Antimelanogeneze a kožní ochranné aktivity extraktu z ethanolu z kalichu ženšenu Panax Ginseng, část 2

3. Výsledky

3.1. Antimelanogenetický účinek Pg-C-EE

Nejprve jsme měřili cytotoxicituPg-C-EEv buňkách B16F10 a nevykazovaly žádnou cytotoxicitu při koncentracích Pg-C-EE až do 400 mg/ml (obr. 1A). Arbutin (1 mM) byl použit jako pozitivní kontrola pro antimelanogenezní aktivitu, protože je známo, že účinně inhibuje aktivitu tyrosinázy. Inhibiční účinky Pg-C-EE na sekreci a syntézu melaninu byly zkoumány v buňkách B16F10 ošetřených a-MSHe. Úrovně inhibice sekrece melaninu byly 10 procent pro Pg-CEE 100 mg/ml, 28,5 procenta proPg-C-EE200 mg/ml, 36,2 procent pro Pg-C-EE 400 mg/ml a 36,7 procent pro arbutin 1 mM (obr. 1B). Úrovně inhibice obsahu melaninu byly 16,5 procent pro Pg-C-EE 200 mg/ml, 50,2 procent pro Pg-C-EE 400 mg/ml a 49 procent pro arbutin 1 mM (obr. 1C). Fotografie (horní graf) a grafy ukazují, že sekrece a syntéza melaninu byly potlačeny působením Pg-C-EE způsobem závislým na dávce (obr. 1B, 1C). Ke zkoumání aktivity enzymů podílejících se na produkci melaninu jsme použili houbovou tyrosinázu. Inhibiční účinek Pg-C-EE na aktivitu tyrosinázy byl 11,8 procenta (100 mg/ml), 13,7 procenta (200 mg/ml) a 21,9 procenta (400 mg/ml), zatímco kyselina kojová (300 mM) tyrosinázu inhibovala aktivity až o 87,9 procenta (obr. 1D). V reverzní transkripci polymerázové řetězové reakce analýzy inhibičního účinkuPg-C-EEna expresi genů souvisejících s produkcí melaninu (MITF, TYRP{0}},2, tyrosináza, MLPH, MyoVa a Rab27a) nevykazoval Pg-C-EE významný inhibiční účinek na expresi mRNA, ale mRNA exprese TYRP-2, tyrosinázy a MLPH se mírně snížila při Pg-C-EE 400 mg/ml (obr. 1E). Přestože Pg-C-EE neovlivnil expresi mRNA genů spojených s produkcí melaninu, vykazoval významný inhibiční účinek na úrovni exprese proteinů. Zejména proteinová exprese tyrosinázy, TRP-1 a TRP-2 byla v závislosti na dávce sníženaPg-C-EEošetření (obr. 1F). Protože Pg-C-EE inhiboval expresi proteinů souvisejících s produkcí melaninu, pak jsme zkoumali, zda Pg-C-EE blokuje upstream proteiny regulující melanogenezi měřením fosforylace p38, ERK a CREB v různých časových bodech (48e24 h) .Pg-C-EEv závislosti na dávce snižovaly hladiny fosforylovaného p38, ERK a CREB, které byly stimulovány za podmínek a-MSH (obr. 1G). Abychom demonstrovali, že p38 a ERK inhibují produkci melaninu, zkoumali jsme hladiny sekrece a obsahu melaninu v přítomnosti SB203580 (inhibitor p38), SP600125 (inhibitor JNK) a U0126 (inhibitor ERK). Produkce melaninu byla potlačena ošetřením SB203580 a U0126 podobně jako ošetření Pg-C-EE, ale nebyla inhibována ve skupině ošetřené SP600125- (obr. 1H).

Podle relevantních studií je cistanche běžnou bylinou, která je známá jako „zázračná bylina, která prodlužuje život“. Jeho hlavní složkou je cistanosid, který má různé účinky, jako je antioxidační, protizánětlivý a podpora imunitních funkcí. Mechanismus mezicistancheabělení kůžespočívá v antioxidačním účinku cistanche glykosidů. Melanin v lidské kůži vzniká oxidací tyrosinu katalyzovanou tyrosinázou a oxidační reakce vyžaduje účast kyslíku, takže se volné radikály v těle stávají důležitým faktorem ovlivňujícím produkci melaninu.Cistancheobsahuje cistanosid, který je antioxidantem a může snížit tvorbu volných radikálů v těle, čímž inhibuje produkci melaninu.

Klikněte na Cistanche Of Whitening na prodej

Požádejte o více: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Kromě toho má cistanche také funkci podpory produkce kolagenu, který může zvýšit elasticitu a lesk pokožky a pomoci opravit poškozené kožní buňky.CistancheFenylethanolové glykosidy mají významný down-regulační účinek na aktivitu tyrosinázy a účinek na tyrosinázu se ukazuje jako kompetitivní a reverzibilní inhibice, která může poskytnout vědecký základ pro vývoj a využitíbělenípřísady vCistanche. Proto,cistanchemá klíčovou roli vbělení kůže. Může inhibovat produkci melaninu, aby se snížilo zabarvení a matnost; a podporuje tvorbu kolagenuzlepšit pružnost a zářivost pokožky. Vzhledem k širokému uznání těchto účinků cistanche, mnohobělení kůžeprodukty začaly obsahovat bylinné přísady, jako je Cistanche, aby uspokojily poptávku spotřebitelů, čímž se zvýšila komerční hodnota Cistanche v produktech pro bělení pokožky. Stručně řečeno, role cistanche při bělení kůže je zásadní. Jeho antioxidační účinek a účinek produkující kolagen může snížit zabarvení a matnost, zlepšit elasticitu a lesk pokožky a dosáhnout tak bělícího účinku. Široké použití Cistanche v produktech pro bělení pokožky také ukazuje, že jeho roli v komerční hodnotě nelze podceňovat.

3.2. Kožně ochranná aktivita Pg-C-EE proti UVB záření

Ke zkoumání ochranné aktivity kůže proti UVB záření pomocí HaCaT buněk, cytotoxicitaPg-C-EEbyl měřen MTT testem. Pg-C-EE nevykazoval cytotoxicitu v HaCaT buňkách až do koncentrace 400 mg/ml (obr. 2A). Snímky buněk zachycené kamerou připojenou k mikroskopu ukázaly, že Pg-C-EE chrání před poškozením HaCaT buněk ozářeným UVB (obr. 2B). Aby se objasnily ochranné mechanismy Pg-C-EE před poškozením kůže zprostředkované UVB, byly hladiny exprese MMP-1, -2, -3 a -9 měřeny za podmínek UVB záření, o kterém je známo, že zvyšuje stárnutí kůže prostřednictvím upregulace MMP. V buňkách HaCaT ozářených UVB zářením Pg-C-EE v dávce 400 mg/ml snižoval expresi mRNA MMP-1, MMP-2, MMP-3 a MMP-9 (Obr. 2C). Pg-C EE také snížila expresi zánětlivých regulačních genů COX-2, IL-6 a IL-8. Po UVB ozáření 100 mJ/cm2 byla exprese COX-2 snížena ve skupině léčené Pg-C-EE, zatímco Pg-C-EE neovlivnila gen Sirt1 (obr. 2D). Po ozáření UVB 30 mJ/cm2 snížil Pg-C-EE genovou expresi IL-6 a IL-8, nejdůležitějších zánětlivých genů v kožních buňkách (obr. 2E). Abychom prozkoumali regulační mechanismy proteinů zapojených do poškození buněk zprostředkovaného UVB zářením, jako jsou MMP, COX-2 a IL-6, provedli jsme Western blot analýzu MAPK proteinů (p38, JNK a ERK ), které jsou před signálem aktivátorového proteinu 1 (AP-1). Exprese fosforu-p38, fosfo-JNK a fosforu se po ošetření Pg-C-EE za podmínek indukce UVB snížila (obr. 2F). Tyto výsledky byly potvrzeny zkoumáním exprese MMP-1 a MMP-9 v podmínkách UVB ozařování za použití inhibitorů MAPK (SB203580, SP600125 a U0125). SP600125 a U0126 snižovaly expresi MMP-1 a SB203580 snižovaly expresi MMP-9 ve stejném rozsahu jako léčba Pg-C-EE (obr. 2G).

3.3. Kožně ochranná aktivita Pg-C-EE proti peroxidu vodíku

Prozkoumat zdaPg-C-EEchrání před poškozením vyvolaným H2O2-, HaCaT buňky byly ošetřeny H2O2 s a bez Pg C-EE a vyfotografovány (obr. 3A) Počet HaCaT buněk za každé podmínky byl 202 pro neošetřenou skupinu, 49 pro 1 mM H2O2, 91 pro 1 mM H2O2 plus 100 mg/ml Pg-C-EE, 115 pro 1 mM H2O2 plus 200 mg/ml Pg-C-EE a 111 pro 1 mM H2O2 plus 100 mg/ml Pg-C-EE (Obr. 3A, pravý panel). Tato data potvrdila, že Pg-C-EE inhibuje poškození buněk vyvolané H2O2-. Obecně se H2O2 podílí na produkci ROS v buňkách. ROS podporuje stárnutí kůže prostřednictvím MMP. Léčba pomocí Pg-C-EE za podmínek vyvolaných H2O2-snížila hladiny exprese MMP-1, MMP-3, MMP-9 a hemoxygenázy{{46} } způsobem závislým na dávce. V expresi jaderného faktoru 2 nedošlo k žádné změně (obr. 3B). Ke studiu aktivity Pg-C-EE pohlcující radikály jsme provedli test DPPH s použitím kyseliny askorbové (500 mM) jako pozitivní kontroly pohlcující radikály. Hladiny vychytávání Pg-C-EE byly 3,25 procenta (50 mg/ml), 2,87 procenta (100 mg/ml), 6,72 procenta (200 mg/ml) a 11,97 procenta (400 mg/ml), zatímco kyselina askorbová vykázala vyplachovací účinek 88,5 procenta (obr. 3C). Pro objasnění předchozích výsledků byly hladiny exprese MMP-3 a MMP-9 za podmínek léčby H2O2 měřeny v přítomnosti inhibitorů MAPK (SB203580, SP600125 a U0125). SB203580, SP600125 a U0126 snížily expresi MMP-3 ve stejném rozsahu jakoPg-C-EEléčba. Exprese MMP-9 však byla inhibována pouze SB203580 mezi inhibitory MAPK (obr. 3D).

3.4. Vliv Pg-C-EE na aktivitu zadržování vlhkosti pokožky a syntézu kolagenu

Přírodní hydratační faktor (NMF), který zvyšuje hydrataci pokožky, je HA. HAS je široce známý jako gen, který syntetizuje NMF. Hladiny mRNA genů souvisejících s produkcí NMF, filagrinu (FLG), transglutaminázy-1 a HAS{1}}, 2, 3 nebyly ovlivněny působením Pg-C-EE (obr. 4A). Nicméně exprese hyaluronidázy (HYAL), o které je známo, že degraduje HA, byla snížena Pg-C-EE. Zejména HYAL-4 byl významně snížen ve stejném rozsahu jako retinol (jako pozitivní kontrola) (obr. 4B). Col1A1 (kolagen, typ I, alfa 1) neměl žádný vliv na léčbu Pg-C-EE; nicméně Col2A1 (kolagen, typ II, alfa 1) měl tendenci zvyšovat účinky Pg-C-EE (obr. 4C).

3.5. Vliv Pg-C-EE na regulaci transkripčních faktorů

Melanogeneze a poškození buněk indukované ROS jsou spojeny se signálními proteiny AP-1, jako jsou MAPK. Abychom podpořili výše uvedené výsledky, měřili jsme luciferázovou aktivitu pomocí konstruktu plazmidu AP-1-Luc. Je zajímavé, že Pg-C-EE v závislosti na dávce inhiboval aktivity luciferázy zprostředkované AP-1 spouštěné PMA (100 nM) (obr. 5A). Signalizace CREB spojená s melanogenezí byla analyzována pomocí plazmidu CREB-Luc. Forskolinem spouštěná luciferázová aktivita zprostředkovaná CREB byla snížena Pg-C-EE způsobem závislým na dávce (obr. 5B). Bez stimulace byly buňky HEK293 transfekovány každým luciferázovým plazmidem [nukleární faktor-kB (NF-kB) a (Col1A1)] a ošetřeny Pg-C-EE. Aktivity luciferázy zprostředkované NF-kB a Col1A1- nevykazovaly žádný rozdíl podle nepřítomnosti nebo přítomnosti Pg-C-EE (obr. 5C, 5D).

4. Diskuze

Kožní buňky jsou buněčným typem, který je nejvíce ovlivněn vnějšími faktory prostředí a jsou důležité v každém věku po celý život. Tato studie byla provedena s cílem prozkoumat ochranu kožních buněk a jejich udržení ve zdravém stavu. Vnější podněty můžeme rozdělit na podněty fyzikální nebo chemické. Z fyzikálních podnětů je známo, že UV záření se podílí na melanogenezi a tvorbě vrásek. Tvorba vrásek je spojena s degradací ECM [23] a UV záření snadno ničí ECM. Mezi UV spektrem je známo, že UVB s vlnovou délkou 280e315 nm proniká horní vrstvou dermis. Penetrační síla UVB záření je účinnější než UVA vlnových délek 315e400 nm a UVC vlnových délek 100e280 nm [24]. UVB proniká vrstvou dermis a degraduje ECM, což má za následek fotostárnutí pokožky. Vrstva kůže stárnoucí světlem vykazuje různé důsledky tohoto poškození, včetně inhibice syntézy kolagenu, degradace kolagenu, upregulace exprese MMP, mutací DNA, produkce melaninu a lokální imunosuprese [25]. Poškození DNA způsobené UV zářením vede přímo k jednořetězcovým zlomům DNA prostřednictvím tvorby thymidinových dimerů [26] a nepřímo ke vzniku ROS prostřednictvím vyčerpání buněčných antioxidantů a antioxidačních enzymů (superoxiddismutáza, kataláza) [27]. V souladu se zvýšením MMP s UV zářením fungují MMP jako kolagenázy, želatinázy, stromelysiny a MMP membránového typu (mt-MMP) v kožních buňkách. MMP lze dále rozdělit podle funkčních rozdílů. Kolagenázy jsou schopny degradovat trojšroubovicové fibrilární kolageny a zahrnují MMP-1 (intersticiální kolagenáza), MMP-8 (neutrofilní kolagenáza) a MMP-13 (kolagenáza 3). Gelatinázy se vyznačují přítomností další domény vložené do katalytické domény a zahrnují MMP- 2 (gelatináza-A) a MMP-9 (gelatináza-B). Stromelysiny, včetně MMP-3 (stromelysin 1), MMP-10 (stromelysin 2) a MMP-11 (stromelysin 3), vykazují širokou schopnost štěpit proteiny extracelulární matrix; tyto enzymy však nejsou schopny štěpit trojšroubovicové fibrilární kolageny. Proto je regulace exprese MMP velmi důležitým faktorem ve stárnoucích buňkách, jako jsou buňky s fotostárnutím. UV záření zvyšuje produkci ROS a expresi MMP v buňkách. Mezi role ROS v buňkách patří obrana hostitele [28], hojení ran, udržování krevní homeostázy (k získávání krevních destiček), poškození DNA nebo RNA, oxidace aminokyselin, oxidační deaktivace specifických enzymů, urychlené stárnutí [29], a indukci rakoviny [30e32]. Kromě toho mohou být exogenní ROS produkovány z hydroxylových radikálů, peroxidu vodíku, superoxidových radikálů a nakonec kyslíku. Především peroxid vodíku vzniká u savců jako krátkodobý produkt v biochemických procesech a je toxický pro buňky. Peroxid vodíku může způsobit podráždění a alergické reakce a ve vysokých koncentracích může způsobit puchýře, zarudnutí a další poškození kůže. Příčinou cytotoxicity jsou procesy oxidačního stresu v kožních buňkách. Oxidační stres se kromě procesu stárnutí podílí na mnoha lidských onemocněních, jako jsou srdeční choroby a Alzheimerova choroba. Cytotoxicita je důsledkem oxidace proteinů, membránových lipidů a DNA peroxidovými ionty. Z těchto důvodů je důležité udržovat hladinu antioxidantů v kožních buňkách.

Produkce melaninu indukovaná UV zářením prostřednictvím aktivace melanocytů a tvorby ROS. Iniciace melanogeneze vystavením UV záření způsobuje opálení kůže. Melanin je schopen rozptýlit přibližně 99,9 procent absorbovaného UV záření [33]; melanin má proto kožní ochrannou aktivitu proti poškození UV zářením. Melanin je však spojován se zvýšeným rizikem maligního melanomu, rakoviny melanocytů. Syntéza melaninu zahrnuje řetězec enzymaticky katalyzovaných chemických reakcí a neenzymově katalyzovaných reakcí [34e36]. Hlavním prekurzorem melaninu je přeměna L-tyrosinázy na L-DOPA, která je katalyzována enzymem tyrosinázou [36,37]. Různé druhy enzymů, které se také účastní syntézy melaninu, zahrnují protein 1 příbuzný tyrosináze (TRP-1 a TYRP1 a protein příbuzný tyrosináze 2 (TRP-2 a TYRP2). Podle Keggových drah je melanogeneze složitá regulační kontrola více agens Nejvýznamnějším pozitivním regulátorem melanogeneze je MC1 receptor s jeho ligandy melanokortinovými peptidy MC1 receptor aktivuje CREB [38,39] Zvýšená exprese MITF a jeho aktivace fosforylací stimulují transkripci tyrosinázy (TYR ), TRP-1 a dopachromová tautomeráza, která produkuje melanin. Syntéza melaninu probíhá v intracelulárních organelách zvaných melanosomy [40e42] a je regulována touto cestou. Nadměrná produkce melaninu může způsobit kožní skvrny a některá onemocnění. Nedávno ženy ukázaly značný zájem o bělení kůže a mnoho společností studuje látky, které inhibují produkci melaninu.

Mnoho studií ukázalo, že korejský ženšen a korejský červený ženšen mají prospěšnou aktivitu [43]. Dosud však byla studována pouze zánětlivá regulační aktivita nebo fytochemické složky Pg-C-EE. V této studii jsme zkoumali účinky Pg-C-EE na melanogenezi, fotostárnutí, oxidační stres, zadržování vlhkosti a tvorbu vrásek pomocí buněk B16F10 indukovaných a-MSHe a buněk HaCaT indukovaných peroxidem vodíku a UVB. Zjistili jsme, že Pg-C-EE lze použít jako prostředek na ochranu kůže, protože potlačuje sekreci melaninu a syntézu melaninu stejně účinně jako arbutin (obr. 1B, 1C) [44]. Zjistili jsme také, že aktivity houbové tyrosinázy, která je nejdůležitějším enzymem při produkci melaninu, byly sníženy ve skupině ošetřené Pg-C-EE ve stejném rozsahu jako u kyseliny kojové (obr. 1D). Poté jsme zkoumali hladiny mRNA genů souvisejících s melanogenezí a zjistili jsme, že hladiny mRNA se ve skupině léčené Pg-C-EE významně nezměnily (obr. 1E). Potvrdili jsme proto hladiny proteinů tyrosinázy, TRP-1, 2 a MITF za 48-hPg-C-EEpodmínky ošetření a fosfo- a celkový p38, ERK a CREB za podmínek ošetření 24-h Pg-C-EE. Všechny hladiny proteinů byly sníženy v závislosti na dávce ve skupině léčené Pg-C-EEe (obr. 1F, 1G). Proto jsme přesvědčeni, že Pg-C-EE má antimelanogenní aktivitu v buňkách B16F10. V naší studii bylo zjištěno, že Pg-C-EE má účinnou antioxidační aktivitu a aktivitu proti fotostárnutí. Je zajímavé, že hladiny mRNA MMP byly oslabeny v závislosti na dávce ve skupině ošetřené Pg-C-EE za podmínek indukce UVB i peroxidem vodíku (obr. 2C, 3B). Za podmínek indukce UVB Pg-C-EE také snižoval expresi IL-6, nejdůležitějšího faktoru v zánětlivých kožních buňkách (obr. 2E). Ještě překvapivější je, že Pg-C-EE inhiboval buněčnou smrt v důsledku působení peroxidu vodíku (obr. 3A). V testu DPPH vykazoval Pg-C-EE podobné antioxidační účinky jako jiné extrakty P. ginseng (obr. 3C) [45]. Zjistili jsme, že hladiny mRNA HYAL2 a HYAL4 v podmínkách indukce UVB byly oslabeny v buňkách ošetřených Pg-C-EE (400 mg/ml) (obr. 4B), což ukazuje, že Pg-C-EE může regulovat zadržování vlhkosti v kůži. buňky. Překvapivě jsme také zjistili, že Pg-C-EE může napomáhat tvorbě kolagenu (obr. 4C). Zkoumali jsme, které transkripční faktory regulovaly výše uvedený proces prostřednictvím luciferázového systému. Transfekcí luciferázou NF-kB a Col1A1 a ošetřením pomocí Pg-C-EE jsme potvrdili, že aktivity luciferázy řízené NF-kB a Col1A1- byly ovlivněny Pg-C-EE (obr. 5C , 5 D). Také jsme ukázali, že AP-1 zprostředkovává luciferázovou aktivitu s indukcí PMA a luciferázovou aktivitu zprostředkovanou CREB s indukcí forskolinem. Obě aktivity luciferázy byly sníženy působením Pg-C-EE (obr. 5A, 5B). Tyto výsledky ukazují, že Pg-C-EE má ochranný účinek na pokožku prostřednictvím AP-1 a CREB. Několik experimentů provedených s použitím AP-1 inhibitorů (MAPK inhibitor; SB203580, SP600125 a U0126) [46e48] ověřilo výsledky z Obr. 1e3 (obr. 1H, 2G a 3D).

V souhrnu jsme to zjistiliPg-C-EEprojevoval ochranné účinky na kůži prostřednictvím antimelanogenezní aktivity u buněk B16F10 indukovaných a-MSHe, aktivity proti stárnutí v buňkách HaCaT ozářených UVB a antioxidační aktivity v buňkách HaCaT indukovaných peroxidem vodíku. Kromě toho Pg-C-EE inhiboval transkripční faktory AP-1 a CREB a jejich upstream aktivační dráhu (MAPK a CREB). Stručné shrnutí každé aktivity je znázorněno na obr. 6. Tyto výsledky naznačují, že Pg-C-EE může být nápomocný jako složka zlepšující pleť prostřednictvím blokády signálních proteinů AP-1 a CREB.

Střet zájmů

Poděkování

Tento článek byl podpořen Konkuk University v roce 2016.

Příloha A. Doplňující údaje

Doplňující údaje související s tímto článkem lze nalézt.

Reference

[1] Murphy K, Weaver C. Janewayova imunobiologie. Garland Science 2016.

[2] Wilkinson P, Millington R. Skin (vyd. v digitálně tištěné verzi). Cambridge (GB) [atd.]: Cambridge univerzitní tisk; 1983.

[3] Kumar CM, Sathisha U, Dharmesh S, Rao AA, Singh SA. Interakce sesamolu (3, 4-methylendioxyfenol) s tyrosinázou a její vliv na syntézu melaninu. Biochimie 2011;93:562e9.

[4] Laskin JD, Piccinini L, Engelhardt DL, Weinstein IB. Řízení syntézy a sekrece melaninu buňkami melanomu B16/C3. J Cell Physiol 1982;113:481e6.

[5] Kim SS, Kim MJ, Choi YH, Kim BK, Kim KS, Park KJ, Park SM, Lee NH, Hyun C G. Down-regulation of tyrosinase, TRP-1, TRP-2 a MITF exprese citrusovými lisovanými koláči u myšího melanomu B16 F10. Asian Pac J Trop Biomed 2013;3:617e22.

[6] Kähäri VM, Saarialho-Kere U. Matrixové metaloproteinázy v kůži. Exp Dermatol 1997;6:199e213.

[7] Curran S, Murray GI. Matrixové metaloproteinázy v nádorové invazi a metastázování. J Pathol 1999;189:300e8.

[8] Verma RP, Hansch C. Matrixové metaloproteinázy (MMP): chemicko-biologické funkce a (Q) SAR. Bioorg Med Chem 2007;15:2223e68.

[9] Senftleben U, Karin M. The IKK/NF-kB pathway. Crit Care Med 2002;30:S18e 26.

[10] Chung JH, Kang S, Varani J, Lin J, Fisher GJ, Voorhees JJ. Snížená kináza regulovaná extracelulárním signálem a zvýšená aktivita kinázy MAP aktivovaná stresem ve stárnoucí lidské kůži in vivo. J Invest Dermatol 2000;115:177e 82.

[11] Ma Q. Role nrf2 v oxidativním stresu a toxicitě. Annu Rev Pharmacol Toxicol 2013;53:401e26.

[12] Kim E, Kim D, Yoo S, Hong YH, Han SY, Jeong S, Jeong D, Kim JH, Cho JY, Park J. Ochranné účinky na pokožku sloučeniny K, metabolitu ginsenosidu Rb1 z Panax ginseng. J Ginseng Res 2018;42:218e24.

[13] Papakonstantinou E, Roth M, Karakiulakis G. Kyselina hyaluronová: klíčová molekula při stárnutí pleti. Dermatoendokrinol 2012;4:253e8.

[14] Christensen LP. Ginsenosidy: chemie, biosyntéza, analýza a potenciální účinky na zdraví. Adv Food Nutr Res 2008;55:1e99.

[15] Qi LW, Wang CZ, Yuan CS. Ginsenosidy z amerického ženšenu: chemická a farmakologická rozmanitost. Fytochemie 2011;72:689e99.

[16] Han SY, Kim J, Kim E, Kim SH, Seo DB, Kim JH, Shin SS, Cho JY. AKT-cílená protizánětlivá aktivita etanolového extraktu z kalichu ženšenu Panax. J Ginseng Res 2017.

[17] Oh Y, Lim HW, Kim K, Lim CJ. Ginsenoside Re zlepšuje funkci kožní bariéry v keratinocytech HaCaT za normálních podmínek růstu. Biosci Biotechnol Biochem 2016;80:2165e7.

[18] Ramesh T, Kim SW, Hwang SY, Sohn SH, Yoo SK, Kim SK. Panax ginseng snižuje oxidační stres a obnovuje antioxidační kapacitu u starých potkanů. Nutr Res 2012;32:718e26.

[19] Kim HG, Yoo SR, Park HJ, Lee NH, Shin JW, Sathyanath R, Cho JH, Son CG. Antioxidační účinky Panax ginseng CA Meyer u zdravých subjektů: randomizovaná, placebem kontrolovaná klinická studie. Food Chem Toxicol 2011;49:2229e 35.

[20] Bradford MM. Rychlá a citlivá metoda pro kvantifikaci mikrogramových množství bílkovin využívající princip vazby protein-barvivo. Anal Biochem 1976;72:248e54.

[21] Park JG, Kang WS, Park KT, Park DJ, Aravinthan A, Kim JH, Cho JY. Protirakovinný účinek joboksansamu, korejského divokého ženšenu vyklíčeného z ptačích výkalů. J Ginseng Res 2016;40:304e8.

[22] Blois čs. Stanovení antioxidantů pomocí stabilního volného radikálu. Příroda 1958;181:1199e200.

[23] Rittié L, Fisher GJ. Signální kaskády indukované UV zářením a stárnutí pleti. Aging Res Rev 2002;1:705e20.

[24] Hlavní MA. Nitrooční čočky blokující fialové a modré světlo: fotoprotekce versus fotorecepce. Br J Ophthalmol 2006;90:784e92.

[25] Giudice GJ, Fuchs EV. Vitamin A zprostředkovaná regulace diferenciace keratinocytů. Methods Enzymol 1990;190:18e29.

[26] Bernstein C, Bernsův přehled degradace matrice. Int J Cosmet Sci 2005;27:17e34.

[28] Bickers DR, Athar M. Oxidační stres v patogenezi kožních onemocnění. J Invest Dermatol 2006;126:2565e75.

[29] Muller FL, Lustgarten MS, Jang Y, Richardson A, Van Remmen H. Trendy v teoriích oxidativního stárnutí. Free Radic Biol Med 2007;43:477e503.

[30] Irani K, Xia Y, Zweier JL, Sollott SJ, Der CJ, Fearon ER, Sundaresan M, Finkel T, Goldschmidt-Clermont PJ. Mitogenní signalizace zprostředkovaná oxidanty ve fibroblastech transformovaných Ras. Science 1997;275:1649e52.

[31] Ramsey MR, Sharpless NE. ROS jako nádorový supresor? Nat Cell Biol 2006;8: 1213e5.

[32] Renschler MF. Vznikající role reaktivních forem kyslíku v terapii rakoviny. Eur J Cancer 2004;40:1934e40.

[33] Meredith P, Riesz J. Radiační relaxační kvantové výtěžky pro syntetický eumelanin. Photochem Photobiol 2004;79:211e6.

[34] Kondo T, Slyšení VJ. Aktualizace o regulaci funkce melanocytů savců a pigmentace kůže. Expert Rev Dermatol 2011;6:97e108.

[35] Chang TS. Aktualizovaný přehled inhibitorů tyrosinázy. Int J Mol Sci 2009;10: 2440e75.

[36] Slominski A, Tobin DJ, Shibahara S, Wortsman J. Pigmentace melaninu v kůži savců a její hormonální regulace. Physiol Rev 2004;84:1155e 228.

[37] Ebanks JP, Wickett RR, Boissy RE. Mechanismy regulující pigmentaci kůže: vzestup a pokles zbarvení pleti. Int J Mol Sci 2009;10:4066e87.

[38] Leyden J, Wallo W. Mechanismus účinku sóji pro léčbu hyperpigmentace. Int J Dermatol 2011;50:470e7.

[39] Kundu JK, SURH YJ. Epigalokatechin galát inhibuje forbolesterem indukovanou aktivaci NF-kB a CREB v kůži myší. Ann NY Acad Sci 2007;1095: 504e12.

[40] Busca R, Ballotti R. Cyklický AMP klíčový posel v regulaci kožní pigmentace. Pigment Cell Melanoma Res 2000;13:60e9.

[41] Park H, Gilchrest B. Signální dráhy zprostředkovávající melanogenezi. Cell Mol Biol (Noisy-le-grand) 1999;45:919e30.

[42] SLUCH VJ. Melanozom: dokonalý model pro buněčné reakce na prostředí. Pigment Cell Melanoma Res 2000;13:23e34.

[43] Kim K. Vliv ženšenu a ginsenosidů na melanogenezi a mechanismus jejich účinku. J Ginseng Res 2015;39:1e6.

[44] Maeda K, Fukuda M. Arbutin: mechanismus jeho depigmentačního účinku v kultuře lidských melanocytů. J Pharmacol Exp Ther 1996;276:765e9.

[45] Kim SJ, Murthy HN, Hahn EJ, Lee HL, Paek KY. Parametry ovlivňující extrakci ginsenosidů z adventivních kořenů ženšenu (Panax ginseng CA Meyer). Sep Purif Technol 2007;56:401e6.

[46] Wong VW, Rustad KC, Akaishi S, Sorkin M, Glotzbach JP, Januszyk M, Nelson ER, Levi K, Paterno J, Vial IN. Fokální adhezní kináza spojuje mechanickou sílu s kožní fibrózou prostřednictvím zánětlivé signalizace. Nat Med 2012;18:148e52.

[47] Chun KS, Keum YS, Han SS, Song YS, Kim SH, Surh YJ. Kurkumin inhibuje forbolesterem indukovanou expresi cyklooxygenázy-2 v myší kůži prostřednictvím suprese aktivity kinázy regulované extracelulárním signálem a aktivace NF-kB. Karcinogeneze 2003;24:1515e24.

[48] ​​Gangnuss S, Cowin AJ, Daehn IS, Hatzirodos N, Rothnagel JA, Varelias A, Rayner TE. Regulace aktivace MAPK, exprese transkripčního faktoru AP-1 a diferenciace keratinocytů v poraněné kůži plodu. J Invest Dermatol 2004;122:791e804.

Požádejte o více: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501