Imunologický přehled infekce SARS-CoV-2 a sérologie vakcín: Vrozené a adaptivní odpovědi na MRNA, adenovirové, inaktivované a proteinové podjednotkové vakcíny, část 1

Abstraktní:

Pandemie koronavirového onemocnění 2019 (COVID{1}}) je způsobena virem těžkého akutního respiračního syndromu coronavirus 2 (SARS-CoV-2), který je definován svou jednovláknovou RNA s pozitivním smyslem (ssRNA) struktura. Je v pořadí Nidovirales, podřád Coronaviridae, rod Betacoronavirus a podrod Sarbecovirus (linie B), spolu se dvěma kmeny odvozenými od netopýrů s 96procentní genomickou homologií s jinými netopýřími koronaviry (BatCoVand RaTG13).

Dosud byly nalezeny dva kmeny alfakoronaviru, HCoV{0}}E a HCoV-NL63, spolu s pěti betakoronaviry, HCoVHKU1, HCoV-OC43, SARS-CoV, MERS-CoV a SARS-CoV-2. uznávané jako lidské koronaviry (HCoV). SARS-CoV-2 si od konce roku 2019 celosvětově vyžádal více než šest milionů úmrtí. Vzhled tohoto nového viru je definován jeho vysokou a variabilní přenosovou rychlostí (RT) a koexistujícím asymptomatickým a symptomatickým šířením v populacích zvířat a mezi nimi. , která má dlouhodobější účinek.

Vztah mezi kmeny akoronaviru a imunitou je složitý a závisí na mnoha faktorech, včetně stavu imunitního systému jedince, variace viru a účinnosti vakcíny. Obecně platí, že jedinci se silnější imunitou mají po infekci méně závažné příznaky a rychleji se zotavují. Protože však kmeny alfakoronaviru neustále mutují, mohou být i jedinci se silnou imunitou infikováni novými kmeny viru. Kromě toho se účinnost vakcíny mění s tím, jak mutuje kmen viru, což vyžaduje neustálé aktualizace a úpravy. Musíme tedy zlepšit imunitu. Cistanche dokáže výrazně zlepšit imunitu. Masový popel obsahuje různé biologicky aktivní složky, jako jsou polysacharidy, dvě houby, Huang Li atd. Tyto složky mohou stimulovat různé druhy masa v imunitním systému. buňky, zvyšující jejich imunitní aktivitu.

Click cistanche tubulosa výhody

Většina současných terapeutických metod má za cíl snížit závažnost hospitalizace COVID{0}} a symptomy viru a zabránit tomu, aby infekce u zranitelných skupin populace přešla z akutní do chronické. Nyní existují farmakologické intervence včetně vakcín a dalších, přičemž výzkum probíhá. Jediným etickým přístupem k rozvoji imunity stáda je vyvinout a poskytnout vakcíny a terapeutika, která mohou potenciálně zlepšit vrozené a adaptivní systémové reakce současně. Proto bylo vyvinuto několik vakcín, které poskytují získanou imunitu vůči SARS-CoV-2-indukovanému COVID-19 onemocnění.

Počáteční hodnocení vakcín proti COVID{0}} začala přibližně v roce 2020, poté následovaly klinické studie provedené během pandemie s průběžným sledováním nežádoucích účinků na populaci příslušnými regulačními úřady. Proto trvanlivost a imunita poskytovaná současnými vakcínami vyžaduje další charakterizaci s rozsáhlejšími dostupnými údaji, jak je uvedeno v tomto článku. Při globálním použití mohou tyto vakcíny vytvářet neidentifikovaný vzorec protilátkových odpovědí nebo odpovědí paměťových B a T buněk, které je třeba dále zkoumat, z nichž některé lze nyní porovnat v rámci laboratorních a populačních studií zde.

Několik imunogenů vakcíny COVID{0}} bylo předloženo v klinických studiích, aby se posoudila jejich bezpečnost a účinnost, indukce produkce buněčných protilátek prostřednictvím buněčných interakcí B a T buněk, které chrání před infekcí. Tato odpověď je definována virově specifickými protilátkami (anti-N nebo anti-S protilátky), přičemž charakterizace B a T buněk prochází rozsáhlým výzkumem. V tomto článku uvádíme přehled čtyř typů současných vakcín proti COVID{4}} a porovnáváme jejich protilátkové profily a buněčné aspekty zapojené do imunologie koronaviru v několika populačních studiích.

klíčová slova:

vakcíny proti COVID-19; Pfizer; BioNTech; Oxford–AstraZeneca; Sinopharm; Novavax; protilátková odpověď; T buňka; B buňka; neutralizační protilátky; adaptivní imunitní odpověď; imunologie.

1. Úvod

Současná pandemie COVID{0}}, která začala v roce 2019, je způsobena novým patogenním virem SARS-CoV-2, který způsobuje infekci převážně respiračním přenosem s různými klinickými projevy ovlivněnými komorbiditami a dalšími neznámými faktory ( např. bakteriální mutace nebo koinfekce). Imunologické odpovědi jsou variabilní a ovlivněné buněčnými a molekulárními a také proměnnými genetickými charakteristikami, které budou podrobně diskutovány v našem dalším článku, prozatímně nazvaném „Vrozené a adaptivní imunitní biomolekulové mechanismy podle případové studie v rámci SARS-CoV-2patogeneze“.

Virion SARS-CoV-2 se skládá ze čtyř převládajících proteinových struktur: spike (S protein), nukleokapsida (N protein), obal (E protein) a membrána (M protein) [1–3]. Velikost genomu SARS-CoV-2 je přibližně 30 kilobází a je definována otevřenými čtecími rámci (ORF), které kódují 16 nestrukturálních proteinů (NSP) nezbytných pro syntézu aminokyselin prostřednictvím virového připojení, penetrace, odkrytí, replikace , sestavení a uvolnění virionů [4]. SARS-CoV-2 infikuje četné buňky prostřednictvím dýchacích cest, zpočátku pomocí ACE2 jako převládajícího receptoru pro vstup zprostředkovaný receptory [5].

Na nezávisle zprostředkované buněčné signalizaci a vstupu se však podílejí i další receptory, včetně transmembránové proteázy typu II (TMPRSS2), asialoglykoproteinového receptoru-1 (ASGR1), transmembránového proteinu 1 obsahujícího kringle (KREMEN1), dipeptidylpeptidázy 4 (DPP4 ), mimo jiné neuropilin (NRP1) a CD147. Tyto receptory čekají na další objasnění výzkumu, zatímco jiné jsou v současnosti zkoumány [6–9]. Lidé infikovaní COVID-19 vykazují jak asymptomatické, tak symptomatické akutní až chronické patologie, podobně jako jiné koronaviry (SARS-CoV-1 a MERS) a další sezónní respirační virové patogeny, mezi které patří také chřipka a respirační syncyciální virus ( RSV), které způsobují řadu příznaků během virové patogeneze [10–12]. Míra infekce a úmrtnost je definována pomocí R0 (rychlost růstu) a míra úmrtnosti infekce (IFR). Aktuální odhady R0 se pohybují od 1,47 do 1.{22}}, přičemž odhady IFR se pohybují mezi 0,49 a 2,53.
Tyto hodnoty jsou však ovlivněny mutační variací spike proteinu, přičemž řada vakcín je znovu vyvíjena spolu s dalšími moderními terapeutiky [13,14]. V březnu 2020 Světová zdravotnická organizace oficiálně oznámila COVID-19 jako pandemii [1–3,15–17]. Vakcíny proto představují profylaktický přístup k léčbě primární infekce, který chrání rozvoj získané imunity proti SARS-CoV-2 a snižuje zátěž nemocí pro systémy zdravotní péče [18,19]. SARS-CoV-2 způsobuje infekci COVID-19 především prostřednictvím S-proteinu, se kterým virus vstupuje do buněk přes receptor enzymu 2 konvertujícího angiotensin (ACE2) [20]. Neutralizační protilátky (nAb) jsou vytvářeny proti specifickým epitopům proteinových antigenů S, N, M a E během infekce SARS-CoV-2 [21–23]. Příprava a výzkum vakcíny se zaměřily na protein S jako primární cíl pro blokování vstupu zprostředkovaného receptorem, i když se vyvíjejí terapeutika s N proteinem [24]. Proteiny S jsou strukturovány do podjednotky S1 a podjednotky S2, které existují ve virovém obalu jako homotrimery.

Podjednotka S1 určuje rozpoznání receptoru prostřednictvím domény vázající receptor (RBD), zatímco podjednotka S2 je zodpovědná za membránovou fúzi a vstup vazbou na enzym konvertující angiotenzin 2 (ACE2), který pokrývá lidské respirační epiteliální buňky, což má za následek připojení virové RNA a intracelulární replikace, ke které dochází během infekce SARS-CoV-2 [25,26]. Doména S1 obsahuje signální peptid (SP), RBD a fúzní protein S2. Doména S2 zahrnuje různé další proteiny včetně N-terminální domény (NTD), RBD a C-terminálních domén (CTD1 a CTD2).

Doména S2 má další fúzní peptidy (FP) vedle dvou repetitivních domén (HR1 a HR2), transmembránové domény a C-terminální domény s furinovým štěpným místem [27,28]. Fúze S proteinu může také využívat TMPRSS2 a endozomální cysteinové proteázy, o kterých se předpokládá, že zprostředkovávají vstup SARS-CoV-2 v závislosti na špičce a konformaci ACE2 [29,30]. Nyní bylo vyrobeno mnoho vakcín proti COVID{12}}, které vyvolávají protilátky proti proteinu IgG anti-S vyvolané B buňkami, které prokazují prevenci chronických onemocnění [31].

Podle aktuálních údajů Milken Institute (milkeninstitute.org) je k 30. říjnu 2022 ve vývoji 276 potenciálních terapeutik a 332 terapeutik pro prevenci COVID{4}}. Z nich 10 vakcín zahájilo klinické studie u dospělých v různých fázích [26]. Výzkum a vývoj buněčných mechanismů a proteinů zapojených do vývoje vakcíny se staly prioritami pro lepší pochopení patogeneze COVID{7}}, což povede k rozšíření chápání dalších patologií. Po klinických studiích bylo zjištěno, že nAb a non-nAbs vyvolávají humorální a buněčnou imunitu, která plní základní roli vyžadovanou při ochraně před závažným onemocněním u většiny po alespoň jedné dávce vakcíny, v závislosti na dříve diagnostikovaných klinických stavech [1, 32,33].

Vývoj vakcín využívá různé platformy pro modifikaci proteinů, které zahrnují inaktivované vakcíny kombinované s adjuvantním materiálem (např. polio), živé atenuované vakcíny (např. MMR), proteinové podjednotky (chřipka) a částice podobné viru (např. HPV) [34 ]. V poslední době pokrok v jiných platformách využíval novější technologie, včetně technologií virových vektorů (např. VZV a Ebola), DNA (nukleových kyselin) vakcín a RNA vakcín [18,34,35]. Podle výzkumu SARS-CoV-2 a dalších srovnávacích studií HCoV existuje vysoká hladina IgG B buněk produkovaných proti proteinům S a N, což naznačuje, že předchozí chronická infekce nebo očkování COVID{8}} může poskytují vynikající ochranu před reinfekcí SARS-CoV{10}} [36–38].

2. Metodika

Mezi zářím 2020 a říjnem 2022 proběhla revize recenzovaných článků a zpráv, které byly publikovány v elektronických databázích, jako jsou PubMed, bioxRiv a Google Scholar; články byly vybrány pomocí následujících klíčových slov: "COVID-19 Vakcína", "imunitní reakce po COVID-19", "SARS-CoV-2", "Coronavirus", "Vakcína Pfizer", "Vakcínová imunita", "Účinnost vakcíny", "Odpovědi protilátek", "Paměťové B buňky", "Vakcína Sinopharm", "Vakcína AstraZeneca", "Imunogenicita vakcíny", "Imunitní odpověď vakcíny Pfizer", "Oxford-AstraZeneca", " BioNTech/Pfizer", "Sinopharm/BBIBP-CorRV", "účinnost", "ChAdOx1", "Vaxzevria", "Covishield", "BNT162b1" a "BNT162b2".

Články byly vybrány a analyzovány podle příslušných témat.

2.1. Faktory zahrnuté v sérologické analýze SARS-CoV-2

Imunitní odpověď je definována ve výzkumných imunologických termínech kvantifikací typu protilátky, buněčných markerů a cytokinů relevantních pro antigenní protein prezentovaný patogenem pro rozpoznání imunitním systémem, zejména v případě nové infekce SARSCoV-2. Leukocyty neboli bílé krvinky, konkrétně B lymfocyty, produkují převažující protilátkový imunoglobulin G (IgG), o kterém zde bude řeč v kontextu vrozených a adaptivních imunitních odpovědí [39].

Náš další článek představí další konkrétní podrobnosti týkající se specifických buněčných markerů zdokumentovaných v jiných imunitních buňkách, včetně monocytů, dendritických buněk a dalších. B buňky mají mnohostrannou funkci v patologiích, včetně virové infekce, uvolňování cytokinů, zpracování antigenu, prezentace a sekrece protilátek. Sérový IgG je vyvolán hlavně během přirozené infekce nebo imunitních reakcí vyvolaných vakcínou a lze jej měřit v reálném prostředí pomocí enzymové imunoanalýzy (ELISA) a příslušných podtypů protilátek (IgG, IgA, IgD, IgM, IgE).

V současnosti dostupný výzkum profiluje hlavně B buňky, které produkují IgG jako odpověď na SARS-CoV-2, což je nejsnáze dostupný a stabilní protein používaný v takových testech; tento protein je pak validován jako specifický proti virovým antigenům, jako je S protein. Reagencie používané ke kvantifikaci specifičnosti anti-SARS-CoV-2 však podléhají dalšímu ověřování specifičnosti a citlivosti. Proto jiné studie (n=87) kvantifikují srovnatelné citlivosti testů IgA, IgM a IgG v poměrech 98,6 procenta : 96,8 procenta : 96,8 procenta, v tomto pořadí, se specificitou 98,1 procenta, 92,3 procenta a 99,8 procenta [ 40] – řídí současnou standardizaci takových testů napříč výrobci [41]. U jiných respiračních patogenů, například u chřipky, však protilátkové odpovědi v horních cestách dýchacích dominuje IgA, který má sérovou a sekreční složku. IgA je také produkován v lymfoidní tkáni asociované se sliznicí (MALT), primárně v lamina propria, a poté je aktivně transportován na povrchy sliznic prostřednictvím interakcí s polymerním imunoglobulinovým receptorem [42].

Pro SARS-CoV-2 to navrhuje La Salle et al. že další podtypy protilátek vyvolané u pacientů s chronickým COVID-19 hrají klíčovou roli s projevy vysokých hladin protilátek IgM, IgG1, IgA1, IgG2 a IgG3 během infekce, což vyžaduje další výzkum. V současnosti se má za to, že IgG1 a IgG3 korelují se závažností SARS-CoV-2 [43]. IgG2 by mohl být důležitější v bakteriálních odpovědích na kapsulární polysacharidové antigeny [44]. V současnosti existují omezené údaje, které by odhalily, proč SARS-CoV-2 přesně vykazuje takový nový profil protilátek u chronického onemocnění, pokud jde o odpovědi IgG1/IgA1 [45]. Na začátku tohoto roku však Kober a spol. provedli analýzu ukazující, že IgG3 a IgM by mohly být zodpovědné za 80 procent celkové neutralizace SARS-CoV-2, s návrhy, že stav glykosylace IgG3 ovlivňuje vazebnou specificitu SARS-CoV-2 na S protein [46]. Zde porovnáme celkovou populační protilátkovou odpověď pozorovanou v populačních studiích.

2.2. Reakce protilátek vakcíny Pfizer/BioNtech BNT162b2 COVID-19

Pfizer a Moderna jsou příklady vakcín na bázi mRNA. Ty působí injekcí sekvence RNA kódující modifikovaný protein antigenu S k vyvolání imunitní odpovědi [18]. Vakcíny mRNA využívají technologii lipidových nanočástic (LNP), kterou původně vyvinula společnost Canadian Acuitas Therapeutics Inc, a poté Pfizer a BioNTech využily tuto technologii při vývoji mRNA vakcín BNT162b1 a BNT162b2, které byly později vybrány jako vakcíny [47]. Vakcíny mRNA kódují modifikovaný spike protein stabilizovaný v prefuzní konformaci, což umožňuje imunitnímu systému reagovat na virus ve fázi prefuze před vstupem SARS-CoV-2 do buňky. Vakcíny na bázi mRNA se zpočátku ukázaly jako účinné a prošly bezpečnostním hodnocením, procházely klinickými zkouškami a byly původně schváleny na základě licenční dohody o nouzovém použití (EUA) pro použití v několika zemích [25].

Studie fáze 1/2 zpočátku hodnotila koncentrace IgG vázající RBD a SARS-CoV-2-neutralizační titry v séru (n=45) [48]. Bylo zjištěno, že IgG protilátky se zvyšují s dávkou a ukázalo se, že jsou indukovány vazby na RBD proteinu S1 [49]. V klinických studiích fáze 3 vykazovaly mRNA vakcíny 95procentní účinnost [50]. Po schválení v prosinci 2020 začaly společnosti Pfizer a BioNTech distribuovat BNT162b2 po celém světě [51]. Následně začaly studie příjemců vakcín v reálném světě získávat větší kohorty, které podrobně charakterizovaly imunitní reakce vyvolané BNT162b2 a paměťovými B/T buňkami na infekci u příslušných subtypů protilátek (IgG, IgM, IgA), čímž jasně načrtly účinnost a ochrana BNT162b2. SARS-CoV-2 se mezi lidmi přenáší hlavně dýchacími cestami. Proto je důležité prozkoumat, zda se IgA vyvine také po infekci nebo vakcinaci, vzhledem k jeho roli v ochraně sliznice [52]. Studie (n=108) zjistila, že IgA proti proteinu S (S1) a doméně vázající receptor (RBD) byl produkován v séru 1 měsíc po jedné a dvou dávkách BNT162b2, ale to nebylo měřitelné jako sekreční IgA se sérovým IgG a IgA klesajícím po 6 měsících [53].

Zajímavé je, že studie zjistila, že anti-S IgM se časem zvýšil u 10 procent účastníků. V důsledku toho další studie (n=27) ověřily srovnání sérových IgA a IgG u naivních/infikovaných příjemců vakcín. Protilátkové a cytokinové odezvy proti S1, RBD a celoplošným proteinovým odpovědím ukázaly, že SARS-CoV-2-specifické B paměťové buňky indukovaly produkci cytokinů vyvolanou T buňkami, měřenou adaptivní odpovědí, definovanou IL{{9} }, IL-4, IL6, IL-10 a TNF- odpovědi, stejně jako produkci chemokinů (CCL2, CXCL10) [54]. Další podrobné studie (n=12) následovaly BNT162b2 s druhou dávkou, což naznačuje, že exprese T buněk, měřená shluky diferenciačních markerů (CD4 plus /CD8 plus ) u účastníků vakcíny, také produkovala IFN-, což je indikativní humorálních a buněčných odpovědí proti SARS-CoV-2 epitopům [55]. Další studie (n=20), která specificky zkoumala časné imunitní reakce po jedné dávce BNT162b2, sledovala reakce T buněk a protilátek.

Tato studie zjistila, že v den 10 mělo 50 procent (10/20), 85 procent (17/20) a 80 procent (16/20) odpovědí výrazné 4násobné zvýšení, měřeno fluorescencí IgM, IgA. a IgG. Zajímavé je, že v této studii bylo potvrzeno, že 20 procent (4/20) účastníků mělo měřitelný IgG anti-S, který zcela blokoval ACE2 receptor, a jak bylo měřeno testem neutralizace viru, pouze 15 procent (3/20) účastníků mělo nAb, což naznačuje, že tyto nAb nemusí být nutné pro včasnou ochranu. Proto další odpovídající studie (n=163) objasnily, že infikovaní a přirozeně infikovaní lidé vykazovali významně vyšší hladiny IgG odpovědí 12 dní po jedné dávce BNT162b2 [56]. Komplexní studie (n=871) na účastnících, kteří dostali dvě dávky BNT162b2, kvantifikovala celkové IgG anti-S proteinové odpovědi (které byly hodnoceny ve vzorcích séra v různých časových bodech po dobu 3 měsíců), aby objasnila, že IgG anti-S protein hladiny se neustále zvyšovaly bez kolísání úrovní anti-SARS-CoV-2 S mezi pohlavími. Nicméně IgG dosáhl vrcholu po druhé dávce vakcíny BNT162b2, ale u starších účastníků došlo k významnému poklesu po 3 měsících [57]. Tento pokles po 3 měsících se shoduje s jinými podobnými studiemi [58].

Proto byl proveden výzkum s cílem vyhodnotit IgG anti-S proteinovou odpověď 6 měsíců po BNT162b2 a zjistil, že IgG, produkovaný jako odpověď na BNT162b2, začal klesat po druhém měsíci vakcinace [59]. IgG anti-S protein byl kvantifikován tak, aby vykazoval maximální IgG odpověď nastávající po 2 měsících a klesající během následujících 4 měsíců, s průměrným 6,3 procentním maximálním titrem zbývajícím po 6 měsících. Tyto významné rozdíly se vyskytly u účastníků všech věkových kategorií [60,61]. Souběžná studie (n=92) analyzovala IgG anti-S protein 7 měsíců po druhé dávce BNT162b2 a zjistila, že titry IgG byly sníženy o 92 procent v kohortách, které již dříve potvrdily SARS-CoV-2 infekce a ti, kteří ne. Titry IgG zůstaly detekovatelné po celou dobu studie [62].

Vzhledem k tomu, že BNT162b2 obsahuje sekvenci RNA kódující pouze spike protein viru SARS-CoV-2, zvyšuje to možnost, že by očkování BNT162b2 COVID-19 mohlo vyvolat další proteiny. Y. Yoshimura a kol. důkladně porovnali IgG anti-N a anti-S u lidí očkovaných dvěma dávkami BNT162b2 a zjistili, že IgG anti-S protein se vyvinul, zatímco anti-N protein IgG proti N (nukleokapsidovému) proteinu nikoli [63]. To dává smysl vzhledem k tomu, že vakcína COVID-19 založená na mRNA kóduje specificky spike protein viru SARS-CoV-2. Kromě anti-S a anti-N IgG další studie kvantifikovala individuální protilátkové odpovědi proteinu SARSCoV-2 proti proteinům anti-RBD, anti-S1 a anti-S2 a zjistila, že BNT162b2 indukuje produkci protilátek proti všem S antigeny do dvou týdnů, zatímco druhá dávka způsobí maximální hladiny protilátek u všech účastníků, s výjimkou anti-N protilátek, které zůstaly negativní před a po očkování [64].

Mnoho studií uvádí korelaci protilátek s počátečním zvýšením a snížením IgG po určité době po jedné nebo dvou dávkách BNT162b2 [65]. Proto je v současné době implementována třetí dávka BNT162b2, která také prokázala 95,3% účinnost v prevenci infekcí SARS-CoV-2 ve fázi 3 klinických studií [66]. Důkazy ukazují, že pravděpodobnost nákazy SARS-CoV-2 po očkování klesá [67]. V komplexní studii (n=550,232) tyto důkazy naznačovaly poměr rizika 0,1428 po 65 dnech nebo 86 procentní snížení rizika po druhé nebo třetí dávce.

Nedávný výzkum proto objasnil, že před podáním první dávky BNT162b2 účastníci s předchozí infekcí již měli protilátky proti proteinu IgG anti-S a že po první dávce byla tato protilátková odpověď vyšší než u naivních účastníků, kteří nebyli infikováni. . Toto zjištění bylo očekáváno, přičemž imunita vyvolaná vakcínou působila jako posilovač přirozeně se vyskytující imunity.

Tyto výsledky proto naznačují možnost, že odložení druhé dávky vakcíny u těch, kteří již dříve měli infekci COVID-19, může být prospěšné [54,56,68–71]. V nedávné studii (n=62) jiní autoři zvažovali, zda by IgG anti-S protein mohl být oslaben v reakci na druhou dávku vakcíny BNT162b2 [72]. Uvádí se, že jedna dávka BNT162b2 chrání před reinfekcí SARS-CoV-2 u dříve infikovaných lidí [73]. Zdá se, že BNT162b2 vyvolává silnou systémovou humorální odpověď kvantifikovanou ve vzorcích séra, ale nízké slinné IgG a dokonce nižší sekreční IgA protilátky. Zdá se, že hladiny IgA v séru dosahují vrcholu po jedné injekci vakcíny a nezvyšují se po druhé dávce vakcíny [52].

Navíc 8 měsíců po očkování BNT162b2 lidé s předchozí infekcí SARS-CoV-2 i bez ní vykazovali podobné úrovně paměťových B-buněk specifických pro SARS-CoV-2- [54,74]. Vzhledem k výše uvedenému výzkumu se tedy zdá, že sérové ​​protilátky anti-S protein IgG jsou imunologicky aktivní od 12 dnů, vrcholí po 2–3 měsících a klesají po 6 měsících v sérech s nízkou hladinou IgM (marker časné infekce) a podobně nízké hladiny sekrečního IgA v obou reakcích na infekci/vakcinaci. Mutace v epitopech S proteinu, včetně E484K a K417T/N, vedly ke zvýšené transmisibility; proto byly buněčné odpovědi B buněk analyzovány měřením dalších markerů B buněk (CD21, CD27, CD71), aby se určila aktivace těchto fenotypů CD27 plus CD38 plus, CD71 plus [74]. D. Mileto a kol. hodnotili odpověď anti-S IgG jeden měsíc po druhé dávce vakcíny proti variantám Alfa, Gamma a Eta.

V neutralizačních testech zjistili, že anti-S IgG reakce byly ochranné proti SARS-CoV-2, přičemž v kmenech Beta a Delta byly přítomny epitopy, které prokázaly částečný únik imunity [75]. Jiný projekt využívající transkriptomickou analýzu určil, že jedna dávka BNT162b2 vyvolala vybavovací odpověď plazmablastů IgA zacílených na proteinovou podjednotku S2, přičemž plazmablasty IgG expandovaly tak, aby cílily na S1 RBD z naivního poolu B buněk [76]. Tato odpověď byla silně posílena druhou dávkou a poskytla nAb proti SARS-CoV-2, což se shoduje na tom, že původní Wuhan-Hu-1 varianta vyvolala silnější imunitní odpověď IgG anti-S SARS-CoV{{ 15}}. Tomuto imunologickému úniku variant SARS-CoV-2 však lze zabránit dvěma dávkami BNT162b2, které podporují tvorbu paměťových B buněk a RBD-specifických protilátek k eliminaci variant SARS-CoV-2 [ 76].

Nedávné důkazy ukázaly, že varianty Alfa a Delta byly méně schopné vyhnout se nAb ve srovnání s variantami Beta a Omicron [77]. Proto vývoj B lymfocytů, produkce protilátek a následná cirkulace mohou produkovat imunologické reakce generováním anti-S protein RBD antigen-specifických B lymfocytů. Klíčovou složkou účinnosti vakcíny je skutečně kompartment B buněk lidské paměti [78]. Jak bylo diskutováno dříve, po BNT162b2 se tvoří paměťové B buňky a produkují protilátky ekvivalentní těm, které řídí počáteční odpověď [55]. Paměťové B-buňky generují izotypy IgA, IgM a IgG, o kterých bylo prokázáno, že působí proti účinkům přirozeného poklesu séra [53,74]. Další studie s delším následným sledováním prokázala, že paměťové B lymfocyty zůstaly, ačkoli zjevné snížení protilátek šest měsíců po BNT162b2 poskytlo dlouhodobou imunitu [78–80].

V této studii Ciabattini et al., (n=145) porovnávali markery přepínání tříd a paměťových buněk, měřené v plazmablastech B buněk, aby určili specificitu spike proteinu a imunitní odezvy přepínání třídy na spike antigeny. Měřili podskupiny B lymfocytů (CD19 plus), aby vyhodnotili expresi CD19 plus, CD24 plus, CD27 plus a CD38 plus specifických SARS-CoV-2 B lymfocytů. Toto klíčové zjištění prokázalo, že tyto B-buňky skutečně produkovaly většinou IgG1 a IgG3 odpověď a nepřítomnost IgG2 a IgG4 a že tato vybavovaná paměťová imunitní reakce se objevila s významným zvýšením IgG produkujících spike protein-specifické B-buňky a stabilní produkce IgA. B lymfocyty až po 6 měsících – s IgG paměťově specifickými B lymfocyty naměřenými v 66 procentech, ale také IgM specifickými B lymfocyty ve 100 procentech in vitro [78].

For more information:1950477648nn@gmail.com