Mapa metabolických fenotypů u pacientů s myalgickou encefalomyelitidou / chronickým únavovým syndromem Ⅱ

Lipidomy ME/CFS

V séru ze stejné kohorty studie byla provedena komplexní analýza komplexních lipidů. zzahrnovalo 892 druhů lipidů, 153 vykazovalo významně odlišné sérové ​​koncentrace v ME/CFSskupina ve srovnání se skupinou HC, z nichž 34 mělo nižší hladiny a 119 mělo vyšší hladiny (obrázek 6A;Soubor dat 2, listy 2 a 4). Součtové koncentrace lipidových tříd indikovaly zvýšení diacylglycerolů(DAG), TAG a dihydroceramid (DCER) a snížení lysofosfatidylcholinů (LPC) vSkupina ME/CFS ve srovnání se skupinou HC (soubor doplňkových údajů 2, list 3). Nicméně výrazné rozdílyv lipidovém profilu byly patrné při podskupinách podle navržených metabotypů ME/CFS.Celkově byla pozorována rozsáhlá koherence mezi účinky souvisejícími s lipidy na globální metabolomice(HD4) a lipidomické platformy (komplexní lipidomická platforma [CLP]). Následuje shrnutíjednotné a metabotypově specifické změny v sérových lipidech u pacientů s ME/CFS ve srovnání s HC subjekty.Jednotné lipidomové účinky ve skupině ME/CFS.Pouze 16 z 892 druhů lipidů vykazovalo jednotné účinkyv podskupinách ME-M1 a ME-M2 vzhledem ke skupině HC (soubor doplňkových dat 2, list 5). Z nich,13 sloučenin mělo nižší sérové ​​koncentrace u pacientů s ME/CFS a všechny z nich byly deriváty fosfolipidůlátky fosfatidylcholinu (PC) a fosfatidylethanolaminu (PE), včetně LPC a lysofosfatidylethanolamin (LPE). To zahrnovalo několik PE plazmalogenních sloučenin, které chemicky představujía biologicky unikátní fosfolipidová podtřída (49). Deset ze 13 rovnoměrně snížených druhů fosfolipidůobsahoval alespoň jednu acylovou skupinu 18:2, která představuje kyselinu linolovou, esenciální mastnou kyselinu a arachidonprekurzor kyseliny ledové (20:4). Celkově byla hladina kyseliny linolové v podtřídách fosfolipidů nízká(PC, PE, fosfatidylinositol [PI], LPC a LPE; obrázek 6B). Pouze 3 jednotlivé druhy lipidů byly jednotnézvýšené – sfingolipidy, CER(18:1), SM(18:0) a SM(18:1) – ale další sfingolipidy ukázalypodobné trendy. Pokud jde o účinky na celkový obsah mastných kyselin v séru (tj. esterifikovaných a neesterifikovaných),jedinou významnou jednotnou změnou v podskupinách ME-M1 a ME-M2 byla snížená úroveň 14:0 (obrázek 6B).Metabotyp ME-M1 lipidom.Tato podskupina měla významně zvýšenou sérovou koncentraci 23 z 892a snížená hladina 227 z 892 lipidových metabolitů ve srovnání se skupinou HC (obrázek 6; DoplňkovéSoubor dat 2, list 6). Většina zvýšených metabolitů byly NEFA (18 z 25 měřených volných mastných kyselin;Obrázek 6A), přispívající k vyšší celkové koncentraci NEFA. Zbývajících 5 zvýšených sloučenin vpodskupina ME-M1 byly všechny sfingolipidy obsahující 18:0 nebo 18:1 (CER[18:0], CER[18:1], DCER[18:0],SM[18:0], SM[18:1]). 227 snížených metabolitů zahrnovalo převážně druhy glycerolipidů (138TAG, 5 DAG, 2 monoacylglyceroly [MAG]) a fosfolipidy (79, včetně 16 lysofosfolipidů),kromě SM(14:1), SM(22;1) a CE(14:1). I když celková koncentrace TAG nebyla signifikantnísnížené vzhledem ke skupině HC, jsou snížené hladiny vícenásobných jednotlivých TAG koherentní s

Obrázek 6. Přehled tříd lipidů.Soubor údajů o sérovém lipidomu byl analyzován pro celkové srovnání skupiny ME/CFS (ME/All) a 3 podskupin metabotypů(M1–M3) vzhledem ke skupině HC. (A) Grafy sopky poskytují obecný přehled všech molekul lipidů v dané třídě s –log10zP-hodnotanay osa a log2 fold změnit naxosa. Každá tečka představuje metabolit a je zbarvena podle směru změny a hladiny významnosti vzhledem k HC asuvedeno (P < 0.05,="" 2-tailed="" welch's="" test;="">q < 0.05,="" adjusted="">Phodnota). Číslo v každém kvadrantu poskytuje příslušné počtyq-významné metabolitya dalšíp-významné metabolity jsou uvedeny v závorkách. (B) Relativní množství specifických mastných kyselin (MK, první sloupec) v různých lipidechtřídy (název sloupce) v celkové skupině ME/CFS (dolní označení, A) a podle podskupin metabotypů (M1–M3). Barva buněk teplotní mapy zobrazílog2 násobek změny vzhledem k HC, jak je uvedeno. *P< 0.05,="" 2-sledovaný="" welchův="" test;="">q< 0.05, upravenoP-hodnota. Total, celkový součet mastných kyselin ve všech třídách lipidů;CE, ester cholesterolu; CER, ceramid; DAG, diacylglycerol; DCER, dihydroceramid; FFA, volná mastná kyselina (synonymní pro neesterifikovanou mastnou kyselinu, NEFA); HCER,hexosylceramid; LCER, laktosylceramid; LPC, lysofosfatidylcholin; LPE, lysofosfatidylethanolamin; LPL, lysofosfolipid; MAG, monoacylglycerol;PC, fosfatidylcholin; PE, fosfatidylethanolamin; PI, fosfatidylinositol; PL, fosfolipidy, SM, sfingomyelin; SP, sfingolipidy; TAG, triacylglycerol.

při laboratorních měřeních byla pozorována relativně nízká celková koncentrace TAG v séru (obrázek 3D). Dáledošlo k významnému nebo trendovému poklesu součtových koncentrací fosfolipidů (PC, PI, trendpro PE) a lysofosfolipidy (LPC, LPE) (soubor doplňkových dat 2, list 3). Nebylo tam žádné významnévliv na celkové hladiny sfingolipidových podtříd, ale byl zde trend pro nižší celkovou hladinu DCER. Vfrakce NEFA, došlo k určitému relativnímu obohacení (molární procenta) mastných kyselin 16:1, 18:1 a 18:2.kyselin, zatímco frakce TAG měla výrazně nižší obsah mastných kyselin C12 a C14 (doplňSoubor dat 2, list 10).

Nálezy jsou kompatibilní se zvýšenou mobilizací a oxidací tukůkyselin, jak naznačují zvýšené koncentrace volných mastných kyselin, glycerolu a ketolátek. Pozorovanézměny v podskupině ME-M1 mohou napodobovat metabolické adaptace, o kterých je známo, že se vyskytují v reakci na energiizátěž vyvolaná hladověním nebo cvičením (50, 51). Teoreticky by taková reakce mohla být způsobena aberantemregulace katabolismu glukózy, chronická vysoká potřeba ATP nebo rozpojení mitochondriálního dýchánícož vede k nadměrnému oxidačnímu toku a neefektivní produkci ATP.Metabotyp ME-M2 lipidom.Tato podskupina měla vyšší koncentrace 538 z 892 lipidových sloučenin anižší koncentrace 27 z 892 ve srovnání se skupinou HC (obrázek 6; soubor doplňkových dat 2, list7). Naprostá většina zvýšených sloučenin byly různé druhy buď TAG (454 druhů) nebo DAG(43 druhů; obrázek 6); v souladu s tím byly významně vyšší celkové sérové ​​koncentrace těchto 2 lipidůtřídy. Byly také vyšší hladiny některých jednotlivých druhů – a celková třídní koncentrace – cholesteroluestery. Mnohočetné jednotlivé fosfolipidy (25 druhů PC, PE a PI) a sfingolipidy (8 druhů SM,CER, DCER a HCER) byly zvýšené, ale hlavně celkové koncentrace těchto tříd sloučeninnedotčeno, kromě třídy PI, která představuje významný nárůst ve srovnání se skupinou HC (doplněkSoubor dat 2, list 3).

Podobně jako u podskupiny ME-M1 nebyl zjištěn žádný významný vliv na celkové hladiny sfinůpodtřídy golipidů. Několik jednotlivých NEFA (10 druhů) mělo nižší sérové ​​koncentrace v podskupině ME-M2ve srovnání se skupinou HC, což přispívá k nižší celkové úrovni NEFA. Pokud jde o přítomnost fosfolipidůnižších úrovních byly účinky v podstatě v souladu se změnami již popsanými jako jednotné v ME/skupina CFS. Zvýšená koncentrace TAG v séru a snížená koncentrace NEFA v podskupině ME-M2ve srovnání se skupinou HC byly potvrzeny v doplňkových laboratorních analýzách (tabulka 2 a obrázek 3D).Ve shodě s vyššími hladinami TAG a DAG došlo k obecnému zvýšení esterifikovaných mastných kyselintyto glycerolipidy v celém spektru mastných kyselin (obrázek 6B). Stručně řečeno, metabolický fenotyp tohotopodskupina byla zvláště charakterizována vysokou sérovou koncentrací TAG (ženy) a nízkou NEFA (obapohlaví). Zvýšený transport TAG a DAG v krvi je často spojen s metabolickou nerovnováhou, nadměrnýmperiferní akumulace lipidů a indukce buněčných a mitochondriálních stresových reakcí. Takové účinky majíbyly popsány jako důsledky různých chronických onemocnění, zahrnujících také kontexty zánětu (34).Metabotyp ME-M3 lipidom.Tato malá podskupina měla vyšší koncentrace 22 z 892 lipidů a nízkékoncentrace 5 z 892 lipidů ve srovnání se skupinou HC (obrázek 6A; soubor doplňkových dat2, list 8). Zvýšení bylo primárně pozorováno u určitých esterů cholesterolu (7 druhů) a fosfolipidů (12druh). Je pozoruhodné, že sérová hladina 6 PE plazmogenů byla v této podskupině vyšší, což je v kontrastuúčinky na tuto fosfolipidovou podtřídu ve 2 dalších podskupinách ME/CFS. Několik málo lipidů představuje nižší sérumkoncentrace v podskupině ME-M3 ve srovnání se skupinou HC zahrnovala 2 druhy NEFA (FFA[14:0],FFA[20:4]) a 3 deriváty PC (LPC[20:2], PC[16:0/22:4], PC[18:1/20:2]). Tato podmnožina se zobrazila výšecelková hladina SM a trendy vyšších hladin esterů celkového cholesterolu a PE ve srovnání se skupinou HC.Bylo zjištěno relativně málo účinků, pokud jde o složení mastných kyselin různých tříd lipidů (obrázek 6B).Zdálo se, že několik postižených jednotlivých rysů bylo jedinečných pro tuto podskupinu ve srovnání s ostatními,ale možné důsledky je obtížné vyhodnotit kvůli nízkému počtu subjektů. Prohlížení celkuTendencí se zdálo, že podmnožina ME-M3 je více podobná podmnožině ME-M2 než podmnožině ME-M1,jak naznačuje trendová elevace TAG.Hormonální signatury metabolického stresuZkoumali jsme cirkulující hladiny vybraných hormonů řídících energetickou homeostázu v souvislostechfyziologického napětí, zánětu a patogeneze (obrázek 7). Ve srovnání se skupinou HC je ME/Skupina CFS měla mírně zvýšené průměrné hladiny inzulínu a leptinu v séru, stejně jako nižší vysokou molekulovou hmotnost(HMW) adiponektinu (obrázek 7, A–C). To však bylo primárně řízeno podmnožinou ME-M2, protože není významnénebo trendový efekt byl pozorován u ostatních. V souladu se zvýšeným inzulínem měla podskupina ME-M2 také anzvýšená střední koncentrace C-peptidu (obrázek 7D). Tyto specifické účinky na hormonální hladiny podporují různéregulačních souvislostech v podskupinách ME-M1 a ME-M2 a zjištění jsou v souladu s pozorovanýmimetabolické fenotypy indikující sníženou utilizaci glukózy (ME-M1) a nadměrnou akumulaci lipidů (MEM2). Kromě toho byly ve skupině ME/CFS zvýšené sérové ​​koncentrace FABP4 a FGF21ve srovnání se skupinou HC (obrázek 7, E a F). Tyto faktory jsou považovány za signály energetické zátěže abyly spojovány s metabolickým onemocněním i cvičením (52, 53). Významný byl pouze podskupina ME-M2zvýšení FGF21. Byla zde malá skupina pacientů s obzvláště vysokou hladinou FGF21ME-M2 podskupina a máme podezření, že to může znamenat nadměrnou zátěž jaterního metabolického stresu. Nadmořská výškav séru koncentrace FABP4 byla podobná v podskupinách ME-M1 a ME-M2. Pozorované endokrinnípříznaky jsou v souladu s deregulovaným metabolismem a zvýšenou energetickou zátěží u pacientů s ME/CFS,a s odkazy na regulační sítě, které mohou vysvětlit kontextově závislé reakce.

Obrázek 7. Změny v sérových signálních faktorech jsou spojeny s energetickým metabolismem. 

Vybrané hormony potenciálně spojené s energetickou zátěží a deregulacímetabolismus byly měřeny v séru pacientů s ME/CFS a HC pomocí imunitních metod. (A–F) Koncentrace v séru bylaměřeno u 83 pacientů s ME/CFS a 30 pacientů s HC na inzulín (pg/ml) (A), leptin (ng/ml) (B), HMW adiponektin (μg/ml) (C), C-peptid (pM) (D),  FGF-21 (pg/ml) (E) a FABP4 (ng/ml) (F). Je uveden medián skupiny ± IQR. ZobrazenéPhodnoty (vpravo nahoře) jsou pro 4-skupinové srovnání HC, M1,M2 a M3 pomocí 1-způsobu Kruskal-Wallis ANOVA. *P <0.05, mann-whitney="">Utest; **q < 0.05,="" adjusted="">P-hodnota

Diskuse

Tato explorativní metabolomická studie odhalila mapu běžných a variabilních metabolických fenotypů ME/CFS. Pozorované metabolické změny zapadají především do paradigmatu přímých a nepřímých účinků energiekmen. Fyziologická relevance byla podpořena asociacemi s endokrinními a klinickými charakteristikami.Prostřednictvím následující diskuse navrhujeme, že energetická zátěž může být důsledkem hypoxie tkáně citlivé na námahua vede k systémovým vzorcům metabolické adaptace a kompenzace.Běžným metabolickým změnám ve skupině ME/CFS dominoval relativně malý početcesty s věrohodným dopadem na energetickou homeostázu. Zvýšený cirkulující glycerol naznačuje, že lipolýza jeindukované, a to je normálně pozorováno během půstu a cvičení (35, 48). Kromě toho několik nálezůsouhlasí se změněnou utilizací aminokyselin u pacientů s ME/CFS, včetně BCAA, tryptofanu,a další. Nárůst produktů rozkladu purinových nukleotidů, jako je adenosin a xanthosinse také objevil jako možný podpis energetické zátěže, která normálně odráží zvýšené nároky na ATP azměněný metabolismus aminokyselin ve svalech (36). Systémový metabolický stres byl podpořen zvýšeným FABP4a FGF21, které mohou signalizovat kompenzační programy, stejně jako tkáňově specifické odpovědi (54, 55). CorticoZdá se, že steroidy nebyly zapojeny, protože závisely na věku a BMI namísto skóre fyzických funkcí(Doplňkové údaje 3) a nezjistili jsme změny ranního kortizolu a ACTH u ME/CFS ve srovnánís HC. Došlo zejména ke ztrátě některých fosfolipidů obsahujících kyselinu linolovou (18:2). Tato mastná kyselina jeesenciální prekurzor kyseliny arachidonové, centrální mediátorová molekula spojená se zánětem a vasodilatace. Snížení hladiny derivátů kyseliny arachidonové, jako jsou 12-HETE a 12-HHTrE, dále naznačuježe mohou být ovlivněny auto- a parakrinní procesy. Jak je dále diskutováno níže, některé z těchto účinků mohou býtspojené s mechanismy, které se pravděpodobně účastní symptomů ME/CFS.

Účinky, které byly heterogenní ve skupině ME/CFS, vyjadřovaly specifické fenotypy deregulaceenergetický metabolismus v podskupinách pacientů. 2 nejvýraznější metabotypy ME/CFS, ME-M1 a ME-M2,v souladu s dobře známými fenotypy chronických onemocnění s imunometabolickými projekcemi (34, 37, 38). Toje třeba mít na paměti, že žádný z pacientů naší studie neměl klinickou prediabetickou nebo diabetickou diagnózu. ThePodskupina ME-M1 vykazovala zvýšené sérové ​​hladiny volných mastných kyselin (tj. NEFA) a ketolátek, navzdory normálnímglukózy a inzulínu. To může připomínat kontext s fyziologickými korelacemi s hladověním glukózy a námahoucise (33, 35). V podskupině ME-M2 byl odlišný metabolický profil vyjádřen zvýšeným sérovým TAG aprůměrné hladiny inzulinu, ale hladina glukózy v krvi nebyla ovlivněna. To může odrážet známky nízkého stupně lipidem indukovaného insurezistence vůči linu spojená s ektopickou periferní akumulací lipidů a zánětlivými reakcemi (56). Obaautoregulace průtoku krve byla zjištěna u osob s nevysvětlitelnou intolerancí námahy, možná přesmechanismy účinků endoteliální a mikrocirkulační dysfunkce na vaskulární endotel (66, 76, 77, 79,80). V souhrnu jsme zjistili, že metabolické změny u pacientů s ME/CFS jsou kompatibilní s narušenýmenergetika vynucená tkáňovou hypoxií při námaze. K tomu by měla být provedena další šetřeníteorii a identifikovat možné podpůrné strategie pro zlepšení klinické péče.Možná omezení studie zahrnovala stabilitu metabolitů a omezenou přesnost globálního necílenéhometabolomika (81). Omezení výběru jednorozměrných funkcí pro účely shlukování a identifikaceZačlenění podtypů pacientů do vysokorozměrných datových souborů je ve statistické komunitě dobře známým problémem (82, 83)(Doplňkové údaje 1). Naše komplexní vyhodnocení možných zmatků jako je pohlaví, BMI, věk, strava, popřmedikace nenaznačila, že by to byly hlavní hnací síly fenotypů ME/CFS, ale mohou přispívatk individuální variantě (doplňkové údaje 1). Silnou stránkou studie bylo, že statistické analýzy byly silnély a nezávisle podpořeny mnoha vrstvami biochemických nálezů a zdůvodnění.Stručně řečeno, studie poskytuje mapu metabolických změn vyskytujících se u pacientů s ME/CFS.Zjistili jsme, že pozorované změny jsou kompatibilní se zvýšenou energetickou zátěží, například způsobenou tkáníhypoxie při námaze. Potenciální role konkrétních cest bude třeba ověřit a dále prozkoumatcílené studie.

Metody

Pacienti s ME/CFSa HC. Celkem 83 pacientů s ME/CFSa 35 HC bylo zahrnuto do této studie.Všichni pacienti splnili kanadská konsenzuální kritéria pro ME/CFS (1). Byly odebrány vzorky krvepřed intervencí (základní hodnota) ve 2 samostatných klinických studiích vedených univerzitní nemocnicí Haukeland, „RituxME“ (ClinicalTrials.gov NCT02229942, 2014–2017; ref. 45) a „CycloME“ studie (ClinicalTrials.govNCT02444091, 2015–2020; ref. 12). Vzorky HC byly odebrány (od roku 2015 do roku 2017) od subjektů sžádné chronické onemocnění nebo chronická medikace – především od personálu na onkologickém oddělení v HaukelanduFakultní nemocnice a Ústav biomedicíny Univerzity v Bergenu. Byla vybrána skupina HCaby přibližně odpovídaly věkové a pohlavní distribuci skupiny ME/CFS. Biometrické charakteristiky pro HCsubjektů a pacientů s ME/CFS jsou shrnuty v tabulce 1, která také obsahuje údaje pro podskupinypacientů s ME/CFS anotovaných ke 3 různým metabotypům vyvinutým v této studii.Vzorky krve byly odebrány žilní punkcí, zpracovány podle standardizovaného postupu biobankyjak je popsáno ve zkušebních protokolech a uloženy při –80 stupních (12, 45). Všichni pacienti s HC a 71 pacientů s ME/CFS,při odběru vzorků se nepostili. Zbývajících 12 vzorků ME/CFS bylo odebráno po nočním hladověnía byly zahrnuty pro usnadnění hodnocení možného dopadu postprandiálního stavu. Klinická krev a sérumanalýzy byly prováděny podle standardních laboratorních postupů v nemocnici.Globální metabolomika a lipidomika.Pro analýzy metabolitů jsme zahrnuli vzorky séra ze všech 83pacientů a 35 pacientů s HC. Analýzy byly provedeny společností Metabolon Inc. za použití jejich standardních metod. Data byla získána použitím 2 analytických platforem založených na hmotnostní spektrometrii, jeden globální metabolitplatforma (HD4) poskytující měření a identifikaci 882 sloučenin pokrývajících široké spektrum molekula jeden CLP, který posuzoval 1005 různých molekulárních druhů 14 tříd lipidů. Vzorky bylyanalyzovány v denních blocích s několika úrovněmi kontroly kvality vzorků a dat, jako jsou mezidenní variacekorekce před normalizací dat.Analýzy metabolických hormonů.Pro analýzy metabolických hormonů jsme zahrnuli stejné vzorky, kromě 5 HC,kde bylo nedostatečné množství séra. Vzorky séra byly zředěny a byly provedeny testypodle pokynů výrobce. Soupravy založené na technologii Luminex multiplex bead immunoassay(přístroj Luminex 100, Luminex Corp.) byly použity k detekci FABP4, inzulinu, HMW adiponektinu a leptinu(katalog LXSAMH, R&D systémy). K měření FGF21 byla použita ELISA (katalog DF2100, R&D Systems) aC-peptid (katalog DICP00, R&D systémy). Měření byla provedena pomocí čtečky mikrodestiček Spark(Tecan Trading AG). Analýza dat byla provedena v Excelu, GraphPad Prism a R.Statistika.Všechny analýzy dat byly provedeny v prostředí R studio (84) pomocí R programováníjazyk (85). Nejprve jsme z dat odstranili xenobiotika a metabolity s více než 25 procenty chybějících hodnota vzor chybějících hodnot byl posouzen pomocíχ2 a Fisherův exaktní test pro srovnání skupin a pohlaví. Chybějící hodnoty byly přičteny pomocí metody polovičního minima (86). Imputovaná data byla kvantilně normalizována, log2 transformované a automaticky škálované. Složit změny,Phodnoty (2-sledovaný Welchův test) a upravenyPhodnoty(Benjamini-Hochbergova úprava) byly vypočteny pomocí základních funkcí v R. Data v automatickém měřítku byla filtrovánana základě neupravených významných metabolitů (P< 0.05),="" abyste="" snížili="" rozměrnost="" v="" datech.="" po="" řádcích="" a="">k-průměry byly provedeny na významných rysech ke shlukování metabolitů a vzorků a vybrali jsme oddílyshluků vedených součtem čtverce v rámci shluku (wss), statistikou mezer a metodou siluety. Toto bylo vizualizovánov heatmap pomocí balíčku ComplexHeatmaps (87) a výsledné shluky byly extrahovány aHC organizované do samostatného HC clusteru. Tyto shluky byly použity jako vizualizační překryv na nezávislýchPCA a graf zatížení byl použit k vizualizaci zatížení z PC1 a PC2 pomocí ggplot2 (88).

Jednorozměrnáanalýza byla provedena na extrahovaných shlucích z vícerozměrné analýzy. Metabolity byly organizoványdo drah podle anotací poskytnutých Metabolon Inc.Phodnoty a upravenyP hodnoty z metabolitů v každé příslušné dráze byly vizualizovány pomocí ggplot2. Vybrané biometrické údaje bylykoreloval s metabolity, které vykazovaly jednotné změny mezi shluky pomocí Spearmanovy metody, aP<0.05 bylo nastaveno jako omezení. To bylo vizualizováno pomocí balíčku ggplot.Data z platformy CLP byla předzpracována odstraněním proměnných s více než 10 procenty chybějícíchhodnoty v souboru dat a byly imputovány s použitím minimální pozorované hodnoty pro každý metabolit. Vzorkybyly uspořádány do příslušných shluků získaných z dřívější analýzy HD4 a násobných změn,P hodnoty (Welchův test) a upravenyPhodnoty (FDR) byly vypočteny pomocí základních funkcí v rámci R. Associatedmetadata týkající se lipidových tříd byla získána od Metabolon Inc. a R package Lipidr (89).

Thevýsledná data byla vizualizována pomocí ggplot2. Popisné statistiky byly provedeny pomocí 2-tailed Welch'stest pro normálně distribuovaná data, Mann-WhitneyUtesty pro proměnné se zkresleným rozdělením aχ2 aFisherovy exaktní testy pro kategorické proměnné (GraphPad Prism). Bylo provedeno srovnání 3 nebo více skupinpomocí 1-způsobu testu ANOVA.Schválení studie.Klinické studie, ze kterých byly získány vzorky biobanky, včetně vzorků zzdravé kontroly, byly schváleny Regionální etickou komisí (Tromsø, Norsko; č. 2010/1318-4, č.2014/365, a č. 2014/1672). Všichni pacienti poskytli písemný informovaný souhlas.

NAJDĚTE NEJLEPŠÍ BOTANICKOU CELOSTNÍ PÉČI PRO OBNOVENÍ ÚNAVY SPOJENÉ S NEMOCMI

Naše pečlivě ručně vyrobená receptura Neuro Regen obsahuje ty nejlépe prozkoumané bylinky. Každý z nich ukazuje úžasný potenciál pro zvládání bolesti nervů a celkovou podporu nervů a neuronů.

Zahrnuje:

Cistanche- 

Cistanche je nejčastěji používaná bylina v receptech tradiční čínské medicínyzmírnění fyzické únavy. Ve skutečnosti je Cistanche druh potravinového materiálu. Na teoretickém základě tradiční medicíny provedla moderní medicína také mnoho výzkumůúčinek proti únavězCistanche. Experimenty prokázaly, žeúčinek proti únavěof Cistanche je způsobeno zlepšením tělesných orgánůCistanche. Cistanchemůže zlepšit funkce ledvin a jater, čímž se dosáhne anúčinek proti únavě. Následuje přehled toho, jak Cistanche umízmírnit únavu.

4 Charakteristika glykosidů Cistanche

S rozvojem společnosti je život lidí stále rychlejší. Od chvíle, kdy vyjde slunce, jako součást „živého stroje“ musí každý spěchat na svá stanoviště. Ať už jste technik stojící v dílně, obchodník s akciemi sedící u počítače nebo dokonce student hrající si na hřišti...musíte čelit nespočtu tlaků. Práce lidí jsou různé, ale všechny mají jeden společný problém – únavu. Únava je jako šváb schovaný v rohu kuchyně. Nemá žádnou podstatnou škodu, ale vždy sužoval lidi.

Pokud něčemu nerozumíte, neváhejte a řekněte mi:wallence.suen@wecistanche.com