromatografické píky Cistanches Herba a referenčních standardních sloučenin

3  . Diskuse

3.1 Výběr způsobu přípravy zkušebního předmětu

Hlavním účelem této studie je identifikovat HPLC píky Cistanche deserticola. Proto je výběr extrakčního rozpouštědla a extrakční metody založen na schopnosti získat více HPLC píků. Výzkumný tým prováděl dlouhodobý výzkum Cistanche deserticola a odvedl hodně práce v oblasti analýzy kvality. V tomto článku byly extrakční rozpouštědlo a metoda extrakce Cistanche deserticola také vybrány na základě předchozí analytické práce výzkumné skupiny a Čínského lékopisu (vydání 2015). Nakonec byla jako extrakční metoda vybrána ultrazvuková extrakce 60% methanolem po dobu 40 minut.

3.2 Výběr podmínek HPLC-MS

Výběr chromatografické kolony v tomto článku je založen na analýze kvality Cistanche deserticola v rané fázi výzkumné skupiny a na zkoumání AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μm), DionexC18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μ m, 5 μmm) Thermo Chromatografická kolona, nakonec vyberte chromatografickou kolonu AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μm) Má dobrý separační účinek na Cistanche deserticola; Mezi 39 referenčními látkami patří fenylethanoid, lignany a fenylpropanoid, takže detekční vlnová délka je 254 nm; Zároveň byly zkoumány vlivy mobilní fáze jako je methanol-voda, acetonitril-voda, methanol-0,1% kyselina fosforečná voda, acetonitril-0,1% kyselina mravenčí voda na chromatografickou separaci a detekci hmotnostní spektrometrií a jako mobilní fáze byl nakonec zvolen acetonitril-0,1% kyselina mravenčí voda.

3.3 Shrnutí

Metoda stanovená v této studii přesně identifikovala 17 složek z 16 chromatografických píku 60% methanoluvýpiszCistanche deserticola.

Výsledky výzkumu mají nejen určitou referenční hodnotu pro další analýzu kvality léčivého materiálu, ale také se mohou vyhnout opakované práci na identifikaci struktury známých sloučenin léčivého materiálu. Obecně však existuje relativně málo identifikovaných chromatografických píků a mnoho chromatografických píků nebylo identifikováno, protože nebyly přiřazeny referenční látce. Většina identifikovaných složek jsou fenylethanoidní glykosidy, zatímco lignany jsou vzácné. To může být způsobeno tím, že metoda extrakce uvedená ve vydání Čínského lékopisu z roku 2015 je zaměřena hlavně na fenylethanoidní glykosidy, nebo proto, že obsah echinakosidu a koliformních sloučenin v extraktu tohoto léčivého materiálu je příliš vysoký, což ztěžuje detekci jiných sloučenin s malým obsahem. Konkrétní důvody je třeba dále objasnit.

[Reference]

[1] Redakční výbor Flory of China. Flóra Číny [M]. Peking: Science Press, 1990: 86

[2] Yang Junshan. Pouštní ženšen -- Cistanche deserticola [J]. Chinese Journal of Pharmacy, 2011, 46 ( 12): 881．

[3] Tu Pengfei, Jiang Yong, Guo Yuhai a kol. Výzkum Cistanche deserticola a její průmyslový rozvoj[J]. Chinese Journal of Pharmacy, 2011, 46 (12): 882-887

[4]National Pharmacopoeia Commission. Lékopis Čínské lidové republiky. Část I [M]Peking: China Pharmaceutical Science and Technology Press, 2015: 135

[5] JIANG Y, TU PF！ Analýza chemických složek u druhů Cistanche ［J］］. J Chromatogr A, 2009, 1216 (11): 1970-1979.

[6] PAN J, YUAN CS, LIN CJ a kol. Farmakologické aktivity a mechanismy přírodních fenylpropanoidních glykosidů［J］］. Pharmazie, 2003, 58 ( 11): 767-775.

[7] FU GM, PANG HH, Wong Y. Přirozeně se vyskytující fenylethanoidové glykosidy: potenciální vodítka pro nová terapeutika［J］］. Curr Med Chem, 2008,15 (25): 2592-2613.

[8] Rhode Mei, Long Mei, Du Wenjing a kol. Mechanismus antiosteoporózního účinku extraktu Cistanche deserticola na M KOOPG myši ［ J ］. Čínský experiment Journal of Prescriptions, 2016, 22 (10): 138-142

[9] Ma Hui, Yin Ruoxi, Guo Min a kol. Účinek polysacharidu Cistanche deserticola na stárnutí vyvolané D-galaktózou. Vliv exprese CREB u starého modelu myší ［ J ］. Chinese Experimental Prescriptions Journal, 2014, 20 (20): 137-141

[10] Tao Yicun, Li Jianying, Xu Yonghua a kol. Účinky fenylethanosidu Cistanche deserticola na krysy: Prevence a léčba vysokohorského plicního edému ［ J ］. Chinese Journal of Experimental Prescriptions, 2014, 20 ( 15): 134-138．

[11] Zhou Haitao, Cao Jianmin, Lin Qiang. Cistanche deserticola o vyčerpané plavecké schopnosti krys a mitochondriální antioxidační kapacitě myokardu ［ J ］. Čínský experimentální vzorec Journal of Science, 2012, 18 (6): 229-233

[12] NAN ZD, ZHAO MB, ZENG KW a další. Protizánětlivé iridoidy ze stonků Cistanche deserticola kultivovaných v poušti Tarim ［J］［. Chin J Nat Med, 2016,14(1): 61-65．

[13] NAN ZD, ZENG KW, SHI SP a další. Fenylethanoidové glykosidy s protizánětlivými účinky ze stonků Cistanche deserticola kultivovaných v poušti Tarim ［J］］. Fitoterapie, 2013, 89: 167-174.

[14] Nan Zedong, Zhao Mingbo, Jiang Yong a kol. Chemie pouštní cistanche pěstované v Tazhong: Studie složení ［ J ］. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2013, 38 (16): 2665-2670.

[15] Nan Zedong, Zhao Mingbo, Jiang Yong a další Lignans [J]. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2015, 40 (3): 463-468.